【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及一种迁移水平高的肝癌细胞模型的制备方法及其应用。
技术介绍
1、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，hcc)是常见恶性肿瘤之一，全球发病率居肿瘤类疾病第六位，死亡率居肿瘤类疾病第三位，仅次于肺癌和结直肠癌。在中国，肝细胞癌死亡率仅次于肺癌居第二位，每年死于肝癌的人数约38.3万，占世界肝癌死亡人数的50％以上。并且根据流行病学调查统计，中国肝癌的新发病例仍在不断升高。
2、hcc的主要原因包括过量饮酒、黄曲霉素b1污染和乙型肝炎或丙型肝炎病毒慢性感染等。近几十年来，尽管hcc在手术治疗、放化疗以及分子靶向治疗等方面取得了很大进展，但由于其高侵袭、高转移及高复发等特性，hcc患者预后差的现状仍未发生根本改变。目前引起肝癌发生发展的确切分子机制尚不完全清楚。因此，探讨hcc发生发展机制，并寻找有效的早期诊断和治疗生物标志物成为目前hcc重要的研究方向。
3、hervs是远古时期感染人并整合到宿主基因组中、以孟德尔方式遗传至今的逆转录病毒的残余物，约占人基因组8％。herv可分为三个家族，分为：class i家族为γ逆转录病毒相似元件；class ii家族为β逆转录病毒相似元件，又称为herv-k超家族；class iii家族族为泡沫病毒相似元件，为泡沫病毒相似元件。一个完整hervs基因组结构包括两端的长末端重复序列简称ltr和四个中间开放阅读框(gag、pro、pol、env)，ltr通常包含功能调控元件，如启动子、增强子、转录因子结合位点。gag基因编码基质
4、hervs发挥的功能主要可分为生理功能和病理功能。有大量研究表明，hervs有着重要的生理功能，能够维持细胞的多能性,参与胚胎的发育、参与胎盘的形成。此外,有研究表明,hervs的异常激活与多种疾病相关,尤其显示出与多种癌症的发生密切相关。
5、长链非编码rna(long non-coding rna,incrna)是指长度大于200个核酸而不具备编码蛋白质功能的rna转录本。因lncrnas缺乏完整的开放阅读框，不能编码蛋白质，其曾经被人们认为是基因组转录过程中产生的“噪音”和“垃圾”而不受重视。但是，近年越来越多的研究表明，lncrnas在细胞内具有多种其他重要的分子功能，其可以在表观遗传水平、转录和转录后水平调控基因的表达，通过信号、诱饵、向导、脚手架等4种作用，参与机体的病理与生理过程。
6、越来越多的lncrnas被发现在肿瘤中异常表达，因其在肿瘤发生发展中的重要作用而成为现在肿瘤研究的新热点。lncrnas参与了肿瘤细胞生长、凋亡、迁移与侵袭等过程，在肿瘤的发生、发展过程中发挥着致癌基因或抑癌基因的作用。lncrnas可作为肿瘤诊断和预后预测的生物标志物，例如：malat1是第一个被发现与转移相关的lncrna，最初在肺腺癌组织内被发现。多项研究表明，malat1在多种癌症中高表达，包括肝癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、乳腺癌等，并且与恶性肿瘤的复发转移和患者预后差关系密切，被认为是促癌基因。但是,大多数lncrna在肝癌中的功能及作用机制尚不清楚还有待进一步研究。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种迁移水平高的肝癌细胞模型的制备方法及其应用。
2、第一方面，本专利技术提供了一种lncmer52d，其核苷酸序列为序列1。
3、第二方面，本专利技术提供了第一方面所述的lncmer52d或其核酸分子或表达所述核酸分子的重组载体或重组菌在制备用于筛选肝癌药物的肝癌细胞模型中的应用；所述肝癌细胞模型为迁移和/或侵袭水平提高的细胞模型。
4、第三方面，本专利技术提供了第一方面所述的lncmer52d或其核酸分子或表达所述核酸分子的重组载体或重组菌在如下任一中的应用：
5、1)制备促进肝癌细胞迁移的产品；
6、2)制备促进肝癌细胞侵袭的产品。
7、第四方面，本专利技术提供了一种产品，其活性成分为第一方面所述的lncmer52d或其核酸分子或表达所述核酸分子的重组载体或重组菌。
8、上文所述产品的功能为如下至少一种：
9、1)促进肝癌细胞迁移；
10、2)促进肝癌细胞侵袭。
11、第五方面，本专利技术提供了一种制备迁移和/或侵袭水平提高的肝癌细胞模型的方法，包括如下步骤：将第一方面所述的lncmer52d的核酸导入肝癌细胞中，得到肝癌细胞模型。
12、上文所述肝癌细胞模型的迁移和/或侵袭水平高于所述肝癌细胞。
13、本专利技术的实验证明，本专利技术发现一种lncmer52d，将其过表达后能够提高肝癌细胞的迁移和/或侵袭，获得迁移水平高的肝癌细胞模型，用于筛选肝癌药物。
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1.一种LncMER52D，其核苷酸序列为序列1。
2.权利要求1所述的LncMER52D或其核酸分子或表达所述核酸分子的重组载体或重组菌在制备用于筛选肝癌药物的肝癌细胞模型中的应用；所述肝癌细胞模型为迁移和/或侵袭水平提高的细胞模型。
3.权利要求1所述的LncMER52D或其核酸分子或表达所述核酸分子的重组载体或重组菌在如下任一中的应用：
4.一种产品，其活性成分为权利要求1所述的LncMER52D或其核酸分子或表达所述核酸分子的重组载体或重组菌。
5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于：
6.一种制备迁移和/或侵袭水平提高的肝癌细胞模型的方法，包括如下步骤：将权利要求1所述的LncMER52D的核酸导入肝癌细胞中，得到肝癌细胞模型。
【技术特征摘要】
1.一种lncmer52d，其核苷酸序列为序列1。
2.权利要求1所述的lncmer52d或其核酸分子或表达所述核酸分子的重组载体或重组菌在制备用于筛选肝癌药物的肝癌细胞模型中的应用；所述肝癌细胞模型为迁移和/或侵袭水平提高的细胞模型。
3.权利要求1所述的lncmer52d或其核酸分子或表达所述核酸分子的重组载体或重组菌在如下...
【专利技术属性】
技术研发人员：李林，贾磊，王春蕾，陈明月，张伯寒，李韩平，刘永健，韩婧婉，王晓林，李敬云，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：
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