【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及pha生产领域，具体涉及一种生产pha的方法。
技术介绍
1、聚羟基链烷酸酯(pha)是生物塑料(可生物降解聚合物)之一，由于可再生资源对环境兼容材料的需求不断增加，这种塑料引起了极大的关注。pha与传统的石油基塑料相比，pha的生物降解性和结构多样性开辟了更广泛的应用场景，例如包装材料，医学领域(心脏瓣膜、缝合线等)。pha可以由微生物合成，然而，pha作为微生物的胞内产物，无法排出体外，这使得利用微生物生产pha必须采用高密度发酵，通过提高菌体量以实现pha产量的提高。目前利用微生物生产pha过程中遇到了各种困难，包括昂贵的生长条件，巨大的能源需求，大量的淡水消耗和复杂的提取过程，导致其高成本和低产量，无法扩大规模。
2、一些研究人员还专注于通过形态工程增加细胞体积以提高pha生产力。当前基于不同菌株不同底物发酵生产pha的生产强度参差不齐，其中嗜盐菌体系的稳定发酵产量整体处于72-78g/l水平。其中碳源氮源的组合优化及昂贵有机氮源的使用，在一定程度上提升了发酵产量。有报道显示，限制氮源虽然对pha积累有着正向作用，但是氮源的匮乏极大的影响细胞的生长，使得细胞生长指数期缩短，这让限制氮源的培养方式很难实现高pha含量和高细胞干重并存。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的pha生产过程中菌体密度低和pha产量低的问题，提供一种生产pha的方法，该方法能够显著提高pha含量和菌体生物量。
2、为了实现上述目的，本专利技
3、其中，所述发酵培养基中的氮源为有机氮源，所述补料培养基中的氮源为无机氮源。
4、优选地，所述有机氮源为尿素。
5、优选地，所述补料的方式为两阶段补料，其中，使用第一补料培养基进行第一补料，然后使用第二补料培养基进行第二补料。
6、优选地，所述第一补料培养基的碳氮比为5-25：1，第一补料培养基的补充量为发酵培养基的5-20体积％。
7、优选地，所述第二补料培养基的碳氮比为35-55：1。
8、在本专利技术中，以有机氮源为发酵培养基的氮源，无机氮源为补料过程中的氮源，能够显著提高菌体数量，并获得更高的pha含量。
9、在发酵过程中所有培养基采用优选的氮源，并且对发酵过程中的补料进行合理的过程控制，能够进一步提高菌体密度和pha产量，同时还能减少pha分离过程中污水处理量。
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1.一种生产PHA的方法，其特征在于，该方法包括在能够发酵产PHA的条件下，将PHA发酵菌种接种至发酵培养基中进行发酵，并在发酵过程中使用补料培养基补料；
2.根据权利要求1所述的方法，其中，PHA发酵菌种为嗜盐单胞菌(Halomonas sp.)；
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述发酵培养基含有碳源、有机氮源、磷酸盐、镁盐和钠盐；和/或
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述发酵培养基中的碳氮比为5-10:1；
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中，所述发酵的条件包括：温度为32-40℃，pH值为7.5-9，溶氧量为1-40％；和/或
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其中，所述补料的起始时机为嗜盐单胞菌生长到达对数期；和/或
7.根据权利要求1-6中任意一项所述的方法，其中，所述补料的方式为两阶段补料，其中，使用第一补料培养基进行第一补料，然后使用第二补料培养基进行第二补料；
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述第二补料培养基的碳氮比为35
9.根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中，所述发酵为连续式发酵或间歇式发酵。
10.根据权利要求1-9中任意一项所述的方法，其中，该方法还包括：当补料结束后，所述发酵培养基中的残糖量低于2g/L时，结束发酵。
...【技术特征摘要】
1.一种生产pha的方法，其特征在于，该方法包括在能够发酵产pha的条件下，将pha发酵菌种接种至发酵培养基中进行发酵，并在发酵过程中使用补料培养基补料；
2.根据权利要求1所述的方法，其中，pha发酵菌种为嗜盐单胞菌(halomonas sp.)；
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述发酵培养基含有碳源、有机氮源、磷酸盐、镁盐和钠盐；和/或
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述发酵培养基中的碳氮比为5-10:1；
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中，所述发酵的条件包括：温度为32-40℃，ph值为7.5-9，溶氧量为1-40％；...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘海军，姚福伟，周卫强，袁恺，唐堂，汤维涛，李方亮，彭超，李凡，罗虎，李义，
申请(专利权)人：中粮生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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