【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种特异性靶向鼠疫耶尔森菌f1抗原的中和性抗体，所述中和性抗体为f23。
技术介绍
1、鼠疫是一种死亡率极高的自然疫源性的烈性传染病，病原菌为鼠疫耶尔森菌(yersinia pestis，简称鼠疫菌)。其引起的疾病类型主要包括肺鼠疫、败血型鼠疫和腺鼠疫，若发病超过24h未采取有效的抗生素和抗休克治疗，前两者的病死率高达100％，腺鼠疫的病死率也高达40％-70％，后期也可能会发展成更严重的感染。因此，早确诊、早治疗方能有效遏制病情恶化。
2、目前，治疗鼠疫的唯一手段就是使用抗生素，链霉素和庆大霉素被美国建议作为首选治疗药物，首选预防药物是多西环素和环丙沙星；将环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星作为二类药物；多西环素作为三类药物，氯霉素可用于治疗鼠疫脑膜炎。抗生素治疗使得鼠疫的发病率和死亡率大幅下降，然而，随着多重耐药鼠疫耶尔森菌的出现，本领域迫切需要开发有效的抗鼠疫耶尔森菌的中和性抗体。
3、f1抗原是一种鼠疫杆菌荚膜抗原，由caf1操纵子编码，在人体内引起特异性抗体免疫球蛋白g(igg)反应。f1抗原可与体内红细胞、淋巴细胞及组织细胞粘附，直接损伤细胞组织，且随血液扩散并大量繁殖。其是鼠疫耶尔森菌重要的毒力成分，也是该菌的保护性抗原，介导多种免疫应答反应。f1抗原常作为鼠疫检测标志物，同时也应用于鼠疫亚单位疫苗的制备，具有非常高的生物学价值。
4、随着单克隆抗体技术的成熟和发展，制备特异性靶向特定抗原的单克隆抗体并不困难，但筛选并获得具有良好中和活性的单克隆抗
技术实现思路
1、针对上述现有技术中存在的技术问题，本专利技术的目的在于提供一种特异性靶向鼠疫耶尔森菌f1抗原的全人源中和性抗体f23，实验证明，该抗体能够特异性结合鼠疫耶尔森菌保护性抗原f1蛋白，能够中和鼠疫耶尔森菌，可用于鼠疫耶尔森菌感染的防治中，具有重要的生物学和医学意义。本专利技术采用如下技术方案实现上述专利技术目的：
2、抗鼠疫耶尔森菌f1抗原的中和性抗体
3、本专利技术提供了一种抗鼠疫耶尔森菌f1抗原的中和性抗体。
4、进一步，所述抗体的重链可变区包含三个氨基酸序列分别如seq id no:1-3所示的重链互补决定区hcdr1-3，所述抗体的轻链可变区包含三个氨基酸序列分别如seq idno:6-8所示的轻链互补决定区lcdr1-3。
5、进一步，所述重链可变区序列、轻链可变区序列选自如下组：
6、(a)所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no:4所示，或与seq id no:4具有至少70％、80％、90％、95％或99％序列同一性；
7、(b)所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:9所示，或与seq id no:9具有至少70％、80％、90％、95％或99％序列同一性。
8、在本专利技术中，所述抗体的重链可变区还包括如seq id no:4所示的重链可变区的功能变体，所述轻链可变区还包括如seq id no:9所示的轻链可变区的功能变体，所述功能变体通过插入、缺失和/或取代其中的一个或多个氨基酸形成，前提是功能变体保留了结合鼠疫耶尔森菌f1抗原的能力和/或中和鼠疫耶尔森菌感染的能力。
9、所述功能变体包含或组成为与亲本多肽(所述抗体)的氨基酸序列具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、至少99.1％、至少99.2％、至少99.3％、至少99.4％、至少99.5％、至少99.6％、至少99.7％、至少99.8％、或至少99.9％的序列同源性的氨基酸序列。
10、在功能变体的内容中，插入、缺失和/或取代的氨基酸的数量优选不超过亲本氨基酸序列中氨基酸总数的40％，更优选不超过35％，更优选是1％至33％，并且更优选是5％至30％，更优选是10％至25％，更优选是15％至20％。例如，插入、缺失和/或取代的氨基酸的数量可以是1至20，优选是1至10，更优选是1至7，还更优选是1至5，最优选是1至2。在优选的实施方案中，插入、缺失和/或取代的氨基酸的数量是1、2、3、4、5、6或7。在一些实施方案中，所述插入、缺失和/或取代可以在框架(fr)区，例如在fr1、fr2、fr3和/或fr4进行。
11、在一些实施方案中，一个或多个氨基酸的取代可以是一个或多个氨基酸的保守取代。此类保守取代优选地是以下组(a)至(e)中的一个氨基酸被同组中的另一个氨基酸残基取代：(a)小的脂肪族、非极性或弱极性残基：ala、ser、thr、pro和gly；(b)极性、带负电的残基及其(不带电的)酰胺：asp、asn、glu和gln；(c)极性、带正电的残基：his、arg和lys；(d)大的脂肪族、非极性残基：met、leu、he、val和cys；(e)芳香族残基：phe、tyr和trp。
12、特别优选的保守取代如下：ala到gly或到ser；arg到lys；asn到gln或到his；asp到glu；cys到ser；gln到asn；glu到asp；gly到ala或到pro；his到asn或到gln；ile到leu或到val；leu到ile或到val；lys到arg、到gln或到glu；met到leu、到tyr或到ile；phe到met、到leu或到tyr；ser到thr；thr到ser；trp到tyr；tyr到trp；和/或phe到val、到ile或到leu。
13、中和性抗体的应用
14、本专利技术提供了如前所述的抗体的如下任一应用：
15、(1)如前所述的抗体在体外非诊断目的地检测鼠疫耶尔森菌f1蛋白中的应用；
16、(2)如前所述的抗体在制备鼠疫耶尔森菌f1蛋白的检测试剂或检测产品中的应用；
17、(3)如前所述的抗体在制备用于诊断鼠疫耶尔森菌感染相关疾病的诊断产品中的应用；
18、(4)如前所述的抗体在体外非治疗目的地抑制鼠疫耶尔森菌f1蛋白活性中的应用；
19、(5)如前所述的抗体在制备用于治疗和/或预防鼠疫耶尔森菌感染相关疾病的药物组合物或药物制剂中的应用。
20、在一些实施方案中，所述检测试剂或检测产品还可包含其它能够用于辅助检测鼠疫耶尔森菌f1蛋白的试剂，本领域技术人员能够根据实际需要在所述检测试剂或检测产品中添加一种或多种能够用于辅助检测鼠疫耶尔森菌f1蛋白的试剂，基于此制备得到的检测试剂或检测产品同样包含在本专利技术的保护范围内。在一些实施方案中，本专利技术所述的检测试剂、检测产品(例如检测试剂盒、检测试纸条、检测芯片)用于检测待测样品中的鼠疫耶尔森菌f1蛋白，以获得待测样品中鼠疫耶尔森菌f1蛋白的定性和/或定量检测结果。
21、在一些实施方案中，所述药物组合物或药物本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗鼠疫耶尔森菌F1抗原的中和性抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区包含三个氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1-3所示的重链互补决定区HCDR1-3，所述抗体的轻链可变区包含三个氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6-8所示的轻链互补决定区LCDR1-3。
2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述重链可变区序列、轻链可变区序列选自如下组：
3.权利要求1或2所述的抗体的如下任一应用：
4.一种编码权利要求1或2所述抗体的多核苷酸分子；
5.一种包含权利要求4所述多核苷酸分子的重组载体；
6.一种包含权利要求5所述重组载体的重组宿主细胞。
7.一种体外非诊断目的地检测鼠疫耶尔森菌F1蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括：
8.一种制备权利要求1或2所述抗体的方法，其特征在于，所述方法包括：
9.如下任一种产品：
10.如下任一种应用：
【技术特征摘要】
1.一种抗鼠疫耶尔森菌f1抗原的中和性抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区包含三个氨基酸序列分别如seq id no:1-3所示的重链互补决定区hcdr1-3，所述抗体的轻链可变区包含三个氨基酸序列分别如seq id no:6-8所示的轻链互补决定区lcdr1-3。
2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述重链可变区序列、轻链可变区序列选自如下组：
3.权利要求1或2所述的抗体的如下任一应用：
【专利技术属性】
技术研发人员：郑滨洋，张黎，周剑芳，李靖欣，吴海生，李翔，冯建萍，李胜，
申请(专利权)人：江苏省疾病预防控制中心江苏省公共卫生研究院，
类型：发明
国别省市：
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