增强表达安丝菌素体内靶标蛋白APASM_6307的高产安丝菌素方法技术

本发明专利技术公开了一种增强表达安丝菌素体内靶标蛋白APASM_6307的高产安丝菌素方法。通过在珍贵束丝放线菌ATCC 31280中，利用强启动子kasOp*分别增强表达安丝菌素体内靶标蛋白APASM_6307，得到高产安丝菌素的突变株HQG‑04。与出发菌株相比，本发明专利技术所得到的高产菌株HQG‑04发酵产量提高了93.5％，实验室摇瓶发酵水平达到89mg/L。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是申请号为2021112239259，专利技术名称为增强安丝菌素体内靶标蛋白基因表达的高产安丝菌素方法的中国专利技术专利申请的分案申请。本专利技术属于生物医药，涉及一种增强表达安丝菌素体内靶标蛋白apasm_6307的高产安丝菌素方法；尤其涉及一种增强安丝菌素体内靶标蛋白apasm_6307基因的转录水平以提高安丝菌素发酵水平的方法；通过在珍贵束丝放线菌atcc 31280中利用强启动子kasop*增强表达内源的安丝菌素体内靶标蛋白基因apasm_6307，可以提高珍贵束丝放线菌的生物量，降低其胞内毒性，解除相关合成酶的反馈抑制，最终可明显提高安丝菌素产量。

技术介绍

1、安丝菌素是由珍贵束丝放线菌(actinosynnema pretiosum)产生的一种大环内酰胺类抗生素，它能够与微管蛋白的β亚基结合，阻碍微管组装，从而抑制肿瘤细胞分裂。来自immunogen，inc.公司的chari等人通过在c-3位酯链上连接二硫键形成dm1分子，经dtt还原后可与不同的抗体连接形成抗体-药物偶联物(adc)。目前，衍生于安丝菌素的多种adc药物已经进入不本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高安丝菌素发酵水平的方法，其特征在于，在珍贵束丝放线菌(Actinosynnema pretiosum)中增强表达安丝菌素体内靶标蛋白基因，获得安丝菌素高产菌株，发酵获得安丝菌素；所述靶标蛋白基因为基因APASM_6307，其序列为SEQ ID NO.4所示。

2.如权利要求1所述的提高安丝菌素发酵水平的方法，其特征在于，在珍贵束丝放线菌ATCC 31280中增强安丝菌素体内靶标蛋白基因具体包括如下步骤：

3.如权利要求1所述的提高安丝菌素发酵水平的方法，其特征在于，所述发酵包含下列步骤：将活化后的安丝菌素体内靶标蛋白基因增强表达突变株菌丝体接种于一级种...

【技术特征摘要】

1.一种提高安丝菌素发酵水平的方法，其特征在于，在珍贵束丝放线菌(actinosynnema pretiosum)中增强表达安丝菌素体内靶标蛋白基因，获得安丝菌素高产菌株，发酵获得安丝菌素；所述靶标蛋白基因为基因apasm_6307，其序列为seq id no.4所示。

2.如权利要求1所述的提高安丝菌素发酵水平的方法，其特征在于，在珍贵束丝放线菌atcc 31280中增强安丝菌素体内靶标蛋白基因具体包括如下步骤：

3.如权利要求1所述的提高安丝菌素发酵水平的方法，其特征在于，所述发酵包含下列步骤：将活化后的安丝菌素体内靶标蛋白基因增强表达...

【专利技术属性】
技术研发人员：白林泉，黄群刚，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：