【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种软骨细胞结构体的制造方法。特别是，本专利技术涉及使用3d生物打印机并制造软骨细胞结构体的方法。
技术介绍
1、就由人类的人工多能干细胞(ips细胞)制备软骨的研究而言，从以往就进行着，确定了：由人类ips细胞来源的软骨细胞不使用支架材料并制备软骨组织的培养方法(yamashita a.et al.，stem cell reports，2015(非专利文献1))；由ips细胞诱导体节、硬节的方法(matsuda s.et al.，nature，2020(非专利文献2))；由增殖软骨细胞诱导肥大软骨细胞的方法(pretemer y.et al.，stem cell reports，2021(非专利文献3))等。
2、就由此制备的软骨细胞而言，由于以高剂量产生细胞外基质，因此可以成为临床上可以应用的工具。
3、现有技术文献
4、非专利文献
5、非专利文献1：yamashita a.et al.，stem cell reports，2015
6、非专利文献2：matsuda s.et al.，nature，2020
7、非专利文献3：pretemer y.et al.，stem cell reports，2021
技术实现思路
1、专利技术所解决的技术问题
2、然而，为了进一步地发现从ips细胞分化诱导得到的软骨细胞的临床的有用性，面向软骨组织的软骨细胞的立体化成为问题。
3、
4、本专利技术人为了解决所述问题进行了深入研究后的结果为，通过使用向软骨细胞的分化诱导培养基培养从ips细胞诱导得到的间充质干细胞、特别是从ips细胞诱导得到的间充质干细胞来形成细胞凝聚体(球状体(spheroid))，从使用了所述分化诱导培养基的培养开始起在给定时期将所述细胞凝聚体叠层并立体化，从而成功地得到了具有较高的功能性的软骨细胞的立体结构体，完成了本专利技术。
5、即，本专利技术如下所述。
6、(1)一种软骨细胞的立体结构体的制造方法，其中，
7、将通过使用向软骨细胞的分化诱导培养基培养间充质干细胞而得到的细胞凝聚体，在所述培养开始后第9天或第10天进行叠层。
8、(2)根据(1)所述的方法，其中，
9、间充质干细胞来源于多能干细胞。
10、(3)根据(2)所述的方法，其中，
11、多能干细胞为人工多能干细胞。
12、(4)根据(1)～(3)中任一项所述的方法，其中，
13、分化诱导培养基包含血小板来源的生长因子。
14、(5)根据(1)～(4)中任一项所述的方法，其中，
15、从培养开始后第6天起在转化生长因子的存在下进行培养。
16、(6)一种软骨组织的制造方法，其中，
17、将通过(1)～(5)中任一项所述的方法而制造得到的立体结构体进一步在骨形成蛋白质的存在下进行培养。
18、(7)一种软骨细胞的立体结构体，其是使通过使用向软骨细胞的分化诱导培养基培养间充质干细胞而得到的细胞凝聚体在所述培养开始后第9天或第10天叠层而成的。
19、(8)一种软骨组织，其是将(7)所述的立体结构体进一步在骨形成蛋白质的存在下进行培养而成的软骨组织。
20、专利技术的效果
21、通过本专利技术，向软骨的分化充分进行，并且可以进行分泌细胞外基质的软骨细胞的立体结构体的制造。通过进一步使用生物反应器在骨形成蛋白质的存在下对所述立体结构体进行培养，可以得到软骨组织。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种软骨细胞的立体结构体的制造方法，其中，
2.根据权利要求1所述的方法，其中，
3.根据权利要求2所述的方法，其中，
4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，
5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其中，
6.一种软骨组织的制造方法，其中，
7.一种软骨细胞的立体结构体，其是使通过使用向软骨细胞的分化诱导培养基培养间充质干细胞而得到的细胞凝聚体在所述培养开始后第9天或第10天叠层而成的。
8.一种软骨组织，其是将权利要求7所述的立体结构体进一步在骨形成蛋白质的存在下进行培养而成的软骨组织。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种软骨细胞的立体结构体的制造方法，其中，
2.根据权利要求1所述的方法，其中，
3.根据权利要求2所述的方法，其中，
4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，
5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其中，
6.一种软骨组...
【专利技术属性】
技术研发人员：中山功一，安娜·玛利亚·中村，
申请(专利权)人：国立大学法人佐贺大学，
类型：发明
国别省市：
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