瑞德西韦中间体的质量控制方法技术

本发明专利技术公开了一种具有如下结构的瑞德西韦中间体的质量控制方法，该方法采用高效液相色谱法，以缓冲液为流动相A，以有机溶剂为流动相B，梯度洗脱程序包含：以流动相A的体积比计，0～30分钟：60％

【技术实现步骤摘要】
瑞德西韦中间体的质量控制方法


[0001]本专利技术涉及一种瑞德西韦中间体的质量控制方法，尤其涉及一种可靠、有效的瑞德西韦中间体的质量控制方法。

技术介绍

[0002]瑞德西韦化学名为(S)
‑2‑
(((S)
‑
(((2R,3S,4R,5R)
‑5‑
(4
‑
氨基吡咯并[2,1
‑
f][1,2,4]三嗪
‑7‑
基)
‑5‑
氰基
‑
3,4
‑
二羟基四氢呋喃
‑2‑
基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸
‑2‑
乙基丁基酯，CAS号为1809249
‑
37
‑
3，分子式为C
27
H
35
N6O8P，分子量为602.58，结构式如下：
[0003][0004]瑞德西韦是一种腺苷类似物的核苷酸前药，它与病毒RNA依赖性RNA聚合酶结合，并通过过早终止RNA转录来抑制病毒复制。其已被证明具有对抗严重急性呼吸系统综合征冠状病毒的体外和体内活性的作用，保留了对奥密克戎变异株及其亚变异株的体外中和活性。
[0005](2R,3R,4R,5R)
‑2‑
(4
‑
氨基吡咯并[2,1
‑
f][1,2,4]三嗪
‑7‑
基)
‑
3,4
‑
双(苄氧基)
‑5‑
((苄氧基)甲基)四氢呋喃
‑2‑
腈为瑞德西韦的关键合成中间体，其CAS号为1191237
‑
69
‑
0，其分子式为C
12
H
13
N5O4，分子量为291.27，化学结构如下：
[0006][0007]CN113493480公开了如下瑞德西韦中间体的制备方法：
[0008][0009]其中，由中间体003制备得到的中间体004通过硅胶柱分离，以0
‑
5％甲醇和二氯甲烷梯度洗脱：
[0010]时间(min)梯度(甲醇：二氯甲烷)0
‑
100：10010
‑
500：100
‑
5：100；
[0011]上述梯度洗脱方法仅适用于产物纯化，并不能将相关杂质逐一有效分离，特别是非对映异构体杂质。
[0012]由上述中间体制备瑞德西韦过程中，其所含有的杂质将不可避免地带入到瑞德西韦产物中，尤其是非对映异构体杂质，直接影响原料药及制剂的质量、安全性和有效性。因此，如果能够检测或控制瑞德西韦中间体中的杂质，将更有利于对瑞德西韦的制备过程和产品质量进行控制，然而目前未开发出针对上述中间体有关物质包括其非对映异构体的检测方法。

技术实现思路

[0013]专利技术目的：本专利技术旨在提供一种有效、可靠、稳定的瑞德西韦中间体的质量控制方法。
[0014]技术方案：本专利技术所述的针对具有如下结构的瑞德西韦中间体的质量控制方法，
[0015][0016]包括以下步骤：
[0017](1)配制样品；
[0018](2)采用高效液相色谱法，以缓冲液为流动相A，以有机溶剂为流动相B，进行梯度洗脱；其中，以流动相A的体积比计，梯度洗脱程序包含：0～30分钟：60％
→
15％～25％，30～35分钟：15％～25％；
[0019](3)计算各质控杂质含量。
[0020]优选，所述质控杂质如下：
[0021][0022]优选，所述梯度洗脱程序还包含：以流动相A的体积比计，35～45分钟：15％～25％
→
55％～60％；
[0023]更优选，所述梯度洗脱程序如下：
[0024][0025]优选，所述流动相A选自磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硫酸盐缓冲液，进一步优选，流动相A为0.01mol/L碳酸盐缓冲液；流动相B选自乙腈、甲醇，进一步优选，流动相B为乙腈。
[0026]优选，所述高效液相色谱法采用烷基硅烷键合硅胶相色谱柱；进一步优选，色谱柱为C18色谱柱、C8色谱柱、苯基柱、氰基柱或氨基柱，柱长为150～250mm，柱直径为2.0～4.6mm，柱填料粒度为3.0～5.0μm；更优选，色谱柱为C18柱，柱长为250mm，柱直径为4.6mm，柱填料粒度为5.0μm；最优选，色谱柱为STARCHROMArtChromWP C18，4.6
×
250mm，5μm或其等效色谱柱。
[0027]检测波长为220～270nm，流动相流速为0.8～1.2ml/min，柱温为30℃～35℃；进一步优选，检测波长为245nm，流动相流速为1.0ml/min，柱温为35℃。具体地，参照药物质量研究方法学验证标准中关于耐用性的要求，检测波长、流动相流速、柱温可设置在满足耐用性的范围之内，例如检测波长可设置为245
±
2nm。
[0028]优选，各质控成分的检测线性范围如下：
[0029][0030]具体地，所述质量控制方法具体包含以下步骤：
[0031](1)配制样品：配制对照品溶液、供试品溶液和分离度溶液；
[0032](2)检测：采用高效液相色谱法，流动相A为缓冲液，流动相B为有机溶剂，检测波长为220～270nm，按照上述洗脱梯度进行洗脱；
[0033](3)计算步骤(2)的检测图谱中有关物质的含量。
[0034]步骤(1)中各样品配制方法如下：
[0035]①
对照品溶液的配制方法如下：
[0036]取瑞德西韦中间体置于20ml量瓶中，加乙腈溶液，所述乙腈溶液中乙腈与水的体积比为1:1，超声使其溶解，瑞德西韦中间体的浓度为0.1～0.5mg/ml，优选为0.5mg/ml，定容至刻度。
[0037]②
供试品溶液的配制方法如下：
[0038]取供试品置于20ml量瓶中，加乙腈溶液，所述乙腈溶液中乙腈与水的体积比为1:1，超声使其溶解，供试品的浓度为0.1～0.5mg/ml，定容至刻度。
[0039]③
分离度溶液的配制方法如下：
[0040]分别精密称取杂质A～杂质D的对照品10mg，分别置于20ml量瓶中，加乙腈溶液，所述乙腈溶液中乙腈与水的体积比为1:1，超声使其溶解，定容至刻度，摇匀，得到各有关物质的贮备液；
[0041]精密称取瑞德西韦中间体对照品10mg，置20ml量瓶中，加乙腈溶液，所述乙腈溶液中乙腈与水的体积比为1:1，超声使其溶解，精密移取上述相关物质的贮备液，加乙腈溶液溶解并稀释制成每1ml含各有关物质2.5μg、瑞德西韦中间体0.5mg的溶液，得到分离度溶液。
[0042]步骤(2)中供试品溶液的进样量优选为5μl。
[0043]步骤(3)中有关物质含量的计算方本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有如下结构的瑞德西韦中间体的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)配制样品；(2)采用高效液相色谱法，以缓冲盐为流动相A，以有机溶剂为流动相B，进行梯度洗脱；其中，以流动相A的体积比计，梯度洗脱程序包含：0～30分钟：60％
→
15％～25％，30～35分钟：15％～25％；(3)计算各质控杂质含量。2.根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，所述质控杂质如下：3.根据权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于，以流动相A的体积比计，所述梯度洗脱程序还包含：35～45分钟：15％～25％
→
55％～60％。4.根据权利要求3所述的质量控制方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序如下：5.根据权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于，所述流动相A选自磷酸盐缓冲
液、碳酸盐缓冲液、硫酸盐...

【专利技术属性】
技术研发人员：张筱雯，马燕，祁智，罗林，
申请(专利权)人：南京正济医药研究有限公司，
类型：发明
国别省市：