【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物栽培，具体涉及一种芒果糖代谢分析方法。
技术介绍
1、芒果(mangifera indica l.)为漆树科芒果属植物，是世界五大热带水果之一(香蕉、菠萝、番荔枝、芒果、龙眼)，享有“热带果王”之美誉。我国是芒果主要生产国之一，许多地区以芒果为支助产业。芒果的品种资源繁多，共有37类1000多个品种，经质量测定的也有300余种。芒果营养丰富，味道鲜美，深受消费者欢迎。糖是果实品质和风味物质的主要成分，其组成和含量是决定果实品质的重要因子。但许多外观优良的芒果品种存在低糖、风味淡的问题而未能成为商业化主栽品种，这在一定程度上制约了芒果优良种质资源的开发和新品种选育进程。因此，提高果实糖积累水平一直是许多科技工作者关注的目标。然而，由于成熟度标准难确定和品种资源缺乏的限制，国内外关于芒果淀粉←→可溶性糖代谢的研究报道很少，芒果果实淀粉←→可溶性糖转化机制仍有待深入探讨。因此，开展代谢调控机理的基础研究，利用数学语言和网络构象表达它们之间的复杂联系，挖掘芒果糖积累变化规律及其代谢相关酶关键调控因子，阐明其遗传方式与调控机理显得尤为重要，对利用丰富的芒果品种资源选育符合消费需求的新品种，打破商业芒果自主选育品种少的格局，促进芒果产业增效、果农增收具有重要意义。
2、糖积累水平是一系列因子共同作用的结果，如光合产物的生产、运输、分配以及它在果实中的代谢。但是，最终运入果实中的同化产物是由它在果实中的代谢决定的，因而，在了解糖的生产、运输及分配之后，掌握糖在果实中的代谢规律及其调控机制将更有助于实现对果实糖含量
3、芒果的糖分积累类型是淀粉转化型(张上隆和陈昆松，2007)。淀粉是芒果蔗糖合成的碳源，也是芒果采摘成熟期之前碳水化合物的主要存在形式(bernardes-silva，2003；bernardes-silva，2008)。芒果成熟过程，果实中的淀粉被淀粉酶水解，生成葡萄糖，为芒果的糖代谢提供了物质基础，之后葡萄糖在6-磷酸-葡萄糖异构酶的作用下转化为果糖，生成的葡萄糖和果糖在蔗糖磷酸合成酶作用下合成蔗糖，而酸性转化酶又可催化蔗糖，分解生成葡萄糖和果糖(mattoo andmodi，1969；魏长斌等，2008)。bernardes-silva等(2008)的研究已经明确了keitt品种在果实发育和成熟阶段的淀粉含量、可溶性糖分含量、α-淀粉酶、β-淀粉酶、异淀粉酶、磷酸化酶活性的变化规律。我们课题组成员早前关于爱文芒果可溶性糖的研究发现，在芒果发育阶段，与蔗糖合成相关酶类：蔗糖转化酶(inv)、酸性转化酶(ai)、和蔗糖磷酸合成酶(sps)，蔗糖合成酶(ss)和中性转化酶(ni)一直处于稳定低态；芒果成熟时，淀粉分解、酸性转化酶活性的降低，蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶活性增加(武红霞，2011)。
4、以上芒果果实淀粉和糖(光合产物)含量及其变化规律研究，以及果实糖代谢相关酶研究为阐明芒果果实发育至完熟过程芒果糖代谢生理及分子机理提供了必要的数据和技术基础，但芒果的糖代谢是一个复杂的植物生理生化过程，具体的感应和响应机制还不很清楚，现有的研究基础仍缺乏很多相关酶及其关联网络、影响因子、影响程度，不同基因型差异等相关信息。
技术实现思路
1、针对以上现有技术存在的缺点和不足之处，本专利技术的目的在于提供一种芒果糖代谢分析方法。因此，本专利技术分析方法可研究芒果果实发育至完熟过程糖代谢的生理和分子机制，从而丰富自主选育品种的基础研究理论，为下一步提高低糖芒果品种糖分积累研究方案的制定和创新育种提供重要的遗传信息。
2、本专利技术目的通过以下技术方案实现：
3、一种芒果糖代谢分析方法，包括如下步骤：
4、(1)从芒果试验树花后至达到成熟期期间采样，采样样品为果实发育期样品；测试果实发育期样品可溶性固形物(tss)含量、淀粉(starch)含量、糖分含量和酶活性，得到各因素在果实发育期的变化曲线；
5、(2)在果实达到成熟期后，采样样品分为两类：一类是将成熟期的果实采摘后于常温下放至完熟期间采样，为采摘后熟样品；另一类是将大小、成熟度一致的果实挂牌留树后熟期间采样，为留树后熟样品；分别测试采摘后熟样品和留树后熟样品可溶性固形物含量、淀粉含量、糖分含量和酶活性，得到各因素在采摘后熟过程及留树后熟过程中的变化曲线；
6、(3)分别采用spss软件和r语言软件根据步骤(1)和(2)中的变化曲线分析得出可溶性固形物、淀粉含量、糖分含量、甜度值与糖代谢相关酶活性的相关性。
【技术保护点】
1.一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，步骤(1)中所述芒果试验树选择长势、花期基本一致、果实生长发育正常的9株树挂牌，3株为1小区，重复3次。
3.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，步骤(1)中所述采样是指从花后50天开始采样，之后每隔15天采一次，至花后130天，果实达到成熟期。
4.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，步骤(2)中所述采摘后熟样品的采样过程为每天采样一次；所述留树后熟样品为每2-3天采样一次。
5.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，步骤(1)和(2)中所述采样及测试样品可溶性固形物含量、淀粉含量、糖分含量和酶活性的方法为：从树冠东、南、西、北、中五个方位各摘取2个果形端正、无病虫害、大小均匀、成熟度一致的果实；将其中6个果实去皮，在每个果实中间部位取2～3cm宽区域的果肉混合为一样品，先检测果肉的可溶性固形物含量，剩下样品用液氮速冻、研磨成粉末后贮存于-80℃冰箱，用于淀粉
6.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，所述糖分含量包括蔗糖、葡萄糖和果糖含量；所述甜度值＝果糖含量×1.75+蔗糖含量×1.00+葡萄糖含量×0.75。
7.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，所述酶活性包括植物腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶、植物蔗糖合成酶、植物蛋白激酶、植物磷酸葡萄糖变位酶、植物α-淀粉酶、植物β-淀粉酶、植物淀粉分支酶、植物异淀粉酶、植物蔗糖转化酶、植物酸性转化酶和植物蔗糖磷酸合成酶活性。
...【技术特征摘要】
1.一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，步骤(1)中所述芒果试验树选择长势、花期基本一致、果实生长发育正常的9株树挂牌，3株为1小区，重复3次。
3.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，步骤(1)中所述采样是指从花后50天开始采样，之后每隔15天采一次，至花后130天，果实达到成熟期。
4.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，步骤(2)中所述采摘后熟样品的采样过程为每天采样一次；所述留树后熟样品为每2-3天采样一次。
5.根据权利要求1所述的一种芒果糖代谢分析方法，其特征在于，步骤(1)和(2)中所述采样及测试样品可溶性固形物含量、淀粉含量、糖分含量和酶活性的方法为：从树冠东、南...
【专利技术属性】
技术研发人员：李丽，吴延科，刘彩华，马小卫，王松标，黄国弟，梁清志，武红霞，郑斌，许文天，廖月梅，
申请(专利权)人：百色学院，
类型：发明
国别省市：
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