【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程，具体涉及一种非编码rna csrb突变体、基因工程菌及应用。
技术介绍
1、岩藻糖基乳糖（2'-岩藻糖基乳糖(2'-fucosyllactose，2'-fl)、3-岩藻糖基乳糖（3-fucosyllactose，3-fl））和唾液酸基乳糖（3'-唾液酸基乳糖(3'-sialyllactose，3'-sl)、6'-唾液酸基乳糖（6'-sialyllactose，6'-sl））是母乳低聚糖（human milkoligosaccharides，hmos）的重要成分，在调节肠道菌群、免疫力等方面发挥重要作用，具有广阔的市场前景。目前岩藻糖基乳糖和唾液酸基乳糖的生产方法包括化学合成法、酶合成法、微生物发酵法等。微生物发酵法具有环境友好、成本低等优势。大肠杆菌遗传背景清晰、代谢旺盛且增殖迅速，是微生物发酵法中常用的工程菌株。
2、本领域对岩藻糖基乳糖的从头合成途径和补救途径的关键酶、糖外排转运体等已有深入了解（zhu yy, et al. recent advances on 2'-fucosyllactose: physiologicalproperties, applications, and production approaches[j]. critical reviews infood science and nutrition, 2022, 62(8):2083-2092.），并通过对相关酶或转运体编码基因的基因编辑，考察了其对岩藻糖基乳糖发酵产率的影响。根据报道，敲除以下基因中的一种或多种
3、csrb是大肠杆菌碳储存调控系统的一种新的非编码rna，是包含369个碱基的rna分子，在大肠杆菌中csrb结合18个csra蛋白（ashok k dubey, et al. rna sequence andsecondary structure participate in high-affinity csra-rna interaction[j]．rna,2005 11(10):1579-1587.）。csra是一种转录后调节大肠杆菌中心碳通量、生物膜形成和运动的调控蛋白，激活菌体指数期的代谢途径，减缓菌体进入稳定期（suzuki k, et al.identification of a novel regulatory protein (csrd) that targets the globalregulatory rnas csrb and csrb for degradation by rnase e[j]．genes&devel本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种非编码RNA CsrB突变体，其特征在于，所述非编码RNA CsrB突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；或所述非编码RNA CsrB突变体的核苷酸序列对应于SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列至少第178位碱基为a，且与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列具有至少90%之同源性。
2.一种产岩藻糖基乳糖和/或唾液酸基乳糖的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为大肠杆菌基因工程菌，所述大肠杆菌基因工程菌的基因组携带权利要求1所述的非编码RNA CsrB突变体核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌基因工程菌的基因组携带SEQ ID NO.1所示的非编码RNA CsrB突变体核苷酸序列。
4.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌基因工程菌为产岩藻糖基乳糖的大肠杆菌基因工程菌。
5.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述岩藻糖基乳糖为2'-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖中的任一种。
6.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述大肠
7.根据权利要求6所述的基因工程菌，其特征在于，所述唾液酸基乳糖为3'-唾液酸基乳糖、6'-唾液酸基乳糖中的任一种。
8.权利要求1所述非编码RNA CsrB突变体的应用，其特征在于，所述非编码RNA CsrB突变体用于提高大肠杆菌发酵制备岩藻糖基乳糖和/或唾液酸基乳糖的产量。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述岩藻糖基乳糖为2'-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖中的任一种。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述唾液酸基乳糖为3'-唾液酸基乳糖、6'-唾液酸基乳糖中的任一种。
...【技术特征摘要】
1.一种非编码rna csrb突变体，其特征在于，所述非编码rna csrb突变体的核苷酸序列如seq id no.1所示；或所述非编码rna csrb突变体的核苷酸序列对应于seq id no.1所示的核苷酸序列至少第178位碱基为a，且与seq id no.1所示的核苷酸序列具有至少90%之同源性。
2.一种产岩藻糖基乳糖和/或唾液酸基乳糖的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为大肠杆菌基因工程菌，所述大肠杆菌基因工程菌的基因组携带权利要求1所述的非编码rna csrb突变体核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌基因工程菌的基因组携带seq id no.1所示的非编码rna csrb突变体核苷酸序列。
4.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌基因工程菌为产岩藻糖基乳糖的大肠杆菌基因工程菌。
【专利技术属性】
技术研发人员：宗剑飞，李庆刚，李玉，肖卫华，路福平，
申请(专利权)人：山东合成远景生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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