本发明专利技术涉及一种采用液相色谱制备光学纯的告依春（Ｌ－ｇｏｉｔｒｉｎ）和表告依春（Ｄ－ｇｏｉｔｒｉｎ）的方法，该方法包括步骤：ａ．将ＤＬ－告依春（ＤＬ－ｇｏｉｔｒｉｎ）配成溶液；ｂ．采用基于多糖衍生物手性固定相色谱柱或者环糊精衍生物手性固定相色谱柱的液相色谱进行分离，并分别在线收集告依春和表告依春对应谱带的流份，重复操作，收集到所需量为止；ｃ．分别将步骤ｂ中收集到的告依春和表告依春对应谱带的洗脱液中的溶剂蒸干，即可得到光学纯的告依春和表告依春。还提供了一种告依春和表告依春的手性分离分析方法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及光学纯的告依春(L-goitrin)和表告依春(D-goitrin)的制备方法以及手性分离分析方法。
技术介绍
表告依春是一种生物碱，可从板蓝根中提取，具有抗流感病毒 的作用(中华人民共和国专利技术专利200410016902.0)。专利技术专利 200410016902.0提供了从板蓝根中提取表告依春的方法及其用途。 但是在表告依春(D-goitrin)的化学结构中存在一个手性中心，表告依 春(D-goitrin)存在手性异构体告依春(L-goitrin)。告依春(L-goitrin)又 称为甲状腺毒素，具有造成甲状腺肿大的作用(E. B. Astwood. Journal of Biological Chemistry, 1949, 181， 121)。采用专利技术专利 200410016902.0的方法，从板蓝根中提取的表告依春并未涉及其手 性结构，尽管专利中所附化学结构图显示为D型，但并未提供相关数 据。雷黎明和潘青平，时珍国医国药，2007， 18 (10)， 2578—2580 中报道了板蓝根中存在告依春和表告依春。Huang Qiao Shu， Planta Medica， 1981， 42(3), 308-310最早提供了从板蓝根中提取的表告依春的化学结构数据，报道其旋光值[a产D(c 1，甲醇)为19。 M. E. Daxenbichler, C. H. VanEtten和I. A.Wolff， Phytochemistry, 1968, 989， 7以及M. R. Altamura, L. Long, Jr禾卩T. Hasselstrom, Journal of Biological Chemistry. 1959, 234， 1847报道表告依春(D-goitrin, 印igoitrin)的旋光值为[a产D(c l,甲酌+70，告依春(L-goitrin)的旋光 值为[a产D(ci,甲醇)-70，说明从板蓝根中提取的表告依春(D-goitrin) 中可能同时含有其手性异构体告依春(L-goitrin)。用本专利技术中的手性分离分析方法能证实板蓝根以及从板蓝根中提取的表告依春 (D-goitrin)中同时含有表告依春(D-goitrin)和告依春(L-goitrin)，见 图1-图8。由于表告依春(D-goitrin)和告依春(L-goitrin)的生理作用具有较大差异，并且目前还没有对DL-告依春或者板蓝根中提取的表告依春 进行手性分离纯化的工艺。本领域迫切需要一种制备光学纯的表告依 春的方法以及对表告依春和告依春进行手性分离分析的方法。
技术实现思路
本专利技术提供了一种采用液相色谱制备光学纯的告依春(L-goitrin) 和表告依春(D-goitrin)的方法及其手性分离分析方法，该方法包括步 骤a.将DL-告依春(DL-goitrirO配成溶液，用基于多糖衍生物手性固定 相色谱柱分离时用水作溶剂，可在0.5mg/ml 饱和溶液浓度之间调 节，推荐5-10mg/ml;用基于环糊精衍生物手性固定相色谱柱分离时，用乙醇作溶剂。 一般将DL-告依春配成饱和溶液，具体实施时，可在 0.5mg/ml 饱和溶液浓度之间调节。推荐2mg/ml。b. 取DL-告依春(DL-goitrin)的溶液，用基于多糖衍生物手性固定相 色谱柱或者环糊精衍生物手性固定相色谱柱的液相色谱进行手性分 离，并分别在线收集告依春(L-goitrin)和表告依春(D-goitrin)对应谱带的流份，重复操作，收集到所需量为止；c. 分别将步骤b中收集到的告依春(L-goitrin)和表告依春(D-goitrin) 对应的谱带的洗脱液中的溶剂蒸干，即可得到光学纯的告依春 (L-goitrin)和表告依春(D-goitrin)。所述步骤c中的表告依春和告依春采可以用液相色谱进行手性 分离分析，液相色谱条件为CD-PH柱，SHISEIDO公司，25(T4.6mm; 流动相为正己烷一乙醇或异丙醇体系，体积比在90—10到50: 50 的范围内，柱温20—25°C，流速为1.0—1.5mL/min。或者采用高效液相色谱进行手性分离分析，液相色谱条件为色谱柱CHIRALPAKAD誦RH柱，Daicel Chemistry Industry, 150*4.6mm,流动相为甲醇一水体系，体积比分别为10:90到50:50，流速为1ml/min， 检测波长为244 nm，柱温为20—25°C 。用本专利技术中的方法可以对DL-告依春(DL-goitrin降行手性分离， 并制备光学纯的告依春(L-goitrin)和表告依春(D-goitrin)。表告依春 具有抗流感病毒作用，目前采用从板蓝根等植物中提取的方法生产的 表告依春实际上是告依春(L-goitrin)和表告依春(D-goitrin)的混合 物(质量比约为9: 11)，而告依春(L-goitrin)具有较强的甲状腺毒性，用本专利技术的方法可以除去告依春(L-goitrin)和表告依春(D-goitrin) 的混合物中的告依春，获得光学纯的表告依春(D-goitrin),用于手性 药物的开发。附图说明图1. DL-告依春高效液相色谱图以及紫外吸收光谱图高效液相色谱条件色谱柱为lnersil ODS短柱(GL Science lnc， 3CT4.6mm)串连CHIRALPAK AD誦RH(Daicel Chemistry Industry , 150M.5mm);流动相为甲醇一水(30/70, v/v);流速为1ml/min; 紫外检测波长为244nm 。 图2.表告依春对照品高效液相色谱图以及紫外吸收光谱图 表告依春对照品由中国药品生物制品检定所提供； 高效液相色谱条件色谱柱为lnersil ODS短柱(GL Science lnc， 3CT4.6mm)串连CHIRALPAK AD-RH(Daicel Chemistry Industry ， 150*4.5mm);流动相为甲醇一水(30/70， v/v);流速为1ml/min; 紫外检测波长为244nm 。 图3.板蓝根颗粒提取液高效液相色谱图以及紫外吸收光谱图高效液相色谱条件色谱柱为lnersil ODS短柱(GL Science lnc， 3CT4.6mm)串连CHIRALPAK AD匿RH(Daicel Chemistry Industry , 150M.5mm);流动相为甲醇一水(30〃0, v/v);流速为1ml/min; 紫外检测波长为244nm 。 图4.板蓝根煎液的高效液相色谱图以及紫外吸收光谱图板蓝根煎液制备方法称取板蓝根药材12.1 g放入砂锅中，加入300 ml水，浸泡30min后，大火煮沸2min后，再用小火煎煮30分钟，冷却，倒出上清液。向砂锅中再加入300ml水，重复以上操作，合并两次煎液,共250ml。分析时，取1 ml煎液放入样品管中，在6000 r/min转速下离心5 min (离心力约为4400xg),取上清液进样；高效液相色谱条件色谱柱为lnersil ODS短柱(GL Science lnc，3CT4.6mm)串连CHIRALPAK AD-RH(Daicel Chemistry Industry本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种采用液相色谱手性拆分ＤＬ－告依春制备光学纯的告依春和表告依春的方法，其特征在于该方法包括： ａ．将ＤＬ－告依春配成水或乙醇的０．５ｍｇ／ｍｌ～饱和溶液浓度溶液； ｂ．取上述ＤＬ－告依春溶液进样，用液相色谱进行手性分离，并分别 在线收集告依春和表告依春对应谱带的流份；所述的色谱柱是多糖衍生物手性固定相色谱柱或者环糊精衍生物手性固定相色谱柱；采用环糊精衍生物手性固定相色谱柱时，流动相采用正己烷－乙醇体系，体积比在９０∶１０到５０∶５０的范围内；采用多糖衍生物手性固定相色谱柱时，流动相采用甲醇－水体系，体积比在１０∶９０到５０∶５０的范围内； ｃ．分别将步骤ｂ中收集到的告依春和表告依春对应的谱带的洗脱液中的溶剂蒸干，即可得到光学纯的告依春和表告依春。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：许旭，马东杰，
申请(专利权)人：中国科学院上海有机化学研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。