【技术实现步骤摘要】
本公开涉及生物检测领域，具体涉及一种新型荧光底物及其用途。
技术介绍
1、在疾病诊断领域，高特异性、高灵敏的检测分析目标细胞的标志物具有重要的意义。荧光分析方法具有极高的时空分辨率，能够实现对目标细胞的核酸和蛋白质等生物分子的有效检测，有着广泛的生物医学应用。然而，某些与疾病相关的生物分子(如循环上皮细胞、循环内皮细胞、免疫细胞、及其他肿瘤生物标志物等)在生物体内的含量非常低，常规的荧光检测技术无法对其进行准确分析，因此，仍然需要设计和构建选择性更好、灵敏度更高的荧光生物传感器。
2、目前用于免疫荧光检测的荧光抗体，检测灵敏度普遍不高，尤其是用于荧光显微镜扫描分析时，对于一些表达量较低的样本，使用常规的荧光抗体难以检测出。
3、酪胺信号放大(tsa)是一种酶介导的放大技术，在有过氧化氢存在的情况下，辣根过氧化酶(hrp)可以催化酪胺转变成氧活性自由基，该中间体可以快速的共价结合到蛋白质或hrp链接的抗体上。在酪胺分子上结合荧光染料，形成共价键结合位点，从而稳定高效地将荧光素富集到目标细胞的周围，并沉积到目标细胞上，使检测信号得到几何级放大。但该方法目前使用的荧光底物tsa-fitc(fitct)检测灵敏度仍然较低，需要进一步提高检测灵敏度，这主要是因为fitc荧光素本身的荧光信号强度不够，目前也有一些其他荧光素如alexa fluor488、dylight488、ifluor488等，但这些荧光素均为进口试剂，成本较高。
技术实现思路
1、本公开的目的在于提
2、在一方面，本公开一种式(i)所示的化合物或其立体异构体，
3、
4、其中，
5、r1、r2、r4、r5、r6独立选自氢、卤素、c1-c9的烷基、c1-c9的烷氧基。在一些实施方案中，所述烷基为c1-c3的烷基，所述烷氧基为c1-c3的烷氧基。
6、r3选自氢、卤素、c1-c9烷基、c1-c9烷氧基、-c1-c9烷基-未取代的芳基或取代的芳基、-c1-c9烷基-未取代的杂芳基或取代的杂芳基、-烯基-未取代的芳基或取代的芳基、-烯基-未取代的杂芳基或取代的杂芳基。在一些实施方案中，所述烷基为c1-c3的烷基。在一些实施方案中，所述烷氧基为c1-c3的烷氧基。在一些实施方案中，所述烯基选自c2-c9的烯基。在一些实施方案中，所述烯基优选为c2-c5的烯基。在一些实施方案中r3选自-ch＝ch-ch＝ch-ch2-、-ch2-ch＝ch-。
7、在一些实施方案中，取代的芳基或杂芳基被1-3个独立地选自下列基团的取代基所取代：卤素、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基、卤代c1-c3烷基、卤代c1-c3烷氧基、芳基、杂芳基。
8、本公开提供的化合物可以作为荧光底物，可以实现高效的荧光检测，可以替代fitc应用在tsa检测，并且具有相对更高的检测灵敏度，能够高效检测出低表达的标志物，具有明显的优势。
9、本公开提供的荧光底物通过酪氨信号放大技术提高低丰度靶标的成像质量，提供的荧光底物覆盖的吸收波长范围为400-600nm，优选范围为488-594nm。在实际应用中，可根据不同的检测条件和要求选择不同吸收波长的荧光底物。
10、在一方面，本公开还提供了用于吸收波长为488nm附近的bdp-a、bdp-b、bdp-c的荧光底物和用于吸收波长为594nm附近的bdp-d、bdp-e、bdp-f荧光底物，与传统的荧光二抗检测方法相比，bdp-a、bdp-b、bdp-c、bdp-d、bdp-e、bdp-f的检测灵敏度更高，能够检测出低表达的标志物。
11、在另一方面，本公开还提供了一种试剂组合，所述试剂组合包含所述的化合物或其立体异构体。
12、在另一方面，本公开还提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括所述的化合物或其立体异构体或所述的试剂组合。
13、在另一方面，本公开还提供了一种标记分子靶标的方法，所述方法包括使所述分子靶标与所述的化合物或其立体异构体或所述的试剂组合接触的步骤。
14、在另一方面，本公开还提供了一种样本成像的方法，所述方法包括使样本与所述的化合物或其立体异构体或所述的试剂组合接触。
15、在另一方面，本公开还提供了所述的化合物或其立体异构体、所述的试剂组合或所述试剂盒在制备荧光检测试剂或细胞成像试剂中的用途。
16、本公开所取得的有益效果至少如下：
17、1.本公开提供了一种新的化合物或其立体异构体，该化合物或其立体异构体可以作为荧光底物，实现高灵敏荧光检测，可广泛用于检测特异性抗原低表达的细胞。使用本公开荧光底物检测系统，具有更高的检测灵敏度，同时不影响特异性。
18、2.本公开提供的试剂组合及检测方法，相较于传统的荧光二抗方法及tsa-fitct方法，具有更高的检测灵敏度及检测稳定性。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种式(I)所示的化合物或其立体异构体，
2.权利要求1所述的化合物或其立体异构体，所述的化合物为式(II)所示的化合物，
3.权利要求2所述的化合物或其立体异构体，所述的化合物为A、B、C、D、E或F所示的化合物，
4.一种试剂组合，所述试剂组合包含权利要求1-3中任一项所述的化合物或其立体异构体；
5.一种试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1-3中任一项所述的化合物或其立体异构体或权利要求4所述的试剂组合。
6.一种标记分子靶标的方法，所述方法包括使所述分子靶标与权利要求1-3中任一项所述的化合物或其立体异构体或权利要求4所述的试剂组合接触的步骤。
7.一种样本成像的方法，所述方法包括使样本与权利要求1-3中任一项所述的化合物或其立体异构体或权利要求4所述的试剂组合接触；
8.权利要求7所述的方法，其包括以下步骤：
9.权利要求6-8中任一项所述的方法，其中，化合物的浓度为至少为0.05μg/mL、0.1μg/mL或0.15μg/mL；
10.权利要求1-3中任一项所述
...【技术特征摘要】
1.一种式(i)所示的化合物或其立体异构体，
2.权利要求1所述的化合物或其立体异构体，所述的化合物为式(ii)所示的化合物，
3.权利要求2所述的化合物或其立体异构体，所述的化合物为a、b、c、d、e或f所示的化合物，
4.一种试剂组合，所述试剂组合包含权利要求1-3中任一项所述的化合物或其立体异构体；
5.一种试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1-3中任一项所述的化合物或其立体异构体或权利要求4所述的试剂组合。
6.一种标记分子靶标的方法，所述方法包括使所述分子靶标与权利要求1-3中任一项...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈林，唐东江，张雷，毛文杰，黄卫平，
申请(专利权)人：珠海圣美生物诊断技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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