【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及核酸适配体as1411修饰的dna四面体-维罗非尼复合物及其制备方法和用途。
技术介绍
1、恶性黑色素瘤(malignant melanoma)是由皮肤或黏膜中的黑色素细胞突变而形成的恶性肿瘤。由于其侵袭性强、复发率高，恶性黑色素瘤是全世界最致命的肿瘤之一。目前，每年大约有30万新发黑色素瘤患者，且发病率仍在不断升高。早期的黑色素瘤若得到及时的手术治疗，往往能够治愈；而晚期黑色素瘤主要通过放疗、化疗和免疫治疗来抑制肿瘤生长。然而，由于耐药或免疫耐受的频繁发生，预后往往不佳。此外，这些疗法会对正常的组织器官造成极大损伤。鉴于存在极大刺激黑色素瘤生长的突变基因，科学家们致力于研究新型化疗药物，通过靶向和抑制这些基因的表达，从而提高治疗效果，减小毒副反应。braf基因在丝裂原活化蛋白激酶(mapk)信号通路中起着关键作用。据报道，大部分黑色素瘤中都存在braf基因突变，braf突变会加速肿瘤的生长和转移。维罗非尼(vemurafenib)是一种braf v600e(最常见的braf突变类型)的小分子抑制剂(cas号：918504-65-1)，可以明显改善晚期黑色素瘤患者的无进展生存期。然而，由于维罗非尼一般通过口服或静脉给药，缺乏靶向性，这样的给药方式可能会引起肾脏或肝脏损害。考虑到黑色素瘤主要位于皮肤或黏膜表面，因此，维罗非尼若能通过透皮给药，这将具有良好的应用前景。
2、
3、为了实现药物的透皮给药，人们进行了各种尝试，如电穿孔、微针、化学改性等，但这些方法很可能会造成感染或
4、但是由于tfna的结构特殊，且具有一定活性，因此其与小分子药物结合后两者相互作用如何，是发挥协同作用还是拮抗作用，这是未知的，不同小分子药物效果可能会出现较大的不同。目前尚未见tfna与维罗非尼复合载药的现有技术，tfna能否成功结合维罗非尼，使其发挥更好的效果需要进一步研究。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供核酸适配体as1411修饰的dna四面体-维罗非尼复合物及其制备方法和用途。
2、本专利技术提供了一种核酸适配体as1411修饰的dna四面体-维罗非尼复合物，它是由核酸适配体as1411修饰的dna四面体与维罗非尼为原料制备得到的复合物。
3、进一步地，所述核酸适配体as1411修饰的dna四面体与维罗非尼的摩尔比为1:5～50。
4、进一步地，所述核酸适配体as1411修饰的dna四面体与维罗非尼的摩尔比为1:10～50；
5、优选地，所述核酸适配体as1411修饰的dna四面体与维罗非尼的摩尔比为1:20～50；
6、更优选地，所述核酸适配体as1411修饰的dna四面体与维罗非尼的摩尔比为1:50。
7、进一步地，所述核酸适配体as1411修饰的dna四面体由四条dna单链自组装合成；所述四条dna单链的序列分别如seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3、和seq id no.5所示。
8、进一步地，所述四面体框架核酸的合成方法包括以下步骤：将四条dna单链加入到tm缓冲液中，95℃维持10min，4℃维持20min以上，即得。
9、进一步地，所述四条dna单链为等摩尔比的四条dna单链。
10、本专利技术还提供了一种制备前述的dna四面体-维罗非尼复合物的方法，它包括如下步骤：
11、将核酸适配体as1411修饰的dna四面体和-维罗非尼加入溶剂中混合反应，超滤，即得；
12、优选地，所述溶剂为pbs、dmso中的一种或多种；
13、和/或，所述核酸适配体as1411修饰的dna四面体的浓度为1～10μm；
14、和/或，所述反应的温度为20～30℃；
15、和/或，所述反应的时间为4～6h；
16、和/或，所述超滤使用30kda分子量膜。
17、本专利技术还提供了前述的dna四面体-维罗非尼复合物在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的用途；
18、优选地，所述肿瘤为黑色素瘤。
19、进一步地，所述药物为经皮给药的药物。
20、本专利技术还提供了一种预防和/或治疗肿瘤的药物，它是以前述的dna四面体-维罗非尼复合物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂；
21、优选地，所述肿瘤为黑色素瘤；
22、更优选地，所述制剂为经皮给药的制剂。
23、与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
24、(1)首次构建了一种新型纳米药物系统as1411-tfnas/vemurafenib，其中vemurafenib通过静电作用与tfnas相互结合。
25、(2)在as1411-tfnas/vemurafenib纳米载药系统中，as1411可以提高tfnas/vemurafenib的入胞能力，从而增强体系对a375细胞的杀伤。
26、(3)as1411-tfnas/vemurafenib通过抑制braf，进而阻断mapk信号通路，实现对黑色素瘤的杀伤。
27、(4)as1411-tfnas/vemurafenib能够成功穿透皮肤屏障，渗入皮下肿瘤组织中，抑制黑色素瘤的生长。
28、(5)as1411-tfnas/vemurafenib治疗在体外体内实验中均未表现出明显的毒性作用。
29、综上，本专利技术提供了一种as1411-tfnas/维罗非尼复合物，这是一种新型纳米药物系统。本专利技术as1411-tfnas/维罗非尼复合物能够克服维罗非尼溶解性差，药物毒性高的缺点，可以将药物维罗非尼经皮递送至肿瘤区域，提高维罗非尼被黑色素瘤的摄取效率，提高对黑色素瘤生长的抑制效果，进而提高对黑色素瘤的治疗作用，发挥了协同增效作用。同时，本专利技术as1411-tfnas/维罗非尼复合物在实现经皮治疗恶性黑色素瘤的同时，安全性高，可极大地减轻化疗药物带来的毒副作用。本专利技术为恶性黑色素瘤的治疗提供新策略，并开辟了dna纳米结构透皮递送的新思路。
30、显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体-维罗非尼复合物，其特征在于：它是由核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体与维罗非尼为原料制备得到的复合物。
2.根据权利要求1所述的DNA四面体-维罗非尼复合物，其特征在于：所述核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体与维罗非尼的摩尔比为1:5～50。
3.根据权利要求2所述的DNA四面体-维罗非尼复合物，其特征在于：所述核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体与维罗非尼的摩尔比为1:10～50；
4.根据权利要求1～3任一项所述的DNA四面体-维罗非尼复合物，其特征在于：所述核酸适配体AS1411修饰的DNA四面体由四条DNA单链自组装合成；所述四条DNA单链的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、和SEQ ID NO.5所示。
5.根据权利要求4所述的DNA四面体-维罗非尼复合物，其特征在于：所述四面体框架核酸的合成方法包括以下步骤：将四条DNA单链加入到TM缓冲液中，95℃维持10min，4℃维持20min以上，即得。
7.一种制备权利要求1～6任一项所述的DNA四面体-维罗非尼复合物的方法，其特征在于：它包括如下步骤：
8.权利要求1～6任一项所述的DNA四面体-维罗非尼复合物在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的用途；
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述药物为经皮给药的药物。
10.一种预防和/或治疗肿瘤的药物，其特征在于：它是以权利要求1～6任一项所述的DNA四面体-维罗非尼复合物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂；
...【技术特征摘要】
1.一种核酸适配体as1411修饰的dna四面体-维罗非尼复合物，其特征在于：它是由核酸适配体as1411修饰的dna四面体与维罗非尼为原料制备得到的复合物。
2.根据权利要求1所述的dna四面体-维罗非尼复合物，其特征在于：所述核酸适配体as1411修饰的dna四面体与维罗非尼的摩尔比为1:5～50。
3.根据权利要求2所述的dna四面体-维罗非尼复合物，其特征在于：所述核酸适配体as1411修饰的dna四面体与维罗非尼的摩尔比为1:10～50；
4.根据权利要求1～3任一项所述的dna四面体-维罗非尼复合物，其特征在于：所述核酸适配体as1411修饰的dna四面体由四条dna单链自组装合成；所述四条dna单链的序列分别如seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3、和seq id no.5所示。
5.根据权利要求...
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