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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于抑菌活性筛选,尤其涉及一种抑菌活性的高通量筛选方法。
技术介绍
1、抑菌活性可以评估化合物或者药物对微生物的抑制效果,进而为新药物开发和抗菌剂筛选提供重要参考。抑菌活性筛选则是针对某种新型化合物、药物或材料进行的抑菌活性评估过程。在抑菌活性筛选中,通常会通过一系列实验或测试,评估目标物质对特定细菌或真菌的抑制效果,以确定其是否具有潜在的抗菌或抑菌应用的可能性。目前,抑菌活性筛选方法大多耗时长,筛选成本较高,因此,迫切需要一种抑菌活性检测的高通量筛选方法。
2、目前,抑菌活性的筛选方法可以涉及多种方法,主要有牛津杯法、纸片扩散法、锥形瓶法和微流控芯片辅助法,这些筛选方法有助于发现新的抗菌剂或抑菌材料,并为药物研发、医疗器械表面处理、食品防腐等领域提供重要的参考信息。但是,上述方法仍具有一定的局限性。
3、牛津杯法是一种常见的抑菌活性筛选方法,但不同牛津杯之间的抑菌效果存在较大的差异,从而影响结果的准确性;且牛津杯法需要人工操作,耗时耗力,不适用于高通量筛选,限制了其应用。
4、纸片扩散法用来评估化合物在固体培养基表面的抑菌活性,无法评估其在液体培养基中的抑菌活性;通过抑菌圈的大小来评估抑菌活性的大小,灵敏度相对较低,且此方法只能评估抑菌物质短时间内的抑菌活性;该法同样需人工操作,耗时耗力,不适用于高通量筛选。
5、微流控芯片辅助抑菌活性筛选是新兴起的一种筛选方法,需要专门的微流控芯片和设备,芯片尺寸较小,限制了样本的数量和体积,无法满足大规模样本测试的需求;对特定微生物
6、总之,目前的抑菌活性筛选方法大多存在耗时长、不适用于高通量筛选、人工操作耗时耗力、灵敏度差、成本较高等问题,因此,迫切需要一种抑菌活性检测的高通量筛选方法。
技术实现思路
1、为解决上述问题,本专利技术提供一种抑菌活性的高通量筛选方法,包括:
2、取培养板,并在所述培养板中设置针对于目标菌株的阴性对照组、阳性对照组和药物实验组,得到载样板;
3、对所述载样板进行菌株培养,使所述目标菌株达到预设浓度;
4、对培养后的所述载样板进行抑菌活性检测。
5、优选地,所述培养板选自96孔板、48孔板、24孔板、12孔板和6孔板中的任意一种。
6、优选地,每个所述载样板中,包括针对于所述目标菌株的一组阴性对照组和一组阳性对照组,以及至少一个药物实验组。
7、优选地,在所述载样板中设有针对于至少一种目标菌株的如下区域:
8、第一区域,为第一待测药物对第一种目标菌株的药物实验组;其中,每一行代表一个浓度,共设置3个浓度,且每个所述浓度设置1-6个平行孔;
9、第二区域,为所述第一种目标菌株的阳性对照组,由所述第一种目标菌株和阳性药物组成,共一行,设置1-6个孔位;
10、第三区域,为所述第一种目标菌株的阴性对照组,由所述第一种目标菌株和阴性药物组成,共一行,设置1-6个平行孔;
11、优选地,还包括第四区域,为第二待测药物对所述第一种目标菌株的药物实验组;其中,每一行代表一个浓度,共设置3个浓度,且每个所述浓度设置1-6个平行孔;
12、优选地,以所述第一区域、所述第二区域、所述第三区域和所述第四区域为一个测试组合区;
13、在所述培养板为96孔板时,所述培养板中包括两个所述测试组合区:其一为针对于所述第一种目标菌株的测试组合区,其二为针对于第二种目标菌株的测试组合区。
14、优选地,在所述载样板中设有针对于至少一种目标菌株的如下区域:
15、第一区域,为第一待测药物对第一种目标菌株的药物实验组;其中,设置3个浓度,每个所述浓度设置4个平行孔;
16、第二区域,为所述第一种目标菌株的阳性对照组,由所述第一种目标菌株和阳性药物组成,设置4个孔位;
17、第三区域,为所述第一种目标菌株的阴性对照组,由所述第一种目标菌株和阴性药物组成,设置4个平行孔;
18、优选地,还包括第四区域,为第二待测药物对所述第一种目标菌株的药物实验组;其中,设置3个浓度,每个所述浓度设置4个平行孔;
19、优选地,以所述第一区域、所述第二区域、所述第三区域和所述第四区域为一个测试组合区;
20、在所述培养板为96孔板时,所述培养板中包括3个所述测试组合区:其一为针对于所述第一种目标菌株的测试组合区,其二为针对于第二种目标菌株的测试组合区,其三为针对于第三种目标菌株的测试组合区。
21、优选地,在所述载样板中设有针对于至少一种目标菌株的如下区域:
22、第一区域,为第一待测药物对第一种目标菌株的药物实验组;其中,每个孔位代表一个浓度,共设置4个浓度;
23、第二区域,为所述第一种目标菌株的阳性对照组,由所述第一种目标菌株和阳性药物组成,设置4个;每个孔位代表一个浓度;
24、第三区域,为所述第一种目标菌株的阴性对照组,由所述第一种目标菌株和阴性药物组成,设置4个平行孔;
25、优选地,还包括:
26、第四区域,为第二待测药物对所述第一种目标菌株的药物实验组;其中,每个孔位代表一个浓度,共设置4个浓度;
27、第五区域,为第三待测药物对所述第一种目标菌株的药物实验组;其中,每个孔位代表一个浓度,共设置4个浓度;
28、第六区域,为第四待测药物对所述第一种目标菌株的药物实验组;其中,每个孔位代表一个浓度,共设置4个浓度;
29、第七区域,为第五待测药物对所述第一种目标菌株的药物实验组;其中,每个孔位代表一个浓度,共设置4个浓度;
30、第八区域,为第六待测药物对所述第一种目标菌株的药物实验组;其中,每个孔位代表一个浓度,共设置4个浓度;
31、优选地,以所述第一区域、所述第二区域、所述第三区域、所述第四区域、所述第五区域、所述第六区域、所述第七区域和所述第八区域为一个测试组合区;
32、在所述培养板为96孔板时,所述培养板中包括3个所述测试组合区:其一为针对于所述第一种目标菌株的测试组合区,其二为针对于第二种目标菌株的测试组合区,其三为针对于第三种目标菌株的测试组合区。
33、优选地,所述阴性对照组、所述阳性对照组和所述药物实验组中每孔内加入的总体积相同。
34、优选地,所述阴性对照组、所述阳性对照组和所述药物实验组中每孔均至少含有50μl的所述目标菌株。
35、优选地,所述预设浓度为0.001×105cfu/ml-10×105cfu/ml。
36、优选地,所述对培养后的所述载样板进行抑菌活性检测步骤中,抑菌活性检测包括所述载样板中每孔对应的od值获取和/或进行微生物状况观察。
37、本专利技术提供一种抑菌活性的高通量筛选方法。其中,所述方法包括:取培养板,并在所述培养板中设置本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,包括:
2.如权利要求1所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,所述培养板选自96孔板、48孔板、24孔板、12孔板和6孔板中的任意一种。
3.如权利要求1所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,每个所述载样板中,包括针对于所述目标菌株的一组阴性对照组和一组阳性对照组,以及至少一个药物实验组。
4.如权利要求3所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,在所述载样板中设有针对于至少一种目标菌株的如下区域:
5.如权利要求4所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,在所述载样板中设有针对于至少一种目标菌株的如下区域:
6.如权利要求4所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,在所述载样板中设有针对于至少一种目标菌株的如下区域:
7.如权利要求1所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,所述阴性对照组、所述阳性对照组和所述药物实验组中每孔内加入的总体积相同。
8.如权利要求1所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,所述阴性对照组、所述阳性对照组和所述药
9.如权利要求1所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,所述预设浓度为0.001×105CFU/mL-10×105CFU/mL。
10.如权利要求1所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,所述对培养后的所述载样板进行抑菌活性检测步骤中,抑菌活性检测包括所述载样板中每孔对应的OD值获取和/或进行微生物状况观察。
...【技术特征摘要】
1.一种抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,包括:
2.如权利要求1所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,所述培养板选自96孔板、48孔板、24孔板、12孔板和6孔板中的任意一种。
3.如权利要求1所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,每个所述载样板中,包括针对于所述目标菌株的一组阴性对照组和一组阳性对照组,以及至少一个药物实验组。
4.如权利要求3所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,在所述载样板中设有针对于至少一种目标菌株的如下区域:
5.如权利要求4所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,在所述载样板中设有针对于至少一种目标菌株的如下区域:
6.如权利要求4所述抑菌活性的高通量筛选方法,其特征在于,在所...
【专利技术属性】
技术研发人员:邓玉林,徐敏,王丽卫,刘凤,辛念,
申请(专利权)人:北京理工亘舒科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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