一种制备N1-甲基假尿苷三磷酸的方法技术

本发明专利技术公开一种制备N1‑甲基假尿苷三磷酸的方法，属于生物化学技术领域，本发明专利技术提供的方法通过重组菌株的构建获取酶催化剂，以N1‑甲基假尿苷为底物，以三磷酸腺苷为磷酸供体，添加乙酰磷酸以提供磷酸基团，构建磷酸循环，采用一锅法进行酶催化反应，得到终产物N1‑甲基假尿苷三磷酸。本发明专利技术提供的方法底物N1‑甲基假尿苷的转化率高，成本低廉且易得，填补了目前生物法制备N1‑甲基假尿苷三磷酸的空白，为生物酶制备核苷及其磷酸衍生物提供了思路，采用一锅法酶催化方法，操作简单，反应条件温和，成本低，产量高，且绿色环保无污染，利于工业化放大生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化学，特别是涉及一种制备n1-甲基假尿苷三磷酸的方法。

技术介绍

1、在当前的疫苗研发与生产领域中，mrna疫苗得到了快速发展。与传统的灭活疫苗和减毒疫苗相比，mrna疫苗具备生产周期短，安全性更高等优势。更重要的是，在研发上，mrna 疫苗能够快速地更新迭代，因此在应对不断出现的如新冠病毒突变株等病毒上更胜一筹。

2、然而，mrna疫苗的研发也面临一些难点，其中最大的挑战之一就是mrna的免疫原性。mrna作为外源物质，进入人体后会激活人体的免疫系统，进而引发由mrna本身引起的炎症反应，并可能导致mrna还未发挥作用就被免疫系统清除。引入天然修饰核苷酸是降低mrna疫苗免疫原性的有效手段之一。

3、假尿苷（pseudouridine）是rna上最丰富的修饰核苷，又被称为rna的“第五种核苷”。2005年，katalin karikó等人发现将假尿苷引入rna中能降低其免疫原性，并且rna的免疫原性随着假尿苷引入比例的增高而降低。2008年，katalin karikó等人还发现用假尿苷完全替代尿苷的mrna不仅本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备N1-甲基假尿苷三磷酸的方法，其特征在于，以N1-甲基假尿苷为底物，添加酶催化剂和磷酸供体，构建磷酸循环，采用一锅法进行酶催化反应，得到终产物N1-甲基假尿苷三磷酸，所述酶催化反应包括如下阶段：

2. 根据权利要求1所述的制备N1-甲基假尿苷三磷酸的方法，其特征在于，所述N1-甲基假尿苷的浓度为10-50 mmol/L。

3. 根据权利要求1所述的制备N1-甲基假尿苷三磷酸的方法，其特征在于，所述三磷酸腺苷的浓度为1~10 mmol/L。

4. 根据权利要求1所述的制备N1-甲基假尿苷三磷酸的方法，其特征在于，所述乙酰磷酸的浓度为1~200...

【技术特征摘要】

1.一种制备n1-甲基假尿苷三磷酸的方法，其特征在于，以n1-甲基假尿苷为底物，添加酶催化剂和磷酸供体，构建磷酸循环，采用一锅法进行酶催化反应，得到终产物n1-甲基假尿苷三磷酸，所述酶催化反应包括如下阶段：

2. 根据权利要求1所述的制备n1-甲基假尿苷三磷酸的方法，其特征在于，所述n1-甲基假尿苷的浓度为10-50 mmol/l。

3. 根据权利要求1所述的制备n1-甲基假尿苷三磷酸的方法，其特征在于，所述三磷酸腺苷的浓度为1~10 mmol/l。

4. 根据权利要求1所述的制备n1-甲基假尿苷三磷酸的方法，其特征在于，所述乙酰磷酸的浓度为1~200 mmol /l。

5.根据权利要求1所述的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄月园，李杰，张艺，张波琨，卞琪，孙丰来，
申请(专利权)人：泰兴合全药业有限公司，
类型：发明
国别省市：