【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物催化。具体涉及l-泛解酸内酯脱氢酶突变体在制备d-泛解酸内酯中的应用。
技术介绍
1、d-泛酸又称维生素b5，广泛存在于生物界内，是动物体内合成辅酶a的前体，其主要作用是参与动物体内蛋白质、脂肪和糖的代谢。由于d-泛酸在高温、酸碱下不稳定，因此其稳定性更好的衍生物d-泛酸钙在食品、医药、饲料等行业得到了更广泛的应用。
2、d-泛酸钙的工业化生产以d-泛解酸内酯(d-pantolactone，d-pl)作为前体物质，即用d-泛解酸内酯与β-氨基丙酸钙缩合得到。因此，d-泛解酸内酯是d-泛酸钙规模化生产的关键因素。d-泛解酸内酯的合成主要有两种方法：1)化学合成法，以异丁醛—甲醛—氢氰酸经过一系列步骤得到dl-泛解酸内酯，后通过手性拆分剂获得d-泛解酸内酯，而l-泛解酸内酯经萃取外消旋后再次拆分。该方法的弊端是合成路线中有毒化合物氢氰酸的使用；2)微生物水解酶法，目前大多数企业生产d-泛解酸内酯均采用此路线。该方法以dl-泛解酸内酯为原料，利用d-泛解酸内酯水解酶水解原料中的d-泛解酸内酯，接着分离d-泛解酸和l-泛解酸内酯，分离后的d-泛解酸经酸化成环形成d-泛解酸内酯，而l-泛解酸内酯经消旋后重复参与水解。该工艺避开了化学合成中氢氰酸的使用，且酶活力高，但也存在反复萃取消旋、酸碱耗用高等问题。鉴于此，开发更为直接、高效、环保的d-泛解酸内酯不对称合成方法替代现有的手性拆分技术将具有重要的应用价值。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了一种l-泛
2、本专利技术还提供了一种工程菌，含有所述的l-泛解酸内酯脱氢酶。
3、在本专利技术的具体实施方式中，所述工程菌，还含有酮基泛解酸内酯还原酶。
4、本专利技术第三目的提供了所述工程菌在制备d-泛解酸内酯中的应用。
5、本专利技术的第四目的提供了一种制备d-泛解酸内酯的方法，包括：所述工程菌与dl-泛解酸内酯混合后在ph为7.0、温度为30℃的条件下反应10-24h得d-泛解酸内酯。
6、本专利技术采用l-泛解酸内酯脱氢酶突变体和酮基泛解酸内酯还原酶共表达催化合成d-泛解酸内酯的方法，具有工艺简单、酶促反应选择性高、无副产物，产品后提取和精制简单等优点。
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1.L-泛解酸内酯脱氢酶，其特征在于，其为野生型或突变体；
2.工程菌，其特征在于，含有权利要求1所述的L-泛解酸内酯脱氢酶。
3.权利要求2所述工程菌，其特征在于，还含有酮基泛解酸内酯还原酶。
4.权利要求2所述工程菌在制备D-泛解酸内酯中的应用。
5.制备D-泛解酸内酯的方法，其特征在于，包括：
【技术特征摘要】
1.l-泛解酸内酯脱氢酶，其特征在于，其为野生型或突变体；
2.工程菌，其特征在于，含有权利要求1所述的l-泛解酸内酯脱氢酶。
3.权利要求2所述工程...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱俊歌，吴胜，陶勇，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：
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