【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于食源性活性肽领域，具体涉及一种酪蛋白改善睡眠十肽及其制备方法与应用。
技术介绍
1、失眠是指难以入睡或难以保持睡眠的状态，包括睡眠潜伏期长、睡眠持续时间短、多梦或易醒。现代社会生活节奏加快，不管是青少年、成年人还是中老年人，都存在各种焦虑、压力问题；另外频繁使用手机或电脑，其长时间的蓝光辐射等，会显著影响睡眠质量，导致睡眠不足。睡眠和觉醒是人的一生中反复交替的两种生理状态。它们构成了一个循环，在漫长而疲惫的一天之后，恢复人类的生理和心理状态。充足和高质量的睡眠可以保护人们免受一些疾病的影响，如疲劳、免疫力下降、心脏病和记忆障碍。24％～36％的失眠主诉有焦虑或抑郁障碍，而在焦虑障碍患者中，睡眠障碍的患病率约为47.7％～74％。失眠是焦虑、抑郁和情绪障碍的危险因素，因此关于改善压力诱发的失眠和焦虑的研究是有趣和必要的。根据流行病学调查显示，全世界已超过3.5亿人患有焦虑或失眠。同时，失眠还会带来一系列的问题，如日间生活质量下降、易疲劳、焦虑、记忆力下降，严重失眠甚至还会引发焦虑/抑郁症、免疫功能障碍、心血管疾病等。目前，药物治疗是治疗失眠最有效和最广泛使用的方法。苯二氮卓类药物可激活gabaar的bzd位点，是治疗睡眠障碍最常用的镇静剂。常用于治疗睡眠的药物主要是苯二氮卓类、利眠宁等西药，以及酸枣仁、缬草、γ-氨基丁酸等天然活性物质，但西药存在一定的副作用，而已报道的天然活性物质，食源性成分较少，有待于进一步开发大量新的食物来源的改善睡眠活性物质。
2、目前食源性活性肽被发现可辅助治疗多种慢性疾病，如糖
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种酪蛋白改善睡眠十肽。
2、本专利技术的另一目的在于提供一种酪蛋白改睡眠十肽在预防和治疗慢性压力应激导致的失眠或睡眠障碍疾病的食品、保健品或药物中的应用。
3、本专利技术的目的通过如下技术方案之一实现。
4、一种酪蛋白改善睡眠十肽，所述十肽的一级结构氨基酸序列为tyr-gln-glu-pro-val-leu-gly-pro-val-arg(seq.id.no.1)，简称为yqepvlgpvr。
5、进一步地，所述酪蛋白改善睡眠十肽的制备方法包括化学合成法、生物酶解法、基因工程法。
6、本专利技术提供上述的一种酪蛋白改善睡眠十肽的生物酶解制备方法，具体包括如下步骤
7、(1)酪蛋白酶水解：将酪蛋白加水搅拌，先加入特定消化酶第一次酶解，再加入曲霉发酵液共培养发酵，进行第二次酶解，灭酶，酶解液收集后离心取上清，而后冷冻干燥获得酪蛋白酶解物；
8、(2)十肽分离：使用3kda分子量超滤膜收集透过液以获得酪蛋白酶解液的低分子量组分；酪蛋白酶解液的低分子量组分上样制备级超高效液相色谱uplc洗脱，检测波长为220nm，收集5.6-6.3min组分，冷冻干燥得到改善睡眠十肽，进一步质谱检测，证实含有本专利技术的改善睡眠十肽。
9、进一步地，步骤(1)中，所述酪蛋白与水的质量比为1:6-1:12。
10、进一步地，步骤(1)中，所述特定消化酶包括胰蛋白酶、胰酶或氨肽酶中的一种以上。
11、进一步地，步骤(1)中，所述消化酶的添加量为酪蛋白质量的0.1％-1.0％。
12、进一步地，步骤(1)中，所述第一次酶解的温度为37～40℃。
13、进一步地，步骤(1)中，所述第一次酶解的时间为1-6h。
14、进一步地，步骤(1)中，所述第二次酶解的温度为25～40℃。
15、进一步地，步骤(1)中，所述第二次酶解的时间为2-8h。
16、进一步地，步骤(1)中，所述曲霉发酵液来源于米曲霉或黑曲霉，所述曲霉发酵液主要用于产生外肽酶。
17、进一步地，步骤(2)中，所述洗脱为使用0.1％tfa乙腈以1.0-2.0ml/min的流速进行洗脱。
18、本专利技术还提供上述的酪蛋白改善睡眠十肽在制备改善睡眠食品、保健品或药物中的应用。
19、进一步地，所述改善睡眠食品、保健品或药物用于预防和治疗慢性压力应激导致的失眠或睡眠障碍疾病。
20、进一步地，所述的食品、保健品或药物中还可含有其他具有改善睡眠或抗焦虑功效的活性成分和/或可接受的辅料。
21、进一步地，所述食品、保健品或药物包括功能饮料、片剂、粉剂、压片糖果、凝胶糖果。
22、与现有技术相比，本专利技术具有如下优点和有益效果：
23、(1)本专利技术的十肽能显著提高戊巴比妥钠诱导小鼠入睡率，极显著延长戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间。
24、(2)本专利技术的十肽可以用于预防和治疗失眠和睡眠障碍疾病的普通食品、食品添加剂、功能食品或缓解压力、焦虑及抑郁、镇静安眠保健食品或药物中，发挥改善睡眠功效。
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1.一种酪蛋白改善睡眠十肽，其特征在于，所述酪蛋白改善睡眠十肽的氨基酸序列为Tyr-Gln-Glu-Pro-Val-Leu-Gly-Pro-Val-Arg。
2.根据权利要求1所述的酪蛋白改善睡眠十肽，其特征在于，所述酪蛋白改善睡眠十肽的制备方法包括化学合成法、生物酶解法、基因工程法。
3.权利要求1所述的一种酪蛋白改善睡眠十肽的生物酶解制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述酪蛋白与水的质量比为1:6-1:12。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述特定消化酶包括胰蛋白酶、胰酶或氨肽酶中的一种以上；所述特定消化酶的添加量为酪蛋白质量的0.1～1.0％；所述第一次酶解的温度为37～40℃；所述第一次酶解的时间为1～6h。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述曲霉发酵液来源于米曲霉或黑曲霉；所述曲霉发酵液用于产生外肽酶；所述第二次酶解的温度为25～40℃，所述第二次酶解的时间为2-8h。
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8.权利要求1所述的一种酪蛋白改善睡眠十肽在制备改善睡眠食品、保健品或药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述食品、保健品或药物中酪蛋白改善睡眠十肽可以与其他具有改善睡眠或抗焦虑功效的活性成分和/或可接受的辅料复配。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述食品、保健品或药物包括功能饮料、片剂、粉剂、压片糖果、凝胶糖果。
...【技术特征摘要】
1.一种酪蛋白改善睡眠十肽，其特征在于，所述酪蛋白改善睡眠十肽的氨基酸序列为tyr-gln-glu-pro-val-leu-gly-pro-val-arg。
2.根据权利要求1所述的酪蛋白改善睡眠十肽，其特征在于，所述酪蛋白改善睡眠十肽的制备方法包括化学合成法、生物酶解法、基因工程法。
3.权利要求1所述的一种酪蛋白改善睡眠十肽的生物酶解制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述酪蛋白与水的质量比为1:6-1:12。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述特定消化酶包括胰蛋白酶、胰酶或氨肽酶中的一种以上；所述特定消化酶的添加量为酪蛋白质量的0.1～1.0％；所述第一次酶解的温度为37～40℃；所述第一次酶解的时间为...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵谋明，钱兢菁，郑淋，赵翊君，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：
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