【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种，具体涉及一种与花椰菜种子结实率性状连锁的kasp标记引物组及其应用。
技术介绍
1、花椰菜(brassica oleracea.var.botrytis)是十字花科芸薹属甘蓝种中以花球为产品器官的一个变种，因其含有丰富的维生素c，矿物质及芥子油苷等营养物质，深受广大消费者的喜爱，是我国重要的蔬菜种类。近年来，我国花椰菜新品种选育科研机构联合种业公司，育成了一大批优秀的花椰菜品种，但是部分优势品种的制繁种产量严重不足，阻碍了其进一步示范和推广，已经成为影响我国花椰菜产业发展的瓶颈问题。
2、种子结实率是影响作物种子制繁种产量的关键因子。近年来，在模式作物水稻上，有关种子结实率的分子生物学研究取得重要进展，鉴定到了一批控制水稻穗结实率的关键基因，包括pollen tubeblocked 1(ptb1)，oscngc13，lowseed settingrate1(lssr1)等(liet al.,2013；xu et al.,2017；xiang et al.,2019)。在芸薹属作物中，“自交不亲和”特性被认为是影响种子结实率的重要因素(takasaki et al.,2000)。众多研究结果表明，花椰菜等芸薹属作物属于典型的孢子体自交不亲和类型，在遗传上由1个具有多个复等位基因的s位点控制，又称s单元型(nasrallah andnasrallah,1993)。只有父本的雄性决定因子(scr，丝氨酸/苏氨酸受体激酶)和母本的雌性决定因子(srk，富含半胱氨酸的蛋白)分属不同的s单元型，落在柱头上的花
3、因此，探究花椰菜中与种子结实率相关的基因位点，并开发与该位点紧密连锁的分子标记，可以高效、精准地鉴定花椰菜的种子结实率，提高花椰菜种子产量，为保障我国花椰菜品种的国际化优势地位提供重要的技术支撑。
4、参考文献：
5、1.li sc,li wenbo.,huang b.,cao xm,zhou xy,ye sm,li cb,gao fy.,zou t,xie kl,ren yun.,ai p,tang yf,li xm,deng qm,wang sq,zheng ap,zhu j,liu hn,wanglx,li p.2013.natural variation in ptb1 regulates rice seed setting rate bycontrolling pollen tube growth.nat commun,4,2793.doi:10.1038/ncomms3793。
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13、9.samuel ma,chongyt,haasen ke,aldea-brydges mg,stone sl.,goringdr.2009.cellular pathways regulating responses to compatible and self-incompatible pollen in brassica andarabidopsis stigmas intersect at e本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.与花椰菜种子结实率性状连锁的KASP标记的引物组，其特征在于，该引物组包含：正向引物FAM、正向引物HEX和反向引物；
2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述正向引物FAM的核苷酸序列的5'端增加核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的通用接头序列。
3.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述正向引物HEX的核苷酸序列的5'端增加核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的通用接头序列。
4.与花椰菜种子结实率性状连锁的KASP标记试剂盒，其特征在于，该试剂盒中的引物采用如权利要求1～3任意一项所述的引物组。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒中的PCR预混液的组分包含：通用的FRET cassette荧光引物、ROX内参染料、KlearTaqDNA聚合酶、dNTP和MgCl2。
6.如权利要求1～3任意一项所述的引物组或如权利要求4或5所述的试剂盒的应用，其特征在于，该应用选自以下任意一种：
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，采用如权利要求1～3任意一项所述的引物组
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述PCR的反应体系为：PCR预混液、如权利要求1～3任意一项所述的引物组和模板DNA。
9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述PCR的反应条件为：94℃预变性15min；94℃变性20s，61～55℃退火延伸60s，每个循环的退火温度降低0.6℃，共10个循环；94℃变性20s，55℃退火延伸60s，共26个循环。
...【技术特征摘要】
1.与花椰菜种子结实率性状连锁的kasp标记的引物组，其特征在于，该引物组包含：正向引物fam、正向引物hex和反向引物；
2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述正向引物fam的核苷酸序列的5'端增加核苷酸序列如seq id no.4所示的通用接头序列。
3.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述正向引物hex的核苷酸序列的5'端增加核苷酸序列如seq id no.5所示的通用接头序列。
4.与花椰菜种子结实率性状连锁的kasp标记试剂盒，其特征在于，该试剂盒中的引物采用如权利要求1～3任意一项所述的引物组。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒中的pcr预混液的组分包含：通用的fret cassette荧光引物、rox内参染料、kleartaqdn...
【专利技术属性】
技术研发人员：盛小光，虞慧芳，顾宏辉，沈钰森，王建升，宋蒙飞，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：
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