本发明专利技术提供了一种表告依春及其对映体Ｓ－告依春的制备方法，该方法包括：将（Ｒ，Ｓ）－告依春加溶剂制成溶液，采用高效液相色谱法进行手性分离，流动相为正己烷－异丙醇或正己烷－乙酸乙酯或正己烷－异丙醇－二乙胺或正己烷－乙酸乙酯－二乙胺，检测器为紫外检测器；收集流份，根据出峰顺序该流份分别为光学纯的表告依春和Ｓ－告依春；该方法简单、高效，分离度高，单体纯度高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术提供一种从(R，S)-告依春化合物中分离表告依春及其对映异构体化合物 的方法，即，一种表告依春及其对映体S-告依春的制备分离方法，尤其是表告依春及 其对 映体S-告依春的制备提纯方法。
技术介绍
表告依春(R-告依春)和S-告依春为含硫生物碱，互为对映异构体，均可由十字 花科植物中提取。专利技术专利申请200410016902. 0提供了从板蓝根中提取表告依春的方法 及其用途。但在采用200410016902. 0方法提取的表告依春，经更加权威和精密的手性分析 结果显示，实际上其为表告依春和S-告依春的混合物，并非该专利申请文本所披露的单一 物质表告依春。由于表告依春和S-告依春的活性具有较大差异，且目前还没有对(R，S)-告依春 或者板蓝根中提取的表告依春进行手性分离纯化的工艺。本领域迫切需要一种制备光学纯 的表告依春的方法以及对表告依春和S-告依春进行手性分离和分析的方法，目的是可以 得到表告依春及其对映体单体，使得到的单体可以直接用于各种含量测定。
技术实现思路
本专利技术经过大量的实验，研制出一种可以一次性成功地制备分析出表告依春及其 对映体的方法，该方法简单、高效，分离度高，单体纯度高。本专利技术目的在于提供一种提取分离出表告依春及其对映体的方法。本专利技术提供了一种表告依春及其对映体的制备方法，该对映体为S-告依春，其特 征在于，该方法其实是表告依春(印igoitrin)及其对映体S-告依春(goitrin)的手性分 离方法，该方法包括(1)、将(R，S)-告依春加溶剂，所述溶剂选自水、乙醇、甲醇、三氯甲烷、二氯甲烷、 丙酮、正己烷、二甲苯、吡啶、二甲基亚砜或其混合，制成(R，S)-告依春溶液；(2)、取上述(R，S)-告依春溶液，采用高效液相色谱法进行手性分离，该高效液相 色谱法的固定相为多糖衍生物类手性色谱柱，流动相为正己烷_异丙醇或正己烷_乙酸乙 酯或正己烷-异丙醇-二乙胺或正己烷-乙酸乙酯-二乙胺，检测器为紫外检测器；收集流 份，根据出峰顺序该流份分别为表告依春和S-告依春。需要指出的是流动相中是否有乙酸乙酯，两个化合物的出峰顺序不一样有乙 酸乙酯的流动相，S-告依春先出峰；无乙酸乙酯的流动相，表告依春先出峰。本专利技术的上述方法得到的表告依春及其对映体S-告依春经过分析测试为光学纯 的表告依春和S-告依春。本专利技术的制备分离方法中，步骤(1)流动相中以正己烷与异丙醇或正己烷与乙酸 乙酯为主要成分，二者体积比为90 5 90 40，S卩，以该二成分体积之和为100份做基 准，正己烷占60 95份，异丙醇或乙酸乙酯占5 40份；此外，为了峰形和谱图更加美观易读取相关信息等原因，还可以在上述二组分的基础上增加二乙胺，以该二主要成分体积 之和为100份做基准，二乙胺所占的体积比为0.05 0.2份。本专利技术流动相的组分比例均 为体积比。上述的制备分离方法，其中，步骤⑴中所述的(R，S)-告依春溶液的浓度在 0. lmg/ml 饱和溶液浓度之间，该饱和溶液浓度为(R，S)-告依春在所采用的溶剂中的饱 和浓度，一般可在0. 1 10mg/ml之间；例如，所采用的溶剂优选为二甲苯，制成(R，S)-告 依春的溶液的浓度一般约为5mg/ml。本专利技术的方法采用的液相色谱法的流动相优选为正己烷-乙酸乙酯-二乙胺；以 正己烷和乙酸乙酯的体积之和为100份做基准，所述的正己烷占60 90份，乙酸乙酯占 10 40份，正己烷和乙酸乙酯之和与二乙胺的比例为0.05 0.2 100。本专利技术的方法采用的液相色谱法的紫外检测器的检测波长为235 255nm，优选 为245nm左右。在本专利技术的具体实施例中，优选二甲苯作为溶剂。取(R，S)-告依春适量，加二甲 苯制成浓 度约为5mg/ml的溶液。本专利技术提供的(R，S)-告依春中表告依春及其对映异构体的制备分离方法，所述 的对映异构体为S-告依春，该方法包括1、取(R，S)-告依春适量，加溶剂制成溶液，该溶剂选自水、乙醇、甲醇、三氯甲烷、 二氯甲烷、丙酮、正己烷、二甲苯、吡啶、二甲基亚砜或以上溶剂的混合。该溶液的浓度可在 0. lmg/ml 饱和溶液之间调节，一般浓度为1 10mg/ml。2、取上述溶液，进样，用高效液相色谱进行手性分离，固定相采用多糖衍生物类手 性色谱柱，流动相采用正己烷_异丙醇或正己烷_乙酸乙酯或正己烷_异丙醇-二乙胺或 正己烷-乙酸乙酯-二乙胺，紫外检测器检测波长为245nm，根据出峰顺序分别收集表告依 春(R-告依春)和S-告依春的流份。在本专利技术的具体实施例中，优选CHIRALPAK IC色谱柱，流动相比例为正己烷-乙 酸乙酯-二乙胺(70 30 0. 2)，流速为10ml/min。3、分别将表告依春和S-告依春的流份低温减压回收溶剂至干，得光学纯的表告 依春和S-告依春。4、采用重量法计算表告依春和S-告依春产率，(R，S)-告依春投料量为400mg，经 拆分制得表告依春247. 3mg，产率为62% ；制得S-告依春191. 8mg，产率为48%。为了验证上述方法得到的产物将其定性定量以及更精确地测试其纯度，本专利技术对 上述方法得到的表告依春和S-告依春进行分析验证，具体分析方法为分别取表告依春和 S-告依春适量，加甲醇制成浓度为0. lmg/ml的溶液，采用高效液相色谱仪进行分析。固 定相采用多糖衍生物类手性分析色谱柱，流动相采用正己烷-异丙醇或者正己烷-异丙 醇_ 二乙胺体系，紫外检测器检测波长为245nm。采用Class-VP软件计算表告依春和S-告依春光学纯度，分别为99.0%和 98. 5%。采用峰面积归一化法计算表告依春和S-告依春化学纯度，分别为99%和91%。 另精密称取表告依春和S-告依春适量，分别加三氯甲烷制成浓度为3mg/ml左右的溶液，采 用数字式自动旋光仪测定旋光度，测得表告依春和S-告依春旋光度25D(c = 3，三氯甲 烷)分别为-53. 5和+47. 5。经过分析总结得出本专利技术中的上述制备分离方法可获得光学纯的表告依春 (epigoitrin)，实现将其与不具备抗病毒活性的S-告依春化合物分离的目的，该方法非常 适用于手性药物的开发。 在本专利技术的优选实施例中，制备分离表告依春和S-告依春的方法包括(1)、取(R，S)-告依春加溶剂制成浓度为1 10mg/ml的(R，S)-告依春溶液，该 溶剂选自水、乙醇、甲醇、三氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、正己烷、二甲苯、吡啶或二甲基亚砜；(2)、取上述(R，S)-告依春溶液，用高效液相色谱进行手性分离，该高效液相色 谱的固定相采用多糖衍生物类手性色谱柱，流动相采用体积比例为70 30 0.1的正己 烷-乙酸乙酯-二乙胺或正己烷_异丙醇-二乙胺，紫外检测器，检测波长为245nm，收集流 份，根据出峰顺序该流份分别为表告依春和S-告依春；(3)、分别将表告依春和S-告依春的流份回收溶剂至干，得光学纯的表告依春和 S-告依春。以下为本专利技术手性制备分离表告依春和S-告依春光学纯品的具体实施例1.仪器和试药岛津LC20液相色谱系统，SPD-20A检测器；正己烷、乙酸乙酯为分析纯，购于北京化学试剂公司；(R，S)-告依春来自中国药品生物制品检定所。2.色谱条件色谱柱CHIRALPAKI本文档来自技高网...
【技术保护点】
（Ｒ，Ｓ）－告依春中表告依春和Ｓ－告依春的制备分离方法，该方法包括： （１）、将（Ｒ，Ｓ）－告依春加溶剂，所述溶剂选自水、乙醇、甲醇、三氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、正己烷、二甲苯、吡啶、二甲基亚砜或其混合，制成（Ｒ，Ｓ）－告依春的溶液； （２）、取上述（Ｒ，Ｓ）－告依春的溶液，采用高效液相色谱法进行手性分离，所述的高效液相色谱法的固定相为多糖衍生物类手性色谱柱，流动相为体积比９０∶５～９０∶４０的正己烷－异丙醇或正己烷－乙酸乙酯，或正己烷－异丙醇－二乙胺，或正己烷－乙酸乙酯－二乙胺，检测器为紫外检测器；收集流份，即为表告依春和Ｓ－告依春。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：聂黎行，王钢力，林瑞超，
申请(专利权)人：中国药品生物制品检定所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。