一种生产N-乙酰基-反式-4-羟基脯氨酸的工程菌及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种生产N‑乙酰基‑反式‑4‑羟基脯氨酸的工程菌及应用，属于生物技术领域。本发明专利技术通过突变酰基转移酶，并引入外源脯氨酸‑4‑羟化酶，构建重组菌株，实现了以脯氨酸为底物，发酵合成N‑乙酰基‑反式‑4‑羟基脯氨酸。本发明专利技术生产成本低，发酵周期短，菌株稳定性高的优点，具有高经济效益。本发明专利技术构建的重组菌株可将0.5M的脯氨酸转化为19.64mg/L的N‑乙酰基‑反式‑4‑羟基脯氨酸。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生产n-乙酰基-反式-4-羟基脯氨酸的工程菌及应用，属于生物。

技术介绍

1、n-乙酰基-反式-4-羟基脯氨酸是一种发现具有抑制关节病期间白细胞浸润和晚期结缔组织变化的物质。其被认为是一种有效成分，可用于制备缓解中重度程度疼痛的镇痛非甾体抗炎药。相较于传统的非甾体消炎药，该物质具有良好的肠胃耐受性，副作用小，因而在医学上具备广泛的应用前景。这使得n-乙酰基-反式-4-羟基脯氨酸成为近些年最具潜力的新型非甾体抗炎药之一。其独特的生物活性和良好的药理特性为缓解疼痛症状提供了新的临床选择。

2、目前n-乙酰基-反式-4-羟基脯氨酸的合成是通过有机合成化学反应来实现的，包括脯氨酸保护基的引入、羟基官能团的转化以及对立体化学的精确控制。n-乙酰基-反式-4-羟基脯氨酸的化学合成过程面临多方面的挑战。首先，合成步骤繁琐，涉及多个复杂的反应步骤，需要高度精准的合成技术和操作控制。其次，由于分子中存在多个官能团，反应的选择性成为一个问题，导致合成产物可能包含多种同分异构体。在此基础上，产率方面存在挑战，部分化学反应的产率较低，影响整体的制备效本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基因工程菌，其特征在于，所述工程菌表达了外源酰基转移酶和脯氨酸-4-羟化酶；其中，所述外源酰基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，或者在如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的基础上突变第97位或/和第154位的氨基酸。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，第97位的赖氨酸突变为丙氨酸。

3.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，第154位的苯丙氨酸突变为丙氨酸。

4.一种生产N-乙酰基-反式-4-羟基脯氨酸的方法，其特征在于，所述方法为将权利要求1～3任一所述基因工程菌加入含有脯氨酸的培养体系中，培养至OD600达到0...

【技术特征摘要】

1.一种基因工程菌，其特征在于，所述工程菌表达了外源酰基转移酶和脯氨酸-4-羟化酶；其中，所述外源酰基转移酶的氨基酸序列如seq id no.1所示，或者在如seq id no.1所示的氨基酸序列的基础上突变第97位或/和第154位的氨基酸。

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，第97位的赖氨酸突变为丙氨酸。

3.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，第154位的苯丙氨酸突变为丙氨酸。

4.一种生产n-乙酰基-反式-4-羟基脯氨酸的方法，其特征在于，所述方法为将权利要求1～3任一所述基因工程菌加入含有脯氨酸的培养体系中，培养至od600达到0.8～1.0，加入乳糖进行诱导，诱导后加入酰基供体进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：程景方，薛儒康，孙付保，魏川翔，胡芸，孙驰贺，
申请(专利权)人：可莱尼化妆品科技有限公司，
类型：发明
国别省市：