【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于杂质检测，具体涉及一种厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法。
技术介绍
1、这里的陈述仅提供与本专利技术相关的
技术介绍
，而不必然地构成现有技术。
2、厄贝沙坦原料药有产生和残留5-(4’-(叠氮甲基)-[1,1’-联苯]-2-基)-1h-四唑(gti2)及其母体4’-(叠氮甲基)-[1,1’-联苯]-2-腈(gti1)的风险，并且这两个杂质有遗传毒性，毒性较大，为控制厄贝沙坦原料药质量，需要对这两个杂质进行控制检测。这两个叠氮杂质限度低，需要控制不超过百万分之五(5ppm)的限度，目前所公开的方法均为液质方法，仪器昂贵、各公司普及性差。
3、此外，供试品溶液中厄贝沙坦浓度较大，多种未知杂质均能检出，出峰连绵不绝，难以同时兼顾厄贝沙坦和多种未知杂质对杂质1和杂质2测定干扰。有文献报道单独检测这两个杂质，需要用两个方法进行检测，导致检测工作量大、检测时间偏长。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的是提供一种厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法。
2、为了实现上述目的，本专利技术是通过如下的技术方案来实现：
3、一种厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，包括如下步骤：
4、将厄贝沙坦原料加入乙腈中，在65-75℃加热溶解，降温后加水稀释，混合后，室温静置提取0.5-1.5h，离心后取上清液；
5、分别配制叠氮杂质1和叠氮杂质2的对照品溶液；
6、将所述上清液
7、其中，杂质1为5-(4'-叠氮甲基-[1,1'-联苯]-2-基)-1h-四氮唑；杂质2为4'-叠氮甲基-[1,1'-联苯]-2-腈。
8、在65-75℃加热溶解，既可以保证厄贝沙坦原料和杂质在乙腈中充分溶解，提高杂质检测的准确性，又可以避免乙腈的浪费。
9、在一些实施例中，对厄贝沙坦原料进行提取时，乙腈和水的体积比为1:0.8-1.5。乙腈可以增加厄贝沙坦样品的溶解度，并且根据试验可知，乙腈能增加杂质的溶解度，在样品配制过程减少厄贝沙坦析出对杂质1和杂质2的包裹，保证杂质1和杂质2测定的准确性。在提取过程中，乙腈的加入量太少，样品无法溶解，乙腈的加入量太多，会增加样品洗脱时长，且色谱图中杂质1和杂质2的峰形较差。
10、优选的，乙腈和水的体积比为1:1。
11、在一些实施例中，室温静置提取的温度为10-30℃。
12、在一些实施例中，液相色谱检测时，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，xb-c18，4.6mm*250mm，5μm。
13、优选的，液相色谱检测的流动相a为：0.005mol/l磷酸二氢钾溶液，ph值为2.7；流动相b为甲醇。
14、优选的，液相色谱的检测波长为224nm。综合对比杂质1紫外光谱图(图8)和杂质2紫外光谱图(图9)，杂质2吸收较弱，但是在224.1nm波长处有最大吸收，综合考虑检测能力和检测噪音，选择224nm作为液相色谱的检测波长。
15、优选的，梯度洗脱程序为：0-45min，流动相b 55％；45-50min，流动相b 55％-70％；50-75min，流动相b 70％；75-76min，流动相b 70％-55％；76-85min，流动相b55％，％为体积百分数。
16、通过实验发现流动相b在55％时，各厄贝沙坦原料药中各杂质峰不干扰gti1和gti2的测定，后续通过增加流动相b(甲醇)，以增加流动相的洗脱能力，从而更快的冲洗出色谱柱中的各杂质，最后回到流动相b 55％的比例进行色谱柱的平衡，以达到平衡色谱柱的目的，为下次进样做准备。
17、在一些实施例中，柱温为30℃。
18、在一些实施例中，进样体积为50μl，流动相流速为1ml/min。
19、上述本专利技术的一种或多种实施例取得的有益效果如下：
20、本专利技术提供的检测方法具有灵敏度高、专属性强、准确度好、灵敏度高的特点，且灵敏度可达1ppm，能够高效、快捷、方便的检测厄贝沙坦中的遗传毒性杂质。有利于厄贝沙坦成品检测中加强对该遗传毒性杂质的质量控制，从而提高对厄贝沙坦原料药的质量控制。且该检测方法仅需采用高效液相色谱仪即可进行，无需采用更高精度分析仪器，大大降低了检测成本。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：对厄贝沙坦原料进行提取时，乙腈和水的体积比为1:0.8-1.5。
3.根据权利要求2所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：乙腈和水的体积比为1:1。
4.根据权利要求1所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：室温静置提取的温度为10-30℃。
5.根据权利要求1所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：液相色谱检测时，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，XB-C18，4.6mm*250mm，5μm。
6.根据权利要求5所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：液相色谱检测的流动相A为：0.005mol/L磷酸二氢钾溶液，pH值为2.7；流动相B为甲醇。
7.根据权利要求5所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：液相色谱的检测波长为224nm。
8
9.根据权利要求5所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：柱温为30℃。
10.根据权利要求5所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：进样体积为50μl，流动相流速为1ml/min。
...【技术特征摘要】
1.一种厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：对厄贝沙坦原料进行提取时，乙腈和水的体积比为1:0.8-1.5。
3.根据权利要求2所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：乙腈和水的体积比为1:1。
4.根据权利要求1所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：室温静置提取的温度为10-30℃。
5.根据权利要求1所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：液相色谱检测时，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，xb-c18，4.6mm*250mm，5μm。
6.根据权利要求5所述的厄贝沙坦中痕量叠氮杂质的液相色谱检测方法，其特征在于：液相色谱检测...
【专利技术属性】
技术研发人员：段连帅，张照风，钟振华，
申请(专利权)人：山东创新药物研发有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。