本发明专利技术公开了一种D‑核糖及其异构体杂质的检测方法，包含以下步骤：配制对照品和供试品溶液；采用高效液相色谱法，色谱柱为多糖衍生物正相涂敷型硅胶色谱柱，检测器为二极管阵列检测器，检测波长为210～220nm，流动相为有机溶剂，等度洗脱；计算检测图谱中异构体的含量；该检测方法针对瑞德西韦的起始物料，建立了特有的D‑核糖及其对映异构体的检测方法，检测异构体的专属性、灵敏度、重复性及溶液稳定性均良好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种d-核糖及其异构体杂质的检测方法。
技术介绍
1、瑞德西韦(remdesivir)由吉利德科学公司开发，该药是一种核苷类似物，具有抗病毒活性，在hae细胞中，对sars-cov和mers-cov的ec50值为74nm，在延迟脑肿瘤细胞中，对鼠肝炎病毒的ec50值为30nm。
2、d-核糖，常用作制备瑞德西韦的起始物料，其化学名称为2，3，5-三苄氧基-d-核糖酸-1，4-内酯，英文名为2,3,5-tri-o-benzyl-d-ribono-1,4-lactone，cas号为：55094-52-5，分子式为c26h26o5，分子量为418.49，结构如式1：
3、
4、d-核糖中会混入少量的对映异构体杂质化合物2，化学名为(3s，4s，5s)-3,4-双(苄氧基)-5-((苄氧)甲基)二氢呋喃-2(3h)-酮，英文名为(3s,4s,5s)-3,4-bis(benzyloxy)-5-((benzyloxy)methyl)dihydrofuran-2(3h)-one，cas号为：2568148-57-0，分子式为c26h26o5，分子量为418.49，结构如式2：
5、
6、作为合成瑞德西韦的一种起始物料，在合成反应中，d-核糖中的杂质不可避免的会带入到瑞德西韦的产物中，直接影响最终产品的质量和安全性、有效性。因此，如果能够检测或控制瑞德西韦起始物料d-核糖中的异构体杂质，将会更有利于瑞德西韦的制备，目前该对映异构体杂质没有简便有效的检测方法。
/>技术实现思路
1、专利技术目的：本专利技术的目的是提供一种专属性、灵敏度、重复性及稳定性均良好的瑞德西韦起始物料d-核糖及其异构体杂质的检测方法。
2、技术方案：本专利技术的d-核糖及其异构体杂质的检测方法，所述d-核糖如式1所示，异构体杂质如式2所示：
3、
4、检测方法包含以下步骤：
5、(1)配制供试品溶液和对照品溶液；
6、(2)检测：采用高效液相色谱法，色谱柱为多糖衍生物正相涂敷型硅胶色谱柱，检测器为二极管阵列检测器，检测波长为210～220nm，流动相为有机溶剂，等度洗脱；
7、(3)计算步骤(2)的检测图谱中d-核糖与异构体杂质的含量。
8、优选的，步骤(1)中，所述供试品溶液的浓度为4mg/ml～6mg/ml，优选为5mg/ml。
9、优选的，步骤(1)中，所述供试品溶液配制方法方法为，取d-核糖精密称定，加异丙醇超声溶解并稀释制得供试品溶液。
10、对照溶液配制方法：取供试品溶液适量，加异丙醇稀释制成5μg/ml的对照溶液。
11、异构体对照品贮备液配制方法：取异构体对照品约5mg，置100ml量瓶中，加异丙醇超声溶解并稀释至刻度，摇匀，作为异构体对照品贮备液。
12、系统适用性溶液配制方法：取起始物料d-核糖对照品约50mg，置10ml量瓶中，加异丙醇适量超声使溶解，精密移取异构体对照品贮备液1.0ml，置同一量瓶中，加异丙醇稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液。
13、优选的，步骤(1)中，所述供试品溶液的浓度为4～6mg/ml。
14、优选的，步骤(2)中，所述有机溶剂为正己烷和异丙醇的混合溶剂，正己烷和异丙醇的体积比为70～90：30～10，优选为80：20。
15、优选的，步骤(2)中，所述流动相，流速为0.8～1.2ml/min，优选为1.0ml/min。
16、优选的，步骤(2)中，所述等度洗脱，时间为20～30min，优选为30min。
17、优选的，步骤(2)中，所述色谱柱，柱长为150～250mm，柱直径为2.0～4.6mm，柱填料粒度为3.0～5.0μm；进一步的，柱长为250mm，柱直径为4.6mm，柱填料粒度为5.0μm；进一步优选为daicel chiralcel od，4.6mm×250mm，5μm。
18、优选的，步骤(2)中，柱温为30℃～35℃，优选为30℃。
19、优选的，步骤(2)中检测波长优选215nm。
20、优选的，步骤(3)中，所述异构体杂质的含量，按照主成分自身对照法计算。
21、有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下显著优点：(1)检测方法操作简便，可以准确检测d-核糖异构体的含量，其专属性好，各杂质与主成分之间分离度不小于1.5；灵敏度高，检测线灵敏度达到0.006％，定量限灵敏度达到0.03％；重复性好，100％加标供试品杂质回收率均在80％～120％之间，rsd不大于2.0％，以及稳定性强，系统适用性溶液在室温下27h内均稳定；(2)本检测方法建立了瑞德西韦起始物料异构体的检测方法，可以准确、有效地反映瑞德西韦起始物料的质量状况，从而有效控制后续制备的瑞德西韦的质量。
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【技术保护点】
1.一种D-核糖及其异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述D-核糖如式1所示，异构体杂质如式2所示：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述供试品溶液的浓度为4～6mg/ml。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述供试品溶液配制方法方法为，取D-核糖精密称定，加异丙醇超声溶解并稀释制得供试品溶液。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述有机溶剂为正己烷和异丙醇的混合溶剂。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，正己烷和异丙醇的体积比为70～90：30～10。
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述流动相，流速为0.8～1.2ml/min。
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述等度洗脱，时间为20～30min。
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述色谱柱，柱长为150～250mm，柱直径为2.0～4.6mm，柱填料粒度为3.0～5.0μm。
9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述色谱柱，柱温为30℃～35℃。
10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)中，所述异构体杂质的含量，按照主成分自身对照法计算。
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【技术特征摘要】
1.一种d-核糖及其异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述d-核糖如式1所示，异构体杂质如式2所示：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述供试品溶液的浓度为4～6mg/ml。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述供试品溶液配制方法方法为，取d-核糖精密称定，加异丙醇超声溶解并稀释制得供试品溶液。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述有机溶剂为正己烷和异丙醇的混合溶剂。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，正己烷和异丙醇的体积比为70～90：30～10。
6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵惠婕，祁智，马燕，王娟，罗林，
申请(专利权)人：南京正济医药研究有限公司，
类型：发明
国别省市：
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