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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程领域,具体涉及一种深海真菌拟茎点霉fs508的新型lithocarol生物合成基因启动子。
技术介绍
1、拟茎点霉(phomopsis lithocarpus)fs508是从深海底泥中分离得到的丝状真菌,从中分离得到了具有较强抗肿瘤活性的多异戊烯基二苯酮类化合物lithocarols及tenellone杂合大环内酯二聚体lithocarpins,具有开发成为新型抗肿瘤药物先导化合物的潜力。真菌来源的多异戊烯基二苯酮是芳香聚酮中一个具有独特结构的亚类,它们是由二苯酮(或酮)与至少两个c5单元(异戊烯基)构成的杂萜化合物,特殊的化学结构使它们表现出多种生物活性。
2、前期从p.lithocarpus fs508中分离获得了具有一定抗肿瘤活性和抗菌活性的多异戊烯基二苯酮类化合物lithocarolsa-g(jianlin xu,zhaoming liu,yuchan chen,haibo tan,haohua li,saini li,heng guo,zilei huang,xiaoxia gao,hongxin liu,weimin zhang.lithocarols a-f,six tenellone derivatives from the deep-seaderived fungus phomopsis lithocarpus fs508.bioorganic chemistry 87(2019)728–735),但其产量较低,限制了其后期应用,因此对lithocarols生物合成关键基因启动
技术实现思路
1、本专利技术的第一个目的是提供一种启动子litip,其核苷酸序列如seq id no.2所示。
2、本专利技术的第二个目的是提供一种表达载体,其含有上述的启动子litip。
3、本专利技术的第三个目的是提供一种宿主细胞,其含有上述的表达载体。
4、优选地,所述的宿主细胞为大肠杆菌trans5α、大肠杆菌bl21(de3)或拟茎点霉(phomopsis lithocarpus)fs508。
5、本专利技术的第四个目的是提供上述的启动子litip在宿主细胞中启动下游基因表达的应用。
6、优选地,所述的下游基因为lithocarols生物合成基因liti、氨苄抗性基因ampr或荧光素酶报告基因。
7、优选地,所述的宿主细胞为大肠杆菌trans5α、大肠杆菌bl21(de3)或拟茎点霉(phomopsis lithocarpus)fs508。
8、本专利技术的第五个目的是提供一种表达盒,其含有上述的启动子litip。
9、本专利技术的第六个目的是提供上述的启动子litip,或上述的表达载体,或上述的宿主细胞,或上述的表达盒在多异戊烯基二苯酮类化合物lithocarols的生物合成中的应用。
10、本专利技术的第七个目的是提供一种调控目标基因转录的方法为将上述的启动子litip,或上述的表达载体,或上述的表达盒导入宿主细胞,增强宿主细胞中的目标基因的转录。
11、本专利所涉及的拟茎点霉(phomopsis lithocarpus)fs508从印度洋(111°53.335'e,16°50.508'n)3606m处的海底沉积物中分离得到。
12、本专利技术的优点:
13、lithocarols生物合成基因启动子litip具有较高的转录活性,在大肠杆菌中启动荧光素酶的活性接近强启动子pgpda,且能启动氨苄抗性基因的表达。该启动子litip的克隆及其功能验证,为后期通过生物合成策略及转录调控提高lithocarol的生物合成效率和产量,并获得新型衍生物奠定可靠的分子生物学基础。
14、本专利技术的深海真菌拟茎点霉(phomopsis lithocarpus)fs508保藏编号为:gdmccno:60433,公开于专利技术专利cn201810974840.6,专利技术名称为:化合物lithocarpinol b及其制备方法和在制备抗真菌药物中的应用。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种启动子litIP,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种表达载体,其特征在于,含有权利要求1所述的启动子litIP。
3.一种宿主细胞,其特征在于,含有权利要求2所述的表达载体。
4.根据权利要求3所述的宿主细胞,其特征在于,所述的宿主细胞为大肠杆菌Trans5α、大肠杆菌BL21(DE3)或拟茎点霉(Phomopsis lithocarpus)FS508。
5.权利要求1所述的启动子litIP在宿主细胞中启动下游基因表达的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的下游基因为lithocarols生物合成基因litI、氨苄抗性基因AmpR或荧光素酶报告基因。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的宿主细胞为大肠杆菌Trans5α、大肠杆菌BL21(DE3)或拟茎点霉(Phomopsis lithocarpus)FS508。
8.一种表达盒,其特征在于,含有权利要求1所述的启动子litIP。
9.权利要求1所述的启动子litIP,
10.一种调控目标基因转录的方法,其特征在于,将权利要求1所述的启动子litIP,或权利要求2所述的表达载体,或权利要求8所述的表达盒导入宿主细胞,增强宿主细胞中的目标基因的转录。
...【技术特征摘要】
1.一种启动子litip,其特征在于,其核苷酸序列如seq id no.2所示。
2.一种表达载体,其特征在于,含有权利要求1所述的启动子litip。
3.一种宿主细胞,其特征在于,含有权利要求2所述的表达载体。
4.根据权利要求3所述的宿主细胞,其特征在于,所述的宿主细胞为大肠杆菌trans5α、大肠杆菌bl21(de3)或拟茎点霉(phomopsis lithocarpus)fs508。
5.权利要求1所述的启动子litip在宿主细胞中启动下游基因表达的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的下游基因为lithocarols生物合成基因liti、氨苄抗性基因ampr或荧光素酶报告基...
【专利技术属性】
技术研发人员:叶伟,李梦然,章卫民,杨鑫娜,许丽琼,刘玉萍,冯小燕,李赛妮,王世新,刘洪新,陈玉婵,
申请(专利权)人:广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心,
类型:发明
国别省市:
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