【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种编码人iii型胶原蛋白α链的核酸及其应用，属于生物。
技术介绍
1、胶原蛋白是细胞外基质的主要成分，是在哺乳动物中含量最多、分布最广的功能性蛋白，主要由成纤维细胞合成和分泌，在皮肤中构成了一张细密的弹力网。成年人皮肤中的胶原蛋白主要以i型胶原蛋白(约85％)与iii型胶原蛋白(约15％)为主，其中，i型胶原主要增强皮肤的柔韧度让皮肤紧致，iii型胶原让皮肤细嫩。婴儿皮肤中iii型胶原占比最多，成年后皮肤几乎无法合成iii型。人体胶原蛋白含量在10岁左右达到顶峰(约90％)，25岁后下降到60％，之后逐年递减。真皮层胶原蛋白含量的减少是皮肤老化和黑色素出现的根源。胶原蛋白流失导致皮肤皱纹、干燥粗糙、松弛、暗沉等衰老表现。
2、向真皮层内补充胶原蛋白是改善皮肤皱纹等衰老现象的有效方法，皮内注射的方式是最直接有效的胶原蛋白补充方式。目前，胶原蛋白主要有三种来源，分别为动物来源(从牛、猪等动物的组织中提取)、胎盘来源(从人胎盘中提取)以及体外表达来源(大肠杆菌等原核细胞及酵母等真核细胞内合成并纯化)。其中，动物来源的胶原蛋白有病毒和抗原性，容易导致免疫排斥反应，因此，使用时容易引起过敏反应，使用前需要做试敏，试敏一至两次阴性的使用者也仍有再过敏的可能；并且，动物来源的胶原蛋白普遍存在提取方法复杂且污染严重，原材料获取困难且难以长时间储存，制造成本高且难以大规模量产的缺陷；另外，动物来源的胶原蛋白属于异源蛋白，降解较快，疗效维持时间短，一般在数月内降解。胎盘来源的胶原蛋白原料来源少且提取工艺复杂，存在成本高且
技术实现思路
1、为解决上述问题，本专利技术提供了一种编码人iii型胶原蛋白α链的核酸，所述核酸为：
2、(a)包含seq id no.2、seq id no.3、seq id no.4或seq id no.5所示的核苷酸序列的核酸；
3、(b)以(a)作为模板转录而来的核酸；
4、(c)在(a)或(b)限定的核苷酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个核苷酸且保留其源自序列的生物学功能的由(a)衍生的核酸；
5、(d)与(a)、(b)或(c)部分或全部互补的核酸。
6、在本专利技术的一种实施方式中，所述核酸为：
7、(a)由seq id no.2、seq id no.3、seq id no.4或seq id no.5所示的核苷酸序列组成的核酸；
8、(b)以(a)作为模板转录而来的核酸；
9、(c)在(a)或(b)限定的核苷酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个核苷酸，与(a)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的序列同一性，并且，保留其源自序列的生物学功能的由(a)衍生的核酸；
10、(d)与(a)、(b)或(c)部分或全部互补的核酸。
11、在本专利技术的一种实施方式中，所述核酸是指由多个核苷酸聚合成的生物大分子化合物。
12、在本专利技术的一种实施方式中，所述核酸包括dna分子、rna分子、pna分子或lna分子中的至少一种。
13、在本专利技术的一种实施方式中，所述核酸以单链或双链形式存在。
14、在本专利技术的一种实施方式中，所述核酸为线性或环状。
15、在本专利技术的一种实施方式中，所述核酸为编码链或非编码链。
16、在本专利技术的一种实施方式中，所述(b)为以(a)的一条链作为模板转录而来的编码链；所述(b)中，以(a)作为模板转录而来的核酸的核苷酸序列如seq id no.12或seq idno.14所示。
17、在本专利技术的一种实施方式中，所述互补为完全互补或部分互补。
18、在本专利技术的一种实施方式中，所述人iii型胶原蛋白α链(homo sapiens collagentype iii alpha 1chain，col3a1)的氨基酸序列如seq id no.1所示。
19、在本专利技术的一种实施方式中，所述核酸中的碱基为修饰碱基或非修饰碱基。
20、本专利技术还提供了一种重组质粒，所述重组质粒携带上述核酸。
21、在本专利技术的一种实施方式中，所述重组质粒携带的核酸连接有自复制元件、翻译调控元件、核酶或用于环化的互补序列中的至少一种；所述自复制元件包括来源于病毒的自复制组件；所述翻译调控元件包括启动子、增强子、内部核糖体进入位点(ires)、聚腺苷酸化信号、终止子、蛋白质降解信号、转座子、5’utr、3’utr、多腺苷酸序列(pas，polyadenylation[poly(a)]signals)或标记基因中的至少一种；所述核酶包括i型内含子核酶或ii型内含子核酶中的至少一种。
22、在本专利技术的一种实施方式中，所述来源于病毒的自复制组件包括病毒中与rna复制作用相关的非结构蛋白的基因序列、非结构蛋白基因的突变序列、病毒的部分结构蛋白的基因序列、病毒结构蛋白基因的突变序列或病毒结构蛋白基因的删减序列中的至少一种。
23、在本专利技术的一种实施方式中，所述来源于病毒的自复制组件取自黄病毒、甲病毒、逆转录病毒、慢病毒、腺病毒或腺相关病毒。
24、在本专利技术的一种实施方式中，所述黄病毒包括乙型脑炎病毒、登革热病毒森林脑炎病毒或昆津病毒中的至少一种。
25、在本专利技术的一种实施方式中，所述乙型脑炎病毒包括乙型脑炎病毒sa-14株、乙型脑炎病毒sa-14-14-2疫苗株(japanese encephalitis virus，jev)或乙型脑炎病毒sa-14-5-3株中的至少一种。
26、在本专利技术的一种实施方式中，所述来源于病毒的自复制组件为来源于乙型脑炎病毒的ns1～ns5基因、结构蛋白基因c的删减序列和结构蛋白基因e的删减序列。
27、在本专利技术的一种实施方式中，所述来源于病毒的自复制组件为乙型脑炎病毒sa-14-14-2疫苗株的ns1～ns5基因、结构蛋白基因c的删减序列和结构蛋白基因e的删减序列。
28、在本专利技术的一种实施方式中，所述启动子包括t7启动子、sp6启动子或亚基因组启动子(subgenomic promoter)中的至少一种；所述聚腺苷酸化信号包括a120或a30n(1-10)a70中的至少一种。
29、在本专利技术的一种实施方式中，所述核酸的上游依次连接有t7启动子和5’utr，下游依次连接有3’utr和聚腺苷酸化信号；
30、或者，所述核酸的上游依次连接有t7启动子、5’utr和亚基因组启本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种编码人III型胶原蛋白α链的核酸，其特征在于，所述核酸为：
2.如权利要求1所述的核酸，其特征在于，所述核酸为：
3.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒携带权利要求1或2所述的核酸。
4.如权利要求3所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒携带的核酸连接有自复制元件、翻译调控元件、核酶或用于环化的互补序列中的至少一种；所述自复制元件包括来源于病毒的自复制组件；所述翻译调控元件包括启动子、增强子、内部核糖体进入位点、聚腺苷酸化信号、终止子、蛋白质降解信号、转座子、5’UTR、3’UTR、多腺苷酸序列或标记基因中的至少一种；所述核酶包括I型内含子核酶或II型内含子核酶中的至少一种。
5.一种mRNA，其特征在于，所述mRNA携带权利要求1或2所述的核酸。
6.如权利要求5所述的mRNA，其特征在于，所述mRNA包括非复制线性mRNA、自复制线性mRNA或环状mRNA中的至少一种；
7.一种宿主细胞或细胞外泌体，其特征在于，所述宿主细胞或细胞外泌体的基因组整合有权利要求1或2所述的基因；或者，所述宿主细
8.一种病毒样颗粒，其特征在于，所述病毒样颗粒的基因组整合有权利要求1或2所述的基因；或者，所述病毒样颗粒携带权利要求3或4所述的重组质粒；或者，所述病毒样颗粒携带权利要求5或6所述的mRNA。
9.权利要求1或2所述的基因或权利要求3或4所述的重组质粒或权利要求5或6所述的mRNA或权利要求7所述的宿主细胞或细胞外泌体或权利要求8所述的病毒样颗粒在制备用于抗皮肤衰老、修复妊娠纹、注射填充美容或治疗因III型胶原蛋白缺失引起的疾病的产品中的应用。
10.一种用于抗皮肤衰老、修复妊娠纹、注射填充美容或治疗因III型胶原蛋白缺失引起的疾病的产品，其特征在于，所述产品的成分包含权利要求1或2所述的基因或权利要求5或6所述的mRNA中的至少一种。
...【技术特征摘要】
1.一种编码人iii型胶原蛋白α链的核酸，其特征在于，所述核酸为：
2.如权利要求1所述的核酸，其特征在于，所述核酸为：
3.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒携带权利要求1或2所述的核酸。
4.如权利要求3所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒携带的核酸连接有自复制元件、翻译调控元件、核酶或用于环化的互补序列中的至少一种；所述自复制元件包括来源于病毒的自复制组件；所述翻译调控元件包括启动子、增强子、内部核糖体进入位点、聚腺苷酸化信号、终止子、蛋白质降解信号、转座子、5’utr、3’utr、多腺苷酸序列或标记基因中的至少一种；所述核酶包括i型内含子核酶或ii型内含子核酶中的至少一种。
5.一种mrna，其特征在于，所述mrna携带权利要求1或2所述的核酸。
6.如权利要求5所述的mrna，其特征在于，所述mrna包括非复制线性mrna、自复制线性mrna或环状mrna中的至少一种；
7.一种宿主细胞或细胞外...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。