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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及半胱氨酸纯度检测方法,特别涉及fmoc-s-三苯甲基-l-半胱氨酸纯度检测方法。
技术介绍
1、常规fmoc-s-三苯甲基-l-半胱氨酸纯度检测,需要用到高效液相色谱方法,常规采用c18色谱柱,流动性用到正乙腈/水,常规洗脱液会出现严重拖尾,且峰对称度差。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种fmoc-s-三苯甲基-l-半胱氨酸纯度检测方法,主要解决现有液相色谱方法存在的峰型拖尾以及目标峰与相邻杂质峰分离度等技术问题。
2、本专利技术采用了以下技术方案:带fmoc-s-三苯甲基-l-半胱氨酸纯度检测方法,包括以下步骤:
3、步骤一,准备测量的试剂:甲醇-色谱纯,乙腈-色谱纯,超纯水,:化学纯三氟乙酸。
4、步骤二:样品溶液的配制:称取试样置于容量瓶中,加入乙腈,室温条件下采用超声波溶解,再用水定容,最后试样用聚丙烯有机滤膜过滤后进行hplc分析。
5、 步骤三,进行高效液相色谱测定;色谱测定的的过程为:色谱条件为样品室温度为40℃,自动进样器进样体积为10 µl,色谱柱采用agilent poroshell 120 ec-c18,柱温:40 ℃,流速:1.0 ml/min,流动相a为摩尔浓度0.1%tfa水溶液;流动相b相为质量百分浓度100%甲醇溶液,采用梯度洗脱程序。
6、所述的液相色谱测定时采用的色谱仪为安捷伦 1260色谱仪,该色谱仪采用dad二极管列阵检测器。色谱柱尺寸为4.6mm ×150mm,
7、本专利技术具有以下有益效果:本专利技术方法操作简便、快速、准确,稳定性好,更主要是主峰峰型对称,与相邻未知杂质分离度好等;本专利技术采用了高效液相色谱仪的自动进样器的精准定量,利用dad二极管列阵检测器的灵敏度可以对带fmoc-s-三苯甲基-l-半胱氨酸有很好的响应值,解决了峰拖尾以及相邻杂质峰分离度现象。达到了低浓度,高响应、基线级分离的技术效果。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸纯度检测方法;其特征是:包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸纯度检测方法,其特征是:所述的液相色谱测定时采用的色谱仪为Agilent 1260 液相色谱仪,该仪器采用DAD二极管阵列检测器。
3. 根据权利要求1所述的Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸纯度检测方法,其特征是:所述色谱柱尺寸为4.6mm ×150mm, 4.0μm。
4. 根据权利要求1所述的Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸纯度检测方法,其特征是:所述的梯度洗脱程序为:0~30min,V(B)为35%到80%, 30~30.1 min,V(B)从80% 到35% 的初始比例,30.1~40 min,V(B)从35% 平衡系统。
【技术特征摘要】
1.fmoc-s-三苯甲基-l-半胱氨酸纯度检测方法;其特征是:包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的fmoc-s-三苯甲基-l-半胱氨酸纯度检测方法,其特征是:所述的液相色谱测定时采用的色谱仪为agilent 1260 液相色谱仪,该仪器采用dad二极管阵列检测器。
3. 根据权利要求1所述的fmoc-s-三苯甲基-l-半胱氨酸纯...
【专利技术属性】
技术研发人员:徐红岩,夏伟冬,虞伟,陈炜,颜行,
申请(专利权)人:上海吉奉生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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