【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物检测，具体涉及一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法。
技术介绍
1、坎地沙坦酯(candesartan cilexetil)，化学名为2-乙氧基-1-[[2＇-(1h-四氮唑-5-基)[1，1＇-联苯基]-4-基]甲基]-1h-苯并咪唑-7-甲酸-1-[[(环已氧基)羰基]氧基]乙酯)；是一种结构独特、口服有效的高选择性血管紧张素ii受体拮抗剂类抗高血压药物，能够与血管平滑肌上的受体结合，拮抗血管紧张素的作用，所以能够抑制血管的收缩，起到扩张血管的作用，能够降低血压。一般情况下可以使收缩压、舒张压下降，能够使左室心肌重量、末梢血管阻力减少，对心排出量、射血分数、肾血管阻力、肾血流量没有影响，对于脑血管障碍的原发性高血压患者，对脑血流量也没有影响。在临床上主要用于治疗原发性高血压，可以单独使用，也可以跟其他治疗高血压的药物联合应用。
2、作为一种广泛应用于临床治疗的药物，坎地沙坦酯在合成时，主要以3-硝基邻苯二甲酸为起始原料，经酯化、重排、取代、水解、成酯、脱保护、精制合成高纯度的坎地沙坦酯。但在这个过程中会产生中间体2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯(简称杂质i)(杂质结构式见图2)，简称地沙坦酯中间体c3。杂质i含有芳香硝基化合物类警示结构，属于遗传毒性杂质中的第三类，即具有警示结构的杂质，应当对其含量进行控制；而目前国内外尚无对坎地沙坦酯基因毒性杂质进行检测的文献。
3、因此，亟需设计一种测定坎地沙坦酯片剂中2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯
技术实现思路
1、(一)解决的技术问题
2、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，本方法通过采用uplc-ms/ms法，能够检测时间短至8min，且能快速检测该产品中基因毒性杂质的含量，为坎地沙坦酯的风险监控提供便捷有力的技术支撑，解决了现有技术中无法有效测定坎地沙坦酯片剂中的2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯含量的问题。
3、(二)技术方案
4、为实现上述测定坎地沙坦酯片剂中的2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯含量的目的，本专利技术提供如下技术方案：
5、一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，本方法基于超高效液相色谱串联质谱法进行坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的限度检查和定量测定，所述坎地沙坦酯中间体c3的分子式为c14h18n2o6，分子结构为
6、
7、优选的，利用超高效液相色谱串联质谱法进行坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的限度检查和定量测定的过程包括步骤
8、(1)取2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯，以乙腈溶为溶剂，制备2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯对照样品溶液；
9、(2)取坎地沙坦酯，以空白溶液为溶剂制备片剂供试品溶液；
10、(3)分别取2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯对照样品溶液和片剂供试品溶液，利用超高效液相色谱串联质谱法进行测定，记录mrm质谱图，并计算2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯的含量。
11、优选的，所述的对照品溶液的制备过程包括
12、(1)取2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯10mg，称定，置100ml量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀；
13、(2)取10ml，置50ml量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀，作为2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯对照品贮备液；
14、(3)取1ml，置20ml量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀，制成每1ml中约1μg的对照品溶液，过滤，取续滤液，得对照品溶液。
15、优选的，所述的片剂供试品溶液的制备过程包括
16、取坎地沙坦酯100mg，置20ml量瓶中，加空白溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含坎地沙坦酯5mg的片剂供试品溶液。
17、优选的，所述的空白溶液为体积比为55:45的乙腈-水溶液。
18、优选的，在计算坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量时，以色谱图中对应的定量离子对峰面积a为纵坐标，各杂质的质量浓度c为横坐标，利用线性方程计算确定2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯的含量；且所述线性方程为a＝148815711.10935c-6329.56122，且线性方程的相关系数r＝0.99912，线性范围在0.1-2μg·ml-1之间。
19、优选的，本方法测定坎地沙坦酯片剂中2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯含量时，测定2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯的检测限下限为0.02ng·ml-1；定量限下限为0.06ng·ml-1。
20、优选的，所述的利用超高效液相色谱串联质谱法测定坎地沙坦酯片剂中沙坦溴联苯含量的测定条件包括色谱条件和质谱条件。
21、优选的，所述的色谱条件为
22、色谱柱：waters cortecs@t3，柱规格，2.1mm×100mm，2.7μm；
23、流动相a：乙腈；流动相b：0.1％甲酸水溶液；
24、流速：0.5ml·min-1；
25、柱温：30℃；
26、进样体积：5μl，通过六通切换阀，0min进质谱，将4.5min之后的液相流出液切换至旁路，不进入质谱分析，在5.5min时候的液相流出液再切换至主路；
27、梯度洗脱程序：等度洗脱。
28、优选的，所述的质谱条件为
29、采用esi+源多反应监测采集模式，参数如下表
30、2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯测定的esi离子源参数为
31、
32、2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯测定的母离子、子离子、离子模式、去簇电压、碰撞能和保留时间
33、
34、其中：“*”表示mrm定量离子。
35、(三)有益效果
36、与现有技术相比，本专利技术提供了一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，具备以下有益效果：
37、1.本专利技术设计了一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，本方法通过采用uplc-ms/ms法，检测时间短至8min，能快速检测该产品中基因毒性杂质的含量，为坎地沙坦酯的风险监控提供便捷有力的技术支撑，解决了现有技术中无法有效测定坎地沙坦酯片剂中的2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯含量的问题；
38、2.本方法基于超高效液相色谱串联质谱法考察坎地沙坦酯本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：本方法基于超高效液相色谱串联质谱法进行坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的限度检查和定量测定，所述坎地沙坦酯中间体C3的分子式为C14H18N2O6，分子结构为
2.如权利要求1所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：利用超高效液相色谱串联质谱法进行坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的限度检查和定量测定的过程包括步骤
3.如权利要求2所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：所述的对照品溶液的制备过程包括
4.如权利要求2所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：所述的片剂供试品溶液的制备过程包括
5.如权利要求2-4任一项所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：所述的空白溶液为体积比为55:45的乙腈-水溶液。
6.如权利要求2所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：在计算坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3
7.如权利要求2所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：本方法测定坎地沙坦酯片剂中2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯含量时，测定2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-硝基苯甲酸乙酯的检测限下限为0.02ng·mL-1；定量限下限为0.06ng·mL-1。
8.如权利要求2所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：所述的利用超高效液相色谱串联质谱法测定坎地沙坦酯片剂中沙坦溴联苯含量的测定条件包括色谱条件和质谱条件。
9.如权利要求8所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：所述的色谱条件为
10.如权利要求8所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体C3含量的方法，其特征在于：所述的质谱条件为
...【技术特征摘要】
1.一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，其特征在于：本方法基于超高效液相色谱串联质谱法进行坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的限度检查和定量测定，所述坎地沙坦酯中间体c3的分子式为c14h18n2o6，分子结构为
2.如权利要求1所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，其特征在于：利用超高效液相色谱串联质谱法进行坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的限度检查和定量测定的过程包括步骤
3.如权利要求2所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，其特征在于：所述的对照品溶液的制备过程包括
4.如权利要求2所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，其特征在于：所述的片剂供试品溶液的制备过程包括
5.如权利要求2-4任一项所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，其特征在于：所述的空白溶液为体积比为55:45的乙腈-水溶液。
6.如权利要求2所述的一种检测坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量的方法，其特征在于：在计算坎地沙坦酯中坎地沙坦酯中间体c3含量时，以色谱图中对应的定量离子...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴月霞，苏潇，杨本霞，陈杰，王璐，
申请(专利权)人：河南省药品医疗器械检验院河南省疫苗批签中心，
类型：发明
国别省市：
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