【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及干细胞，具体为转基因干细胞及其用于治疗失眠症治疗方法。
技术介绍
1、失眠是最常见的睡眠障碍性疾病，失眠症的特点是难以开始和/或维持与日间损伤相关的睡眠，而不是由于环境阻碍睡眠，例如睡眠机会不足、精神紧张而无睡意等。慢性失眠症是指每周至少出现3次症状，持续至少3个月，主要表现是睡眠质量下降或睡眠时间紊乱，全世界估计有30％的人有一种或多种失眠症状。失眠会严重影响患者身心健康，慢性失眠症可导致睡眠时间减少，进而增加冠状动脉疾病、心肌梗死、ii型糖尿病、肥胖、全身性高血压等疾病风险增加。此外，失眠也可能诱发多种精神疾病，例如持续的睡眠障碍会增加抑郁症复发的风险，失眠同时是自杀的重要危险因素。
2、为有效治疗和缓解失眠症，研究人员开发出了很多疗法或药物，其中失眠认知行为疗法被认为是失眠的一线治疗方法，其疗效已得到公认。cbt-i是放松训练、认知重构、刺激控制、睡眠限制和睡眠卫生教育干预的多模式组合，通常持续5周，它已被证明可以至少与药物一样有效地改善失眠症，而且相关的副作用也更少。尽管cbt-i具有优势，但许多医疗人员倾向于处方催眠药来对出现失眠症的患者进行初始治疗，之所以这样做，是因为cbt-i疗法收到多重因素的限制，包括受过培训患者的有限可用性、时间和成本因素，例如cbt-i可能难以进行，尤其是对于农村地区的患者而言，这可能是一项耗时且昂贵的干预措施，限制了失眠患者充分参与治疗的有效性。此外，近年来的一些研究表明，尽管cbt-i可以改善睡眠，这可以通过主观睡眠评级的改善来证明，但关于cbt-i对睡眠的积极
3、近年来，干细胞治疗已成为用于疾病基础研究及临床治疗的一种新型工具。间质干细胞是一类多能干细胞，具有较强的自我复制、更新能力和多向分化潜能，在免疫调节方面也展现出优势。其可在体外培养扩增，在特定条件下分化为神经细胞。据clinicaltrials.gov统计，2019年全球有210多项mscs处于临床研究阶段，主要集中于伤口愈合、骨骼肌再生、心血管、肝肾疾病、肿瘤、神经退行性疾病和自身免疫性疾病以及器官移植等方面。当前，干细胞相关临床试验已被应用于大部分神经系统疾病，包括遗传、损伤和退行性疾病等。本文综述cid的流行病学、病理机制，浅析干细胞治疗慢性失眠障碍的现状及研究进展，并对干细胞治疗cid的可能作用机制进行探讨。
4、为改善对失眠症的治疗效果，本专利技术中提供了转基因干细胞治疗失眠症治疗，有效延长睡眠时间，改善睡眠质量，调节细胞因子分泌，全面抑制失眠不良影响，同时该方法不具有明显成瘾性和戒断反应，毒副作用较低，为失眠症的治疗提供了新的方向。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于提供转基因干细胞。
2、本专利技术的目的之一采用如下技术方案实现：
3、转基因干细胞，包括a组分和b组分，所述a组分为培养基液，所述b组分为原液，所述a组分为5～15％fbs的l-dmem的培养基液，所述原液为脐带培养的细胞液。
4、优选的，所述b组分原液，需a组分的培养基液为2～4ml，混匀。
5、优选的，所述饱和湿度培养箱内培养的温度为37℃，饱和湿度培养箱的二氧化碳为5％。
6、优选的，所述原液中的脐带的长度为1～1.5cm。
7、转基因干细胞用于治疗失眠症的治疗方法，包括以下步骤：
8、步骤一：将2～4ml的a组分和b组分，混匀，后置于饱和湿度培养箱内培养，过夜后添加1ml培养基，48小时后半量换液，3～4天后全量换液，以后每3～4天换液15～20天后去除组织块，待原代细胞达到覆盖培养皿的60～80％，给予传代，采用第3～10代细胞；
9、步骤二：用pbs冲洗2次后，滴加0.05％的ttypsin-edta液消化，后加培养基终止消化，制成1～3x106的细胞悬液，用流式细胞仪进行检测显示cd34阴性，cd109阴性，cd29和cd44阳性率均>95％；
10、步骤三：移植治疗之前对细胞培养上清液进行eb病毒、巨细胞病毒、hiv病毒、乙肝病毒、支原体、细菌培养、真菌培养均阴性；
11、步骤四：将经过检验及检测合格的细胞收集成间充质干细胞悬液30ml(内含间充质干细胞数3～4x107)，给患者外周静脉输注，采用微泵80ml/小时的速度均匀泵入，选择较粗静脉血管穿刺，保持静脉通畅，防止细胞聚团阻塞小血管。
12、与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
13、本专利技术中提供了转基因干细胞治疗失眠症治疗，有效延长睡眠时间，改善睡眠质量，调节细胞因子分泌，全面抑制失眠不良影响，同时该方法不具有明显成瘾性和戒断反应，毒副作用较低，为失眠症的治疗提供了新的方向。
14、上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技术手段，而可依照说明书的内容予以实施，并且为了让本专利技术的上述和其他目的、特征和优点能够更明显易懂，以下特举较佳实施例，并配合附图，详细说明如下。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.转基因干细胞，包括A组分和B组分，其特征在于：所述A组分为培养基液，所述B组分为原液，所述A组分为5～15％FBS的L-DMEM的培养基液，所述原液为脐带培养的细胞液。
2.根据权利要求1所述的转基因干细胞，其特征在于：所述B组分原液，需A组分的培养基液为2～4ML，混匀。
3.根据权利要求2所述的转基因干细胞，其特征在于：所述饱和湿度培养箱内培养的温度为37℃，饱和湿度培养箱的二氧化碳为5％。
4.根据权利要求1所述的转基因干细胞，其特征在于：所述原液中的脐带的长度为1～1.5CM。
5.根据权利要求1-4任一项所述的转基因干细胞用于治疗失眠症的治疗方法，其特征在于，包括以下步骤：
【技术特征摘要】
1.转基因干细胞，包括a组分和b组分，其特征在于：所述a组分为培养基液，所述b组分为原液，所述a组分为5～15％fbs的l-dmem的培养基液，所述原液为脐带培养的细胞液。
2.根据权利要求1所述的转基因干细胞，其特征在于：所述b组分原液，需a组分的培养基液为2～4ml，混匀。
3.根据权利要求2...
【专利技术属性】
技术研发人员：李鹏，陈巧林，
申请(专利权)人：台州市耶大基因与细胞治疗研究院，
类型：发明
国别省市：
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