【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因诊断的，尤其是涉及一种宫颈癌clip3基因甲基化的检测试剂及试剂盒。
技术介绍
1、宫颈癌是常见的女性恶性肿瘤之一，近年来大量研究表明，宫颈癌的病死率呈现上升趋势，对妇女健康造成深远影响，因此，通过高效与精确的检测手段，对于早期精准发现高级别宫颈鳞状上皮内病变(high-gradesquamous intraepithelial lesion，hsil)，并及时给与干预、降低宫颈浸润癌发生率并改善患者生存率具有重要意义。
2、液基薄层细胞学是宫颈癌筛查的重要手段，其敏感性约为50%-80%，其对意义不明确的非典型鳞状细胞(atypical squamous cells of undefined significance，asc-us)的判读易受细胞病理医师主观因素与经验的影响，可能导致转诊阴道镜检查和治疗增加等问题。hpv检测虽然敏感性较高，但是特异性较低，较容易出现误诊现象。甲基化肿瘤标志物作为一种创新的检测技术，是癌症早筛的理想标志物，但是其受限于甲基化肿瘤标志物的检测试剂或者检测手段，导致肿瘤标志物的灵敏度和特异性不能满足需求。
3、因此，如何提高肿瘤标志物检测的灵敏度和特异性，成为亟待解决的问题。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种宫颈癌clip3基因甲基化的检测试剂及试剂盒。
2、本专利技术首次发现clip3基因进行甲基化检测，可以实现高特异性和高灵敏度的对宫颈癌及其癌前病变进行检测
3、第一方面，本申请提供一种目标基因甲基化的检测试剂在制备用于宫颈癌检测试剂盒中的应用，采用如下的技术方案：
4、clip3基因甲基化的检测试剂在制备用于宫颈癌检测试剂盒中的应用。
5、所述检测试剂的检测区域为clip3基因基因体或者其启动子区域；
6、优选的，检测试剂针对clip3基因的检测区域为seq id no：19或seq id no：20所示的核酸片段；
7、更优选的，检测试剂针对clip3基因的检测区域为seq id no：19所示的核酸片段。
8、检测试剂包括检测clip3基因甲基化的引物，所述引物选自seq id no：1、seq idno：2、seq id no：4、seq id no：5、seq id no：7、seq id no：8所示氨基酸序列，或与其具有至少80％以上的同源性的氨基酸序列。
9、优选的，所述引物选自seq id no：1、seq id no：2、seq id no：4、seq id no：5、seq id no：7、seq id no：8所示的序列或其互补序列中的至少任意一条。
10、优选的，所述引物选自seq id no：1和seq id no：2、seq id no：4和seq id no：5、seq id no：7和seq id no：8所示的至少一对引物对。
11、更优选的，所述引物选自seq id no：1和seq id no：2所示的引物对。
12、所述检测试剂包括检测clip3基因甲基化的探针；所述探针选自seq id no：3、seqid no：6、seq id no：9所示的序列或其互补序列中的至少任意一条。
13、优选的，所述探针选自seq id no：3所示的序列。
14、第二方面，本申请提供一种引物，采用如下的技术方案：
15、一种引物，所述引物选自seq id no：1、seq id no：2、seq id no：4、seq id no：5、seq id no：7、seq id no：8所示氨基酸序列，或与其具有至少80％以上的同源性的氨基酸序列。
16、优选的，所述引物选自seq id no：1、seq id no：2、seq id no：4、seq id no：5、seq id no：7、seq id no：8所示的序列或其互补序列中的至少任意一条。
17、优选的，所述引物选自seq id no：1和seq id no：2、seq id no：4和seq id no：5、seq id no：7和seq id no：8所示的至少一对引物对。
18、更优选的，所述引物选自seq id no：1和seq id no：2所示的引物对。
19、第三方面，本申请提供一种探针，采用如下的技术方案：
20、一种探针，所述探针选自seq id no：3、seq id no：6、seq id no：9所示的序列或其互补序列中的至少任意一条；
21、优选的，所述探针选自seq id no：3所示的序列；
22、在探针的3’末端连接有荧光淬灭基团，5’末端连接有荧光报告基团；
23、优选的，荧光淬灭基团为bhq、bhq1、bhq2、tamra或mgb，荧光报告基团为fam、cy3、cy5、hex、rox或tet；
24、更优选的，荧光淬灭基团为bhq1，荧光报告基团为fam。
25、在一个具体的可实施方案中，本申请提供一种引物探针组合，采用如下的技术方案：
26、一种引物探针组合，包括针对clip3基因检测的引物对和探针；
27、其中，针对clip3基因检测的引物对和探针的序列如下列任意一组所示：
28、组一：
29、引物对为seq id no：1和seq id no：2，探针为seq id no：3；
30、组二：
31、引物对为seq id no：4和seq id no：5，探针为seq id no：6；
32、组三：
33、引物对为seq id no：7和seq id no：8，探针为seq id no：9。
34、更优选的，针对clip3基因检测的引物对和探针的序列如下所示：
35、组一：引物对为seq id no：1和seq id no：2，探针为seq id no：3。
36、第四方面，本申请提供一种宫颈癌检测试剂，采用如下的技术方案：
37、一种宫颈癌检测试剂，所述检测试剂包括上述引物和/或上述探针。
38、优选的，所述检测试剂还包括dntps、dna聚合酶、缓冲液、无核酸酶水中的一种或几种。
39、优选的，所述检测试剂还包括内参基因的检测试剂；内参基因为β-actin或col2a1；进一步的，内参基因也可以采用现有技术的其他的甲基化检测的内参基因。
40、优选的，内参基因为β-actin。
41、更优选的，内参基因β-actin检测试剂含有针对内参基因检测的引物对和探针；引物对为seq id no：21和seq id no：22，探针为seq id no：23。
42、第五方面，本申请提供一种用于宫颈癌检测本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.CLIP3基因甲基化的检测试剂在制备用于宫颈癌检测试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：检测试剂针对CLIP3基因的检测区域为SEQID NO：19所示的核酸片段。
3.一种引物，其特征在于：所述引物选自SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示的至少一对引物对。
4.根据权利要求3所述的一种引物，其特征在于：所述引物选自SEQ ID NO：1和SEQ IDNO：2所示的引物对。
5.一种探针，其特征在于：所述探针选自SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9所示的序列或其互补序列中的至少任意一条；
6.一种宫颈癌检测试剂，其特征在于：所述检测试剂包括权利要求3所述的引物或权利要求5所述的探针。
7.根据权利要求6所述的一种宫颈癌检测试剂，其特征在于：所述检测试剂还包括dNTPs、DNA聚合酶、缓冲液、无核酸酶水、内参基因中的一种或几种；
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9.一种非疾病诊断目的的CLIP3基因甲基化检测方法，其特征在于，所述检测方法的步骤如下：
10.一种宫颈癌的诊断系统，其特征在于，所述诊断系统含有：
...【技术特征摘要】
1.clip3基因甲基化的检测试剂在制备用于宫颈癌检测试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：检测试剂针对clip3基因的检测区域为seqid no：19所示的核酸片段。
3.一种引物，其特征在于：所述引物选自seq id no：1和seq id no：2、seq id no：4和seq id no：5、seq id no：7和seq id no：8所示的至少一对引物对。
4.根据权利要求3所述的一种引物，其特征在于：所述引物选自seq id no：1和seq idno：2所示的引物对。
5.一种探针，其特征在于：所述探针选自seq id no：3、se...
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡兴盛，李仕良，陈敬臣，张桥石，资意，李梦真，邓泱泱，杨冬成，
申请(专利权)人：广州迈景基因医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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