一种β-葡萄糖苷酶突变体及其应用制造技术

技术编号:40416566 阅读:17 留言:0更新日期:2024-02-20 22:34
本发明专利技术公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体及其应用,β‑葡萄糖苷酶突变体GBAm2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,DNA序列如SEQ ID NO.3所示,与野生型相比,GBAm2在45 <supgt;o</supgt;C,pH 9.0下的比活力(U/mg)由97.8升高到115.3,Km(mM)由42.6降低到40.5,Kcat x 10<supgt;3</supgt;(min<supgt;‑1</supgt;)由10.5变为11.6。最适反应温度由55℃提高到了60‑65℃,50℃下的半衰期提高了30倍,达到了350 min;催化京尼平苷生产京尼平后,反应液不变蓝色。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶工程,具体涉及一种β-葡萄糖苷酶突变体及其应用


技术介绍

1、β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,gba,ec 3.2.1.21)催化末端非还原性β-d-葡萄糖基残基的水解并释放β-d-葡萄糖,该反应无需任何辅酶、辅因子或金属离子的参与。β-葡萄糖苷酶可以水解各种糖苷、低聚糖和纤维素,皆为由β-1,4-连接的葡萄糖残基组成的聚合物。β-葡萄糖苷酶广泛存在于各种原核生物和真核生物中,对于许多生物体的代谢过程至关重要。该反应在体内的功能是在生物质水解过程中去除二糖纤维二糖中的残留物以产生葡萄糖。由于β-葡萄糖苷酶具有较为宽泛的底物谱,其在工程上有多种应用,包括催化水解纤维素和淀粉;去除果蔬汁和葡萄酒的苦味成分;预处理棉花,提高紧密纺纱质量;还可以催化环烯醚萜苷生产环烯醚萜。

2、环烯醚萜(iridoid)是一类天然存在的类固醇衍生物。主要的环烯醚萜类化合物包括:州烯醚类、吲哚烯类、孚喹啉类、并苯啉类、睾酮类、醇醚类、黄酮羧基醚类、丁香醚类、会吕烯类、烯醇类、亚脲类、麝香烯类、马奇尼酮类、異戊烯醚类、木质素类和茄草素、种蒿醚本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种β-葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,β-葡萄糖苷酶突变体GBAm2是在如SEQ IDNO. 1所示氨基酸序列的第2到第21位氨基酸残基的敲除的基础上,将第31、78、100、130、169、191、265、314、330、360、381、441、504上的赖氨酸替换为组氨酸,以及将第41、99、176、223、259、284、296、386、454、509位上的精氨酸也替换为组氨酸后获得,β-葡萄糖苷酶突变体GBAm2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.如权利要求1所述的一种β-葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,β-葡萄糖苷酶突变体GBAm2的DNA序列如SEQ...

【技术特征摘要】

1.一种β-葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,β-葡萄糖苷酶突变体gbam2是在如seq idno. 1所示氨基酸序列的第2到第21位氨基酸残基的敲除的基础上,将第31、78、100、130、169、191、265、314、330、360、381、441、504上的赖氨酸替换为组氨酸,以及将第41、99、176、223、259、284、296、386、454...

【专利技术属性】
技术研发人员:乔沛许文灏
申请(专利权)人:浙江工业大学
类型:发明
国别省市:

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