【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及脐带干细胞冻干粉，尤其涉及脐带干细胞冻干粉在制备药物及化妆品中的使用方法。
技术介绍
1、皮肤是衰老过程中最易显露的器官，皮肤衰老主要表现为自然衰老和光老化两种形式。近来随着各种边缘学科的飞速发展，人类对于衰老的认识已从整体水平推进到细胞分子水平，关于衰老机制的研究已取得了很大进展，机体在正常代谢中会产生自由基，它参与机体的正常生理运行，体内的抗氧化防御系统维持着体内自由基的动态平衡。随着增龄，体内抗氧化系统功能衰退，抗氧化酶的活性不断降低，自由基过量积聚，发生清除障碍，引发体内氧化性不可逆损伤的积累，最终导致一系列衰老损伤，维持体内一定水平的抗氧化系统功能可延缓机体衰老，由上所述本专利技术提供脐带干细胞冻干粉在制备药物及化妆品中的使用方法利用冷冻干燥法制备人脐带间质干细胞与其外泌体冻干粉，探究humscs冻干粉、humscs-exo冻干粉对创面愈合的影响，以期为后期临床和化妆品中应用提供理论依据。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于提供脐带干细胞冻干粉在制备药物及化妆品中的使用方法。
2、本专利技术的目的之一采用如下技术方案实现：脐带干细胞冻干粉在制备药物及化妆品中的使用方法，所述脐带干细胞冻干粉在制备药物及化妆品中的使用方法包括以下步骤：
3、步骤一：首先在体外培养humscs，提取humscs-exo，两者进行鉴定；
4、步骤二：然后分别向humscs悬浮液和humscs-exo保存液中加入冻干
5、步骤三：随之观察冻干粉外观，水化后检测humscs的复苏率。体外细胞实验验证humscs-exo冻干粉对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts，hsfs)增殖、迁移和侵袭的影响；
6、步骤四：接着观察冻干后的humscs-exo被hsfs的摄取情况。建立balb/c小鼠深ⅱ°烫伤复合1cm2的开放性创面的难愈合创面模型，分别注射1ml的1×pbs溶液、含有1×106个humscs的humscs冻干粉水化液、含有200μg humscs-exo的humscs-exo冻干粉水化液；
7、步骤五：最后术后第0、6、11、21天拍摄创面愈合图像，计算创面愈合率，取第21天的balb/c小鼠全层皮肤组织包埋后进行组织学染色，he染色观察创面愈合情况，masson染色观察胶原生长和排列情况，免疫荧光染色观察创面新生血管情况。
8、进一步的，所述在上述步骤中humscs冻干粉外观呈饼状，表面无塌陷，流式细胞仪检测humscs冻干粉水化液中有活性有核细胞比例占48.5％，细胞计数法计算活细胞个数约为3.19×108。
9、进一步的，所述上述步骤二中humscs-exo冻干粉外观呈海绵状，疏松多孔。
10、进一步的，所述上述步骤三中pkh26标记水化后的humscs-exo，可以被hsfs摄取。
11、进一步的，所述的脐带干细胞冻干粉在化妆品中的使用方法，所述脐带干细胞冻干粉在化妆品中的使用方法包括以下步骤：
12、步骤一：首先加入原料及权利要求1中所述的脐带干细胞冻干粉，其中原料有水相原料、油相原料、蜡油脂等；
13、步骤二：接着将步骤二中的水相原料、油相原料分别置于水相缸及油相缸中进行乳化并进行均质搅拌及冷却；
14、步骤三：随之将步骤一种的蜡、油脂等进行搅拌调色、保温灌装、冷却成型机文火处理；
15、步骤四：然后将步骤一、步骤二及步骤三中处理好的原料进行均质搅拌、密封陈化及冷冻过滤；
16、步骤五：最后将步骤四中的物料进行冷却定型，并对其进行出料送检处理。
17、与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术脐带干细胞冻干粉在制备药物及化妆品中的使用方法其为实现间充质干细胞及间充质干细胞源性外泌体的方便保存提供了一种较可行的参考依据，且其制备出的humscs冻干粉，水化后细胞复苏率较好，humscs-exo冻干粉水化后可以促进hsfs在体外的增殖、迁移和侵袭，可以被hsfs摄取进入细胞发挥作用，humscs冻干粉和humscs-exo冻干粉均能促进伤口愈合，humscs-exo冻干粉愈合效果更好，可应运于化妆品中。
18、上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技术手段，而可依照说明书的内容予以实施，并且为了让本专利技术的上述和其他目的、特征和优点能够更明显易懂，以下特举较佳实施例，并配合附图，详细说明如下。
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1.脐带干细胞冻干粉在制备药物中的使用方法，其特征在于：所述脐带干细胞冻干粉在制备药物及化妆品中的使用方法包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的脐带干细胞冻干粉在制备药物中的使用方法，其特征在于：所述在上述步骤中hUMSCs冻干粉外观呈饼状，表面无塌陷，流式细胞仪检测hUMSCs冻干粉水化液中有活性有核细胞比例占48.5％，细胞计数法计算活细胞个数约为3.19×108。
3.如权利要求1所述的脐带干细胞冻干粉在制备药物中的使用方法，其特征在于：所述上述步骤二中hUMSCs-Exo冻干粉外观呈海绵状，疏松多孔。
4.如权利要求1所述的脐带干细胞冻干粉在制备药物中的使用方法，其特征在于：所述上述步骤三中PKH26标记水化后hUMSCs-Exo，可以被HSFs摄取。
5.如权利要求1所述的脐带干细胞冻干粉在化妆品中的使用方法，其特征在于：所述脐带干细胞冻干粉在化妆品中的使用方法包括以下步骤：
【技术特征摘要】
1.脐带干细胞冻干粉在制备药物中的使用方法，其特征在于：所述脐带干细胞冻干粉在制备药物及化妆品中的使用方法包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的脐带干细胞冻干粉在制备药物中的使用方法，其特征在于：所述在上述步骤中humscs冻干粉外观呈饼状，表面无塌陷，流式细胞仪检测humscs冻干粉水化液中有活性有核细胞比例占48.5％，细胞计数法计算活细胞个数约为3.19×108。
3.如权利要求1所述的脐...
【专利技术属性】
技术研发人员：李鹏，曹能，
申请(专利权)人：台州市耶大基因与细胞治疗研究院，
类型：发明
国别省市：
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