一种硬骨鱼类内皮细胞系及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种硬骨鱼类内皮细胞系及其构建方法和应用，属于细胞模型技术领域。本发明专利技术采用胰酶消化的方式分离获得细胞系，并在培养期间按时添加含有多种诱导因子的星形胶质细胞条件培养基，诱导TVEC‑01细胞系具备更多脑微血管内皮细胞的生物特性，保藏编号为CGMCC NO.45733。本发明专利技术所述内皮细胞可经过80余次传代屏障功能仍未丧失，可对硬骨鱼机体的多个生物过程所涉及的机制进行研究；用于研究体外研究鱼类血管疾病相关机制；血管相关疾病的体外药物筛选以及相关靶点的研究；TVEC‑01细胞构建体外血脑屏障模型。本发明专利技术利用该模型进行脑膜炎致病菌无乳链球菌的感染实验，为无乳链球菌的跨细胞途径提供了研究工具。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞模型，具体涉及一种硬骨鱼类内皮细胞系及其构建方法和应用。

技术介绍

1、中枢神经系统(cns)与血液循环系统之间存在一种特殊的屏障结构称为血脑屏障(bbb)，主要由内皮细胞、星形胶质细胞等组成。由于bbb具有一定的限制物质通过的能力，因此成为了中枢神经系统能够稳定并避免多种病原体感染的重要原因。在血脑屏障中，内皮细胞之间的紧密连接(tightjunctions,tjs)是阻止各种毒素和病原体进入中枢神经系统的关键结构，可以封闭细胞间的间隙，它们与内皮细胞共同构成了血脑屏障的基础。然而，尽管bbb的存在阻挡了大部分某些病原体病原微生物和有害分子进入大脑，但部分病原体如无乳链球菌、神经坏死病毒等却依旧能破坏血脑屏障进入中枢神经系统诱发脑部疾病。中枢神经系统一旦发病，便会出现由于血脑屏障的存在而递药困难等问题。近年来，研究者们逐渐发现可由脂质体修饰的受体靶向肽、单克隆抗体等与转铁蛋白受体、乳铁蛋白等结合进行靶向给药，而这一切都离不开内皮细胞的内吞作用。此外，内皮细胞还间接参与了脑内生理活动的调节。由内皮细胞产生的葡萄糖代谢物可进入大脑加工成神经本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种硬骨鱼类内皮细胞系TVEC-01，其特征在于，保藏编号为CGMCCNO.45733。

2.根据权利要求1所述硬骨鱼类内皮细胞系TVEC-01，其特征在于，所述硬骨鱼类内皮细胞系TVEC-01来源于尼罗罗非鱼。

3.权利要求1或2所述硬骨鱼类内皮细胞系TVEC-01的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：选择健康有活力的硬骨鱼类，通过胰酶消化法获取细胞，对获取的细胞进行培养和传代，若干次纯化后获得均匀的鹅卵石样形态的细胞即为硬骨鱼类内皮细胞系TVEC-01；

4.根据权利要求3所述构建方法，其特征在于，当所述硬骨鱼类为尼罗罗非鱼时，通过对脑组织进行...

【技术特征摘要】

1.一种硬骨鱼类内皮细胞系tvec-01，其特征在于，保藏编号为cgmccno.45733。

2.根据权利要求1所述硬骨鱼类内皮细胞系tvec-01，其特征在于，所述硬骨鱼类内皮细胞系tvec-01来源于尼罗罗非鱼。

3.权利要求1或2所述硬骨鱼类内皮细胞系tvec-01的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：选择健康有活力的硬骨鱼类，通过胰酶消化法获取细胞，对获取的细胞进行培养和传代，若干次纯化后获得均匀的鹅卵石样形态的细胞即为硬骨鱼类内皮细胞系tvec-01；

4.根据权利要求3所述构建方法，其特征在于，当所述硬骨鱼类为尼罗罗非鱼时，通过对脑组织进行胰酶消化，获取细胞。

5.根据权利要求3所述构建方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王蓓，陈杨慧，黎源，蔡佳，黄瑜，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：