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基于植物的COVID-19变异重组刺突蛋白表达载体及利用上述表达载体的重组蛋白制造技术

技术编号:40998632 阅读:6 留言:0更新日期:2024-04-18 21:37
本发明专利技术涉及基于植物的新型冠状病毒肺炎(COVID‑19)变异重组刺突蛋白表达载体及利用上述表达载体的重组蛋白,其中,利用植物表达系统,使得上述重组蛋白没有动物来源重组蛋白的缺点,并且,表现出优秀的SARS‑CoV‑2预防及治疗效果,因此,可有用地用作用于预防及治疗COVID‑19的安全组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及基于植物的covid-19变异重组刺突蛋白表达载体及利用上述表达载体的重组蛋白。本申请要求于2021年7月19日提交且申请号为第10-2021-0093990号及于2022年7月19日提交且申请号为第10-2022-0088990号的韩国专利申请的优先权,该申请的全部内容通过引用结合在本申请中。


技术介绍

1、sars-cov-2为新型冠状病毒肺炎-19(covid-19)的病原体,确认人对人(human-to-human)感染。据悉sars-cov-2通过位于刺突蛋白的全长氨基酸序列的331-524的受体结合区(receptor-binding domain,rb

2、d)与血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme2,ace2)受体结合,由此强烈附着在宿主细胞的表面。

3、covid-19的主要症状为发热和咳嗽、咽喉痛、呼吸困难等呼吸道症状,根据患者的不同表现为头痛、肌肉酸痛、咯血和恶心、发冷、胸痛、腹泻、味觉和嗅觉下降、肺功能受损等。健康的成年人很有可能随着时间

4、的推移恢复,但当老弱者或有基础疾病的人等免疫功能低下的人感染时,可能会致命。据报告,部分患者感染后会发生急性呼吸窘迫综合征(ard

5、s)急性肺损伤、败血性休克、急性肾损伤等,严重时可能会导致死亡。

6、然而,尽管sars-cov-2具有高传播力和高风险性,但到目前为止,只有少数经过验证的疫苗或治疗药物被开发出来用于预防或治疗sars-c

>7、ov感染疾病。因此,在全球范围内成为一大热点的sars-cov和mers-

8、cov感染症随时都有可能再次流行或出现新的大流行现象,因此需要迅速

9、生产疫苗用病毒。

10、另外,作为可替代动物细胞或微生物的有用生理活性物质生产方法,利用植物表达系统生产蛋白质的方法近年来备受关注。植物细胞中的翻译(translation)为蛋白质后的修饰(modification)与动物细胞中的翻译后修饰非常类似,可以准确地生成复合蛋白质(multimeric protein),对于糖蛋白,能够以糖化(glycosylation)的形式分离,因此具有可获得与原来蛋白质形态相同的修饰的蛋白质的优点。

11、而且,在使用植物体生产有用生理活性物质的情况下,可以从源头上排除在动物细胞或微生物中生产蛋白质时可能产生的各种污染源,若该有用物质的需求剧增,则相比于现有的动物细胞系统,批量生产所需的设备技术或费用方面绝对有利,因此,具有可在最短时间内能够以低费用批量生产的优点。

12、但是,目前几乎没有报告利用植物体制造的重组蛋白预防或治疗sars-cov-2的组合物。


技术实现思路

1、技术问题

2、本专利技术人进行了使用植物表达系统制备没有动物来源重组蛋白的缺点,且表现出优秀的sars-cov-2预防及治疗效果的重组蛋白的研究,从而完成了本专利技术。

3、本专利技术的一目的在于,提供一种用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其中,在编码刺突糖蛋白的s1亚基的由seq id no.1的氨基酸序列表示的多核苷酸中,上述s1亚基在选自由距上述氨基酸序列的n末端的第417位、第484位、第501位及第614位组成的组中的一个以上的位置存在变异。

4、本专利技术的再一目的在于,提供一种转基因生物,其由上述重组载体转化。

5、本专利技术的另一目的在于,提供一种用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白制备方法,上述方法包括如下的步骤:将上述重组载体转化至植物体;以及从上述植物体分离及纯化重组抗原。

6、本专利技术的还有一目的在于,提供一种用于预防或治疗covid-19的组合物,其包含通过上述方法生产的抗原作为有效成分。

7、本专利技术的又一目的在于,提供一种用于预防或治疗covid-19的试剂盒,其包含通过上述方法生产的抗原作为有效成分。

8、本专利技术的又一目的在于,提供一种covid-19预防或治疗方法,其包括向除人之外的动物给药组合物,上述组合物包含通过上述方法生产的抗原作为有效成分。

9、本专利技术的又一目的在于,提供一种用于预防或治疗covid-19的疫苗组合物,其包含上述载体或通过上述方法生产的抗原作为有效成分。

10、此外,本专利技术的又一目的在于,提供一种组合物在预防或治疗covid-19中的用途,其包含上述载体或通过上述方法生产的抗原作为有效成分。

11、此外,本专利技术的又一目的在于,提供一种组合物在制备用于治疗的药剂中的用途,其包含上述载体或通过上述方法生产的抗原作为有效成分。

12、但是,本专利技术所要解决的技术问题并不局限于以上所提及的问题,普通技术人员可通过以下记载明确理解未提及的其他问题。

13、技术方案

14、为了实现如上所述的目的,本专利技术提供一种用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其中,在编码刺突糖蛋白的s1亚基的由seqid no.1的氨基酸序列表示的多核苷酸中,上述s1亚基在选自由距上述氨基酸序列的n末端的第417位、第484位、第501位及第614位组成的组中的一个以上的位置存在变异。

15、在本专利技术的一具体例中,上述重组载体还包含编码刺突糖蛋白的s2亚基的由seqid no.2的氨基酸序列表示的多核苷酸,上述s2亚基在选自由距上述氨基酸序列的n末端的第942位、第986位及第987位组成的组中的一个以上的位置存在变异,但并不限定于此。

16、在本专利技术的再一具体例中,上述变异可以为选自由k417n、e484k、n501y及d614g组成的组中的一个以上的变异,但并不限定于此。

17、在本专利技术的另一具体例中,上述变异可以为选自由a942p、k986p及v987p组成的组中的一个以上的变异,但并不限定于此。

18、在本专利技术的还有一具体例中,上述重组载体还可包含编码新型伴侣结合蛋白(newchaperone binding protein;new bip;nb)的多核苷酸,但并不限定于此。

19、在本专利技术的又一具体例中,上述重组载体还可包含编码fd(foldon)蛋白的多核苷酸,但并不限定于此。

20、在本专利技术的又一具体例中,上述重组载体还可包含编码hdel蛋白的多核苷酸,但并不限定于此。

21、在本专利技术的又一具体例中,上述重组载体还可包含编码s1亚基与s2亚基之间的弗林蛋白酶切割位点(furin cleavage site,prra)的抗体的多核苷酸,但并不限定于此。

22、在本专利技术的又一具体例中,上述重组载体可在植物体中表达,但并不限定于此。

23、本专利技术提供一种转基因生物,其由上述重组载体转化。

24、在本专利技术的又一具体例中,上述转基因生物可以为植物体,但并不限定于此。本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

2.根据权利要求1所述的用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

3.根据权利要求1所述的用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

4.根据权利要求2所述的用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

5.根据权利要求1所述的用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

6.根据权利要求1所述的用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

7.根据权利要求1所述的用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

8.根据权利要求1所述的用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

9.根据权利要求1所述的用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

10.一种转基因生物,其特征在于,

11.根据权利要求10所述的转基因生物,其特征在于,

12.一种用于预防或治疗COVID-19的抗原蛋白制备方法,其特征在于,包括如下的步骤:

13.一种用于预防或治疗COVID-19的组合物,其特征在于,

14.一种用于预防或治疗COVID-19的试剂盒,其特征在于,包括:

15.一种COVID-19预防或治疗方法,其特征在于,

16.一种用于预防或治疗COVID-19的疫苗组合物,其特征在于,

17.一种组合物在预防或治疗COVID-19中的用途,其特征在于,

18.一种组合物在制备用于治疗COVID-19的药剂中的用途,其特征在于,

...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

2.根据权利要求1所述的用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

3.根据权利要求1所述的用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

4.根据权利要求2所述的用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

5.根据权利要求1所述的用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

6.根据权利要求1所述的用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

7.根据权利要求1所述的用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

8.根据权利要求1所述的用于预防或治疗covid-19的抗原蛋白的重组载体,其特征在于,

【专利技术属性】
技术研发人员:孙恩珠崔宝化姜享注闵庚民朴民姫金南亨丹尼尔·金李裕卿金秉喆林羲志张仙东金光旭金秀智金都槿金庾珍李姃娥朴友锭
申请(专利权)人:巴伊沃爱普有限公司
类型:发明
国别省市:

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