一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3蛋白测定试剂盒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种胶乳免疫比浊法的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3测定试剂盒，试剂盒含有试剂R1和试剂R2；试剂R1包含以下组分：4‑(2‑羟乙基)‑1‑哌嗪乙磺酸缓冲液、氯化钠、阻断剂、聚乙二醇8000、表面活性剂、Pc300；试剂R2包含以下组分：4‑(2‑羟乙基)‑1‑哌嗪乙磺酸缓冲液、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体包被胶乳微球、稳定剂、分散剂、Pc300。该试剂盒是稳定性强、准确度高、线性范围广、灵敏度高、抗干扰的液体试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生化检测，特别是涉及一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3测定试剂盒和应用。

技术介绍

1、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican3,gpc3)是硫酸乙酰肝素糖蛋白家族中的一员，它通过c端与糖基磷脂酰基醇的结合而锚定于细胞外膜上。1996年耶鲁大学在研究一种x染色体连锁的隐性遗传病simpson-golabi-behmel过度增长综合征(sgbs)时第一次发现了gpc3基因(又称mxr-7或者oci-5基因)，该基因定位于人染色体xq26，基因结构全长大于900kb，是人类基因组中最大的基因之一，由8个外显子，7个内含子组成。其相对分子质量为60000，在358位的精氨酸与359位的丝氨酸发生解离，n端进入血液中，称为可溶性gpc3，相对分子质量为40000，研究发现gpc3在生长因子的信号传导中其扮演重要角色，从而在细胞增殖、分化及迁移中发挥重要作用，起到调节肿瘤细胞增殖的活性的作用。近年来大量研究发现gpc3在胚胎肝脏组织、肝癌组织及大部分肝癌细胞系中高水平表达，而在正常肝组织几乎无表达，提示gpc3可以作为一种有价值的肝癌组织学肿瘤标记物。

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【技术保护点】

1.一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3测定试剂盒由以下成分组成，其特征在于，该试剂盒含有试剂R1和试剂R2；

2.一种权利要求1所述的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3测定试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3测定试剂盒的制备方法，其特征在于，磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体包被胶乳微球的制备方法为：取适量聚苯乙烯胶乳微球加入50mmol/L pH6.0的MES缓冲液中，使其胶乳微球终浓度为1％，加入10mg/ml的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐EDAC溶液，室温反应1小时，12000rpm离心20min，用50mmol/L p...

【技术特征摘要】

1.一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3测定试剂盒由以下成分组成，其特征在于，该试剂盒含有试剂r1和试剂r2；

2.一种权利要求1所述的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3测定试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3测定试剂盒的制备方法，其特征在于，磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体包被胶乳微球的制备方法为：取适量聚苯乙烯胶乳微球加入50mmol/l ph6.0的mes缓冲液中，使其胶乳微球终浓度为1％，加入10mg/ml的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐edac溶液，室温反应1小时，12000rpm离心20min，用50mmol/l ph6.0的mes缓冲液洗涤两次；然后加入磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体，在37℃孵育2小时，与胶乳微球进行偶联，形成抗体胶乳复合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：王飞，隗勇，胡书祥，徐玉超，
申请(专利权)人：中拓生物有限公司，
类型：发明
国别省市：