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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物,具体涉及一株枯草芽孢杆菌及其用途,特别是其在改善烟叶品质中的应用。
技术介绍
1、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)是革兰氏阳性菌,广泛分布于土壤等自然环境中,因易在枯草浸出液中繁殖而得名。
2、现有技术已报道枯草芽孢杆菌可以产α-淀粉酶、中性蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶和果胶酶,并广泛应用于发酵产业。例如,枯草芽孢杆菌通过产淀粉酶和果胶酶,而被用于改善烟叶品质。但现有技术中未有见枯草芽孢杆菌兼产果胶酶和木质素酶(包括木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶)的报道。
3、微生物常见的发酵方式有固态发酵和液态发酵,固态发酵产物多,但发酵均匀性较差、人力成本高;液态发酵机械化强度高、相对可控,但发酵产物少。固定化发酵方式综合了固态发酵和液态发酵的特点,通过人工构造囊膜,将微生物固定在膜内进行发酵。该方式菌种可回收性强,能多次重复发酵,进而在液态发酵的基础上提高发酵产量。目前,在固定化发酵方式开发中,需对控制底物和菌体代谢产物进出的囊膜的材料、制备工艺进行大量摸索,才能获得满意的效果。
技术实现思路
1、本专利技术的第一方面提供了一种枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)fm-1,其包含16s rrna核酸,所述16s rrna核酸与seq id no:3所示的核酸具有至少98%的同一性。
2、在某些实施方案中,所述16s rrna核酸与seq id no:3所示的核酸具有至少99%的同一性。
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4、在某些实施方案中,所述枯草芽孢杆菌fm-1,其保藏号为cgmcc no.24244。
5、本专利技术的第二方面提供了一种培养物,其包括本专利技术所述的枯草芽孢杆菌fm-1,以及任选的培养基。
6、在某些实施方案中,所述的培养基包括烟梗。
7、在某些实施方案中,所述烟梗为经过碱处理的烟梗。
8、在某些实施方案中,所述碱处理包括:
9、1)用碱液浸泡烟梗;
10、2)用酸清洗烟梗至中性。
11、在某些实施方案中,所述碱液为氢氧化钠溶液。
12、在某些实施方案中,所述碱液为质量分数0.5-2%的氢氧化钠水溶液。
13、在某些实施方案中,所述酸为盐酸。
14、在某些实施方案中,所述酸为质量分数0.5-2%的盐酸。
15、在某些实施方案中,所述碱处理包括:
16、1)用质量分数0.5-2%的氢氧化钠水溶液浸泡烟梗12-36小时,
17、2)用质量分数0.5-2%的盐酸清洗烟梗1-6小时,
18、3)用水清洗烟梗至中性。
19、在某些实施方案中,所述碱处理还包括对烟梗进行烘干。
20、在某些实施方案中,所述烟梗在培养基中的浓度为10-40g/l。
21、在某些实施方案中,所述烟梗在培养基中的浓度为25-35g/l。
22、在某些实施方案中,所述烟梗在培养基中的浓度为30g/l。
23、在某些实施方案中,所述培养基还包括nano3、kh2po4、mgso4·7h2o、nacl和cacl2。
24、在某些实施方案中,所述烟梗、nano3、kh2po4、mgso4·7h2o、nacl和cacl2的重量比为10-40:1.5-4:0.5-1.5:0.1-0.9:0.1-0.9:0.05-0.15。
25、在某些实施方案中,所述烟梗、nano3、kh2po4、mgso4·7h2o、nacl和cacl2的重量比为25-35:2-3:0.8-1.2:0.3-0.8:0.3-0.8:0.08-0.12。
26、在某些实施方案中,所述烟梗、nano3、kh2po4、mgso4·7h2o、nacl和cacl2的重量比为30:2.5:1:0.5:0.5:0.1。
27、在某些实施方案中,所述发酵培养基是液体培养基、固体培养基或半固体培养基。
28、本专利技术的第三方面提供了一种培养物上清,其为本专利技术所述的培养物的上清。
29、本专利技术的第四方面提供了一种组合物,其包括本专利技术所述的枯草芽孢杆菌fm-1,或本专利技术所述的培养物,或本专利技术所述的培养物上清。
30、本专利技术的第五方面提供了一种组合物,其由本专利技术所述的培养物上清制备而成。
31、本专利技术的第六方面提供了一种酶制剂,其中含有果胶酶、木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶。
32、在某些实施方案中,所述酶制剂由本专利技术所述的枯草芽孢杆菌fm-1在培养基中发酵获得,其中,所述培养基包括烟梗。
33、在某些实施方案中,所述烟梗为经过碱处理的烟梗。
34、在某些实施方案中,所述碱处理包括:
35、1)用碱液浸泡烟梗;
36、2)用酸清洗烟梗至中性。
37、在某些实施方案中,所述碱液为氢氧化钠溶液。
38、在某些实施方案中,所述碱液为质量分数0.5-2%的氢氧化钠水溶液。
39、在某些实施方案中,所述酸为盐酸。
40、在某些实施方案中,所述酸为质量分数0.5-2%的盐酸。
41、在某些实施方案中,所述碱处理包括:
42、1)用质量分数0.5-2%的氢氧化钠水溶液浸泡烟梗12-36小时,
43、2)用质量分数0.5-2%的盐酸清洗烟梗1-6小时,
44、3)用水清洗烟梗至中性。
45、在某些实施方案中,所述碱处理还包括对烟梗进行烘干。
46、在某些实施方案中,所述烟梗在培养基中的浓度为10-40g/l。
47、在某些实施方案中,所述烟梗在培养基中的浓度为25-35g/l。
48、在某些实施方案中,所述烟梗在培养基中的浓度为30g/l。
49、在某些实施方案中,所述培养基还包括nano3、kh2po4、mgso4·7h2o、nacl和cacl2。
50、在某些实施方案中,所述烟梗、nano3、kh2po4、mgso4·7h2o、nacl和cacl2的重量比为10-40:1.5-4:0.5-1.5:0.1-0.9:0.1-0.9:0.05-0.15。
51、在某些实施方案中,所述烟梗、nano3、kh2po4、mgso4·7h2o、nacl和cacl2的重量比为25-35:2-3:0.8-1.2:0.3-0.8:0.3-0.8:0.08-0.12。
52、在某些实施方案中,所述烟梗、nano3、kh2po4、mgso4·7h2o、nacl和cacl2的重量比为30:2.5:1:0.5:0.5:0.1。
53、在某些实施方案中,所述发酵培养基是液体培养基、固体培养基或半固体培养基本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)FM-1,其包含16S rRNA核酸,所述16S rRNA核酸与SEQ ID No:3所示的核酸具有至少98%的同一性。
2.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌FM-1,其中所述16S rRNA核酸与SEQ ID No:3所示的核酸具有至少99%的同一性。
3.权利要求2所述的枯草芽孢杆菌FM-1,其中所述16S rRNA核酸具有如SEQ ID No:3所示的核酸序列。
4.权利要求1-3任一项所述的枯草芽孢杆菌FM-1,其保藏号为CGMCC No.24244。
5.一种培养物,其包括权利要求1-4任一项所述的枯草芽孢杆菌FM-1,以及任选的培养基。
6.权利要求5所述的培养物,其中所述的培养基包括烟梗;
7.一种培养物上清,其为权利要求5或6所述的培养物的上清。
8.一种组合物,其包括权利要求1-4任一项所述的枯草芽孢杆菌FM-1,或权利要求5或6所述的培养物,或权利要求7所述的培养物上清。
9.一种组合物,其由权利要求7所述的培养
10.一种酶制剂,其中含有果胶酶、木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶。
11.权利要求10所述的酶制剂,其由权利要求1-4任一项所述的枯草芽孢杆菌FM-1在培养基中发酵获得,其中,所述培养基包括烟梗;
12.权利要求10或11所述的酶制剂,其由包括以下操作的方法制备而成,
13.权利要求1-4任一项所述的枯草芽孢杆菌FM-1或权利要求5或6所述的培养物或权利要求7所述的培养物上清或权利要求8或9所述的组合物或权利要求10-12任一项所述的酶制剂在烟叶加工中的用途,或在加工烟草原料或制备烟草制品中的用途,或者用于提升烟草制品抽吸感官质量的用途。
14.一种处理烟叶的方法,其包括:
15.一种烟叶,其由权利要求14所述的方法处理获得。
16.一种培养基,其包括烟梗;
17.一种循环发酵富集装置,包括:
18.权利要求17所述的循环发酵富集装置,其中,
19.权利要求17或18所述的循环发酵富集装置,还包括:
20.制备酶制剂的方法,其包括以下步骤:
...【技术特征摘要】
1.一种枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)fm-1,其包含16s rrna核酸,所述16s rrna核酸与seq id no:3所示的核酸具有至少98%的同一性。
2.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌fm-1,其中所述16s rrna核酸与seq id no:3所示的核酸具有至少99%的同一性。
3.权利要求2所述的枯草芽孢杆菌fm-1,其中所述16s rrna核酸具有如seq id no:3所示的核酸序列。
4.权利要求1-3任一项所述的枯草芽孢杆菌fm-1,其保藏号为cgmcc no.24244。
5.一种培养物,其包括权利要求1-4任一项所述的枯草芽孢杆菌fm-1,以及任选的培养基。
6.权利要求5所述的培养物,其中所述的培养基包括烟梗;
7.一种培养物上清,其为权利要求5或6所述的培养物的上清。
8.一种组合物,其包括权利要求1-4任一项所述的枯草芽孢杆菌fm-1,或权利要求5或6所述的培养物,或权利要求7所述的培养物上清。
9.一种组合物,其由权利要求7所述的培养物上清制...
【专利技术属性】
技术研发人员:李菁菁,邓小华,姜振锟,范坚强,陈义强,陈善义,龙腾,何伟,齐凌峰,徐茜,王雨晴,张雯,倪莉,
申请(专利权)人:福建中烟工业有限责任公司,
类型:发明
国别省市:
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