基于拉曼光谱的单细胞代谢活性鉴定和分选方法技术

技术编号:40196198 阅读:25 留言:0更新日期:2024-01-26 23:59
本发明专利技术涉及一种鉴定单个细胞的代谢活性的方法,包括对所述细胞进行拉曼光谱检测的步骤,还涉及利用上述代谢活性鉴定方法进行单细胞分选的方法。本发明专利技术建立了一种从单细胞层面来鉴定代谢活性并进行分选的方法,突破了传统的以菌株群体为对象来筛选具有不同代谢活性的突变株的限制。通过本发明专利技术的方法,可对细胞群体进行高通量地单细胞鉴定和分选,从大量混合突变株或混合菌株中选出具有特定代谢活性,或对高盐、强光等胁迫环境具有抗性的突变株或菌株。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物培养和筛选领域,更特别地,涉及基于拉曼光谱的单细胞代谢活性鉴定和分选方法


技术介绍

1、光合微生物可通过光合固碳过程,将太阳能和二氧化碳直接转化为重要生物基产品,被认为是极具潜力的新型微生物光合平台。一些光合微生物可生产高附加产值的次级代谢物,如藻胆蛋白、氨基酸和维生素等,因此具有较高的经济价值。随着分子生物学技术手段的开发和应用,以及合成生物学的相关研究,可对起始微生物进行定向改造,获得具有特定性质的工程化微生物。

2、然而,目前,难以对具有目标性状的环境株或突变株进行高效的单细胞筛选。传统的筛选策略主要从群体层面出发,包括群体生长表型和群体特定产物产量含量筛选,由于其依赖于群体培养的生长周期,具有通量低、需要花费大量的时间和人力等局限性。而单细胞技术最突出的优势在于可以实现对自然界或者突变库中单个细胞进行评价和分选,能够跳过冗长的培养阶段、通过直接“测量”单个细胞的特定性状,直接从群体中筛选分离具有目标功能和性状的特殊细胞,进而直接追踪决定功能表型的遗传特征。

3、单细胞拉曼光谱分析(single-cell本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种鉴定单个细胞的代谢活性的方法,其特征在于,包括对所述细胞进行拉曼光谱检测的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞为光合微生物,包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述唯一无机碳源为碳原子为13C稳定同位素的碳酸氢钠、二氧化碳,或者其他直接或间接提供碳酸氢根的物质。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述含碳物质的拉曼光谱为所述含碳物质的含13C和不含13C的特征拉曼光谱。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述含碳物质为类胡萝卜素、其亚族或其相似物。>

6.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种鉴定单个细胞的代谢活性的方法,其特征在于,包括对所述细胞进行拉曼光谱检测的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞为光合微生物,包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述唯一无机碳源为碳原子为13c稳定同位素的碳酸氢钠、二氧化碳,或者其他直接或间接提供碳酸氢根的物质。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述含碳物质的拉曼光谱为所述含碳物质的含13c和不含13c的特征拉曼光谱。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述含碳物质为类胡萝卜素、其亚族或其相似...

【专利技术属性】
技术研发人员:吕雪峰崔金玉陈荣泽孙绘梨栾国栋徐健
申请(专利权)人:中国科学院青岛生物能源与过程研究所
类型:发明
国别省市:

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