以ＩＣＡＭ－１为检测指标的胎膜早破快速检测工具与检测盒制造技术

以ＩＣＡＭ－１为检测指标的胎膜早破快速检测工具，包括衬片、吸水垫、硝酸纤维素膜、金标垫和样品垫，所述吸水垫、硝酸纤维素膜、金标垫和样品垫由上至下依次相接粘贴在衬片上，且金标垫被样品垫部分覆盖；硝酸纤维素膜上设置有由羊抗人细胞间黏附分子－１多克隆抗体包被形成的检测线和由羊抗鼠免疫球蛋白Ｇ多克隆抗体包被形成的控制线，检测线位于控制线之下且它们之间相隔有间距；金标垫为包被有金标鼠抗人细胞间黏附分子－１单克隆抗体结合物的吸水纤维。以细胞间黏附分子－１为检测指标的胎膜早破快速检测盒，由盒体和装入盒体内的上述检测工具构成。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术属于医用检测工具，特别涉及一种检测妊娠期妇女胎膜早破 (PrematureRupture of Fetal Membrane，简称 PROM)的检测工具。
技术介绍
胎膜破裂(Rupture of Fetal Membrane，简称ROM)可能在孕期随时发生，在临产 前发生的胎膜破裂称为胎膜早破(PR0M)。足月后(37孕周)PROM发生率约为10%;足月前 (37孕周前)PROM的发生率为2-3.5%。胎膜早破是引起产科病人产前、产后并发症的主要 因素，是导致胎儿早产和新生儿必须入住重症监护室的主要原因。由于医务人员不得不在 延长孕周与宫内及孕妇感染的风险和胎儿肺发育问题之间求平衡，因而对胎膜早破患者的 管理成本高、难度大，准确及时诊断孕妇是否发生胎膜早破至关重要。现有技术中，采用金标准是诊断胎膜早破的一种准确方法，即在孕妇羊膜腔内注 入染料(如美蓝)，若阴道内有被染料着色的液体流出即可诊断为胎膜早破，但采用金标 准检测临床很难操作，并且造成患者的痛苦，故临床很少使用。临床上通常采用询问病史、 患者自诉阴道有羊水流出、阴道分泌物PH值变为偏碱性(正常阴道分泌物pH值为4. 5 5. 5)、显微镜下查见阴道分泌物涂片中出现羊水结晶等方法，这些方法虽然操作简单，但准 确性、敏感性均较低。细胞间黏附分子-1(Intercellular Adhesion Molecule 1，简称 ICAM-1，说明书 下文中以“ICAM-1”表示细胞间黏附分子-1)属于黏附分子的免疫球蛋白超家族，是分子 量76kD 114kD的单链糖蛋白。ICAM-I广泛表达在机体的血管内皮细胞、胸腺上皮细胞 和其他种类的上皮细胞等非血源性细胞的表面，T淋巴细胞、B淋巴细胞和树突状细胞等血 源性细胞的表面，以及成纤维细胞的表面，与淋巴细胞的浸润有关。虽然在妊娠晚期(孕周 28-40)，受胎膜和羊水中的单核细胞上ICAM-I的表达和中性粒细胞活化的影响，妊娠妇女 的羊水中ICAM-I水平升高，但目前尚未发现以ICAM-I为检测指标的胎膜早破检测工具的 报道。
技术实现思路
本技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种以ICAM-I为检测指标的 胎膜早破快速检测工具与检测盒，以实现无创检测，且能快速获得检测结果。本专利申请的专利技术人通过实验发现=ICAM-I是妊娠晚期出现在羊水中的主要蛋 白质之一，含量为13. 08士6. llng/mL。胎膜早破时将有羊水从羊膜腔中渗漏至阴道，羊水中 的ICAM-I则会出现在阴道分泌物/宫颈粘液(Cervical-Vaginal Fluid,CVF)中。蛋白芯 片筛选实验发现确诊的PROM产妇与确诊的非PROM产妇相比(两组产妇的年龄与妊娠周 龄匹配，无基础疾病，无妊娠合并症)，阴道分泌物/宫颈黏液样本中ICAM-I的浓度具有明 显差异。因此，可将ICAM-I作为胎膜早破的检测指标。本技术所述以ICAM-I为检测指标的胎膜早破快速检测工具包括衬片、吸水垫、硝酸纤维素膜、金标垫和样品垫，所述吸水垫、硝酸纤维素膜、金标垫和样品垫由上至下 依次相接粘贴在衬片上，且金标垫被样品垫部分覆盖；硝酸纤维素膜上设置有由羊抗人细 胞间黏附分子_1(羊抗人ICAM-1)多克隆抗体包被形成的检测线和由羊抗鼠免疫球蛋白 G(羊抗鼠IgG，Immunoglobulin G，IgG)多克隆抗体包被形成的控制线，检测线位于控制线 之下且它们之间相隔有间距；金标垫为包被有金标鼠抗人细胞间黏附分子-ι单克隆抗体 结合物的吸水纤维。本技术所述以ICAM-I为检测指标的胎膜早破快速检测盒，由盒体和装入盒 体内的上述检测工具构成；所述盒体的内腔与检测工具的形状和尺寸相匹配，所述盒体的 顶壁设置有检测工具插入孔，侧壁设置有加样孔和观察孔，所述加样孔的设置位置与检测 工具装入盒体后其样品垫的位置相对应，所述观察孔的设置位置与检测工具装入盒体后其 检测线和控制线的位置相对应。上述检测工具中，所述检测线和控制线的宽度优选0. 8mm Imm ；所述检测线与控 制线之间的间距优选IOmm 12mm。检测工具的形状无严格要求，从节约成本、方便制作的 角度考虑，其形状优选矩形条。所述吸水垫是由吸水纸制作的垫体，样品垫是由吸水纤维制 作的垫体，即为吸水纤维垫。使用本技术所述检测工具和检测盒，控制线上可见一条清晰的紫红色线，证 明试纸条有效；当检测线上可见一条清晰的紫红色线，此结果判定为阳性(即发生胎膜早 破)；若检测线上没有色线出现，则判定为阴性(即未发生胎膜早破)。本技术所述检测工具和检测盒具有以下有益效果1、本技术为胎膜早破的检测提供了一种采用新检测指标的检测工具。2、使用本技术所述检测盒对确诊胎膜破裂组和确诊胎膜未破组妊娠妇女进 行采样检测，检测结果表明该检测盒的敏感性为96%左右，特异性为91%左右。3、使用本技术所述检测盒，操作简单，检测一个样品仅需10-15分钟，与临床 上通常的现有检测方法相比，检测速度大幅度提高。4、由于检测样品是妊娠妇女的阴道分泌物，因而是一种无创检测。5、本技术所述检测工具和检测盒结构简单，易于加工制作，生产成本低，便于 工业化生产。本技术所述检测工具和检测盒适用于所有妊娠期妇女，尤其是存在早产风 险、腹部受到损伤的妊娠期妇女。附图说明图1是本技术所述以ICAM-I为检测指标的胎膜早破快速检测工具的一种结 构示意图；图2是图1的左视图；图3是本技术所述以ICAM-I为检测指标的胎膜早破快速检测盒盒体的一种 结构示意图；图4是图3的俯视图；图5是图3的A-A剖视图；图6是本技术所述以ICAM-I为检测指标的胎膜早破快速检测盒的一种结构示意图。图中，1-衬片、2-吸水垫、3-控制线、4-检测线、5-硝酸纤维素膜、6-金标垫、7-样 品垫、8-盒体、9-观察孔、10-加样孔、11-检测工具插入孔、12-检测工具、13-待测样品中 的 ICAM-1。具体实施方式以下结合附图对本技术所述以ICAM-I为检测指标的胎膜早破快速检测工具 与检测盒的结构、制作方法和使用方法做进一步说明。实施例1本实施例中，以ICAM-I为检测指标的胎膜早破快速检测工具如图1、图2所示，其 形状为矩形条，其构造包括衬片1、吸水垫2、硝酸纤维素膜5、金标垫6和样品垫7，所述吸 水垫、硝酸纤维素膜、金标垫和样品垫由上至下依次相接粘贴在衬片上，且金标垫被样品垫 部分覆盖。衬片1由医用塑料高白度PVC片材制作，上面涂布压敏胶，对生物活性分子具有 惰性；吸水垫2由吸水纸制作；硝酸纤维素膜5上设置有由羊抗人ICAM-I多克隆抗体包被 形成的检测线4和由羊抗鼠IgG多克隆抗体包被形成的控制线3，检测线4位于控制线3之 下，它们的宽度均为Imm(或0.8mm或0.9mm)，它们之间的间距为IOmm(或Ilmm或12mm)； 金标垫6为包被有金标鼠抗人ICAM-I单克隆抗体结合物的玻璃纤维膜或聚酯纤维膜；样品 垫是由玻璃纤维膜或聚酯纤维膜制作的垫体。本实施例中，以ICAM-I为检测指标的胎膜早破快速检测工具的制作方法如下1、检测线、控制线的包被羊抗人ICAM-I多克隆抗体(购自R&D公司)和本文档来自技高网...

【技术保护点】
以细胞间黏附分子－１为检测指标的胎膜早破快速检测工具，其特征在于包括衬片（１）、吸水垫（２）、硝酸纤维素膜（５）、金标垫（６）和样品垫（７），所述吸水垫、硝酸纤维素膜、金标垫和样品垫由上至下依次相接粘贴在衬片上，且金标垫被样品垫部分覆盖；硝酸纤维素膜（５）上设置有由羊抗人细胞间黏附分子－１多克隆抗体包被形成的检测线（４）和由羊抗鼠免疫球蛋白Ｇ多克隆抗体包被形成的控制线（３），检测线位于控制线之下且它们之间相隔有间距；金标垫（６）为包被有金标鼠抗人细胞间黏附分子－１单克隆抗体结合物的吸水纤维。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡怀忠，关祥乾，向洪发，周容，
申请(专利权)人：成都创宜生物科技有限公司，
类型：实用新型
国别省市：90[中国|成都]