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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于食源性生物活性肽领域,具体涉及一种酪蛋白改善睡眠九肽及其制备方法与应用。
技术介绍
1、现代社会生活节奏的加快及压力的增加,使得失眠、焦虑、抑郁和记忆障碍等不同精神障碍的发病率显著增加。长期暴露在压力下,如不健康的饮食、不充分的锻炼和过度使用电脑,会损害大脑和身体功能,这与各种神经退行性疾病和精神障碍有关。据流行病学调查结果显示,全世界有超过3.5亿人患有焦虑和失眠问题。因此,慢性应激压力引起的焦虑和失眠行为及脑功能障碍越来越受到关注。目前睡眠障碍的临床治疗包括心理治疗方法和药物治疗,如行为策略、认知治疗、苯二氮类药物(bzds)、抗组胺药、抗抑郁药和褪黑素等等。gaba受体是临床上治疗失眠和焦虑药物的有效治疗靶点,其激动剂如地西泮和阿普唑仑是常用的治疗药物。然而,由于它们通常会造成高昂的费用、短期的治疗效果和不必要的副作用。因此,副作用小、治疗睡眠障碍效率高的天然和食物促睡眠物质受到广泛关注。另外,由于其复杂的机制和缺乏安全可靠的药物,有效的食源性活性物质的开发仍缺乏。目前食源性活性肽被发现可辅助治疗多种慢性疾病,如糖尿病、高血压、焦虑/抑郁及改善睡眠等。食源性活性肽具有天然来源、安全可靠、高效提取等优势,已逐渐成为研究热点。
2、有趣的是,越来越多的证据表明生物活性肽和大脑健康之间的联系,一些特定的生物活性肽可以预防来自生理和心理压力导致的大脑功能障碍、焦虑和失眠等行为。比如,已发表的中国专利cn111153963a公开了一种抗炎肽aptlw在改善记忆中的应用,aptlw在斑马鱼模型中表现出显著的改
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种酪蛋白改善睡眠九肽。
2、本专利技术的另一目的在于提供一种酪蛋白改睡眠九肽在预防和治疗慢性压力应激导致的失眠或睡眠障碍疾病的食品、保健品或药物中的应用。
3、本专利技术的目的通过如下技术方案之一实现:
4、一种酪蛋白改善睡眠九肽,所述一种酪蛋白改善睡眠九肽的氨基酸序列为:tyr-pro-phe-pro-gly-pro-ile-pro-asn,简称ypfpgpipn。
5、进一步地,所述一种酪蛋白改善睡眠九肽的制备方法包括化学合成法、生物酶解法、基因工程法。
6、进一步地,所述一种酪蛋白改善睡眠九肽可从酪蛋白酶解产物中提取分离获得。
7、本专利技术提供上述一种酪蛋白改善睡眠九肽在制备改善睡眠食品、保健品或药物中的应用。
8、进一步地,所述改善睡眠食品、保健品或药物用于预防和治疗慢性压力应激导致的失眠或睡眠障碍疾病。
9、进一步地,所述的食品、保健品或药物中还可含有其他具有改善睡眠或抗焦虑功效的活性成分和/或可接受的辅料。
10、进一步地,所述食品、保健品或药物包括功能饮料、片剂、粉剂、压片糖果、凝胶糖果。
11、本专利技术还提供上述的一种酪蛋白改善睡眠九肽的生物酶解制备方法,具体包括如下步骤:
12、(1)酪蛋白酶水解:将酪蛋白加水搅拌,先加入内切酶或嗜热蛋白酶,第一次酶解,灭酶,并冷却;再加入消化酶及曲霉发酵液共培养,第二次酶解,灭酶并冷却;酶解液经过滤浓缩后,喷雾干燥获得酪蛋白酶解物;
13、(2)九肽分离提纯:使用3kda分子量超滤膜收集透过液以获得酪蛋白酶解液的低分子量组分;酪蛋白酶解液的低分子量组分上样制备级超高效液相色谱uplc洗脱,检测波长为220nm,收集7.5-7.8min处组分,经质谱鉴定后,证实含有本专利技术的改善睡眠九肽。
14、进一步地,步骤(1)中的内切蛋白酶包括碱性蛋白酶或复合蛋白酶中的一种。
15、进一步地,步骤(1)中,所述酪蛋白与水的质量比为1:6-1:12。
16、进一步地,步骤(1)中,所述内切酶或嗜热蛋白酶的质量为酪蛋白质量的0.01~0.8%。
17、进一步地,步骤(1)中,所述第一次酶解的温度为40~70℃。
18、进一步地,步骤(1)中,所述第一次酶解的时间为0.5~4h。
19、进一步地,步骤(1)中,所述消化酶的质量为酪蛋白质量的0.1%-1%。
20、进一步地,步骤(1)中,所述第二次酶解的温度为25~40℃。
21、进一步地,步骤(1)中,所述第二次酶解的时间为4-8h。
22、进一步地,步骤(1)中,所述消化酶包括胰蛋白酶或胰酶中的一种以上;
23、进一步地,步骤(1)中,所述曲霉发酵液来源于米曲霉或黑曲霉,所述曲霉发酵液主要用于产生外肽酶。
24、进一步地,步骤(2)中,所述洗脱为使用0.1%tfa乙腈以1.0-2.0ml/min的流速进行洗脱。
25、进一步地,所述生物酶解制备方法对改善睡眠九肽的释放量可达到2.09%
26、与现有技术相比,本专利技术具有如下优点和有益效果:
27、(1)本专利技术的九肽能显著提高戊巴比妥钠诱导小鼠入睡率,极显著延长戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间,并且在特定的工艺下可以释放1.0%以上,最高可释放2.0%。
28、(2)本专利技术的九肽可以用于预防和治疗失眠和睡眠障碍疾病的普通食品、食品添加剂、功能食品或缓解压力、焦虑及抑郁、镇静安眠保健食品或药物中,发挥改善睡眠功效。
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1.一种酪蛋白改善睡眠九肽,其特征在于,所述酪蛋白改善睡眠九肽的氨基酸序列为:Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn,简称YPFPGPIPN。
2.根据权利要求1所述的一种改善睡眠九肽,其特征在于,所述改善睡眠九肽的制备方法包括化学合成法、生物酶解法、基因工程法。
3.根据权利要求1所述的一种酪蛋白改善睡眠九肽,其特征在于,所述一种酪蛋白改善睡眠九肽可从酪蛋白酶解产物中提取分离获得。
4.权利要求1所述的一种酪蛋白改善睡眠九肽在制备改善睡眠食品、保健品或药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的一种酪蛋白改善睡眠九肽在制备改善睡眠食品、保健品或药物中的应用,其特征在于,所述的食品、保健品或药物中权利要求1所述一种酪蛋白改善睡眠九肽可以与其他具有改善睡眠或抗焦虑功效的活性成分和/或可接受的辅料复配。
6.根据权利要求4所述的一种酪蛋白改善睡眠九肽在制备改善睡眠食品、保健品或药物中的应用,其特征在于,所述食品、保健品或药物包括功能饮料、片剂、粉剂、压片糖果、凝胶糖果。
7.权利要求1
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述内切酶包括碱性蛋白酶或复合蛋白酶中的一种;步骤(1)中,所述酪蛋白与水的质量比为1:6-1:12;所述内切酶或嗜热蛋白酶的质量为酪蛋白质量的0.01~0.8%;所述第一次酶解的温度为40~70℃;所述第一次酶解的时间为0.5~4h;所述第二次酶解的温度为25~40℃,所述第二次酶解的时间为4-8h。
9.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述消化酶包括胰蛋白酶或胰酶中的一种以上;所述消化酶的质量为酪蛋白质量的0.1%-1%;所述曲霉发酵液来源于米曲霉或黑曲霉,所述曲霉发酵液用于产生外肽酶。
10.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述洗脱为使用0.1%TFA乙腈以1.0-2.0mL/min的流速进行洗脱。
...【技术特征摘要】
1.一种酪蛋白改善睡眠九肽,其特征在于,所述酪蛋白改善睡眠九肽的氨基酸序列为:tyr-pro-phe-pro-gly-pro-ile-pro-asn,简称ypfpgpipn。
2.根据权利要求1所述的一种改善睡眠九肽,其特征在于,所述改善睡眠九肽的制备方法包括化学合成法、生物酶解法、基因工程法。
3.根据权利要求1所述的一种酪蛋白改善睡眠九肽,其特征在于,所述一种酪蛋白改善睡眠九肽可从酪蛋白酶解产物中提取分离获得。
4.权利要求1所述的一种酪蛋白改善睡眠九肽在制备改善睡眠食品、保健品或药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的一种酪蛋白改善睡眠九肽在制备改善睡眠食品、保健品或药物中的应用,其特征在于,所述的食品、保健品或药物中权利要求1所述一种酪蛋白改善睡眠九肽可以与其他具有改善睡眠或抗焦虑功效的活性成分和/或可接受的辅料复配。
6.根据权利要求4所述的一种酪蛋白改善睡眠九肽在制备改善睡眠食品、保健品或药物中的应用,其特征在于,所述食品、保健品或...
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