一种啮齿类动物胰岛提取用穿刺针及胰岛提纯方法技术

技术编号:40590315 阅读:20 留言:0更新日期:2024-03-12 21:51
本发明专利技术公开了一种啮齿类动物胰岛提取用穿刺针及胰岛提纯方法,所公开的穿刺针包括金属管,该金属管一端连接有非金属毛细管,所述非金属毛细管的外径小于啮齿类动物胆总管的内径,且可穿过胆总管。所公开的方法是采用所述穿刺针经胆囊和胆总管穿刺置管,注射胶原酶P液灌注和消化胰腺,应用密度梯度离心液离心消化后的胰腺,再通过细胞筛网过筛以提取纯化胰岛。本发明专利技术可显著缩短胰岛提取实验操作时间,有效解决胆总管穿刺难度大成功率低的瓶颈难题。纯化后的胰岛产量和纯度高,活力和分泌功能良好,胰岛培养过程中贴壁率高,是一种操作简单、便捷高效的小鼠胰岛提取纯化方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及实验动物组织提取技术,具体涉及一种小鼠胰岛的提取与纯化方法。


技术介绍

1、美国学者bensley作为胰岛分离的先驱,在1911年通过对胰岛染色进而手工摘取胰岛,1964年瑞典医生使用显微镜对肥胖糖尿病小鼠的胰腺进行显微解剖来获取胰岛,但和bensley一样,获取的胰岛产量和质量都很差。

2、1965年波兰医生moskalewski首次用胶原酶消化剪碎的胰腺来提取胰岛,但大部分胰岛被胶原酶所破坏,随后美国医生lacy和kostianovsky针对胰腺的解剖结构,应用胆总管穿刺灌注生理盐水使胰腺膨胀的方法,增大胰腺表面与胶原酶的接触面积,促进胰岛的分离。

3、直到1985年日本学者gotoh提出胆总管穿刺灌注胶原酶的方法,成为分离啮齿类动物(如小鼠)胰岛的重要里程碑。

4、此外,分离的胰岛通过传统的手工挑选方法效率低耗时长,难以满足大规模的胰岛分离纯化,密度梯度离心纯化的方法应用而生。从刚开始的糖或白蛋白密度梯度离心液,后续经过不断的改进,出现了高分子量聚合物ficoll离心液,显著提升了胰岛纯化的效果。...

【技术保护点】

1.一种啮齿类动物胰岛提取用穿刺针,其特征在于,所述穿刺针包括金属管,该金属管一端连接有非金属毛细管,所述非金属毛细管的外径小于啮齿类动物胆总管的内径,且非金属毛细管可穿过胆总管。

2.根据权利要求1所述的啮齿类动物胰岛提取用穿刺针,其特征在于,所述金属管长度为:6-20mm;外径为:0.18-0.19mm,内径为:0.06-0.11mm;所述非金属毛细管长度为:1-3cm,外径为:0.20-0.30mm,内径为:0.10-0.19mm。

3.根据权利要求1所述的啮齿类动物胰岛提取用穿刺针,其特征在于,所述非金属毛细管的材质可为聚丙烯、聚乙烯或聚氨酯材质。

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【技术特征摘要】

1.一种啮齿类动物胰岛提取用穿刺针,其特征在于,所述穿刺针包括金属管,该金属管一端连接有非金属毛细管,所述非金属毛细管的外径小于啮齿类动物胆总管的内径,且非金属毛细管可穿过胆总管。

2.根据权利要求1所述的啮齿类动物胰岛提取用穿刺针,其特征在于,所述金属管长度为:6-20mm;外径为:0.18-0.19mm,内径为:0.06-0.11mm;所述非金属毛细管长度为:1-3cm,外径为:0.20-0.30mm,内径为:0.10-0.19mm。

3.根据权利要求1所述的啮齿类动物胰岛提取用穿刺针,其特征在于,所述非金属毛细管的材质可为聚丙烯、聚乙烯或聚氨酯材质。

4.根据权利要求1所述的啮齿类动物胰岛提取用穿刺针,其特征在于,所述非金属毛细管的硬度范围为洛氏a85-105。

5.根据权利要求1所述的啮齿类动物胰岛提取用...

【专利技术属性】
技术研发人员:张文成杨硕高彬鱼馨文孙飞
申请(专利权)人:中国人民解放军空军军医大学
类型:发明
国别省市:

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