一种用蛋白模拟抗原-纳米抗体检测黄曲霉毒素B1的方法技术

本发明专利技术提供了一种用蛋白模拟抗原‑纳米抗体检测黄曲霉毒素B1的方法。所述方法为以绿色荧光蛋白作为模拟抗原用于黄曲霉毒素B1的检测。这一方法使用蛋白质替代AFB1‑BSA等偶联物作为抗原进行检测，其中eGFP作为模拟抗原的检测IC50值低，明显优于AFB1‑BSA，能够更好地满足检测要求。此外，使用的蛋白质可以通过原核表达体系进行大规模表达纯化，容易获得、成本低，能够更好地满足AFB1环保、低成本和高灵敏检测的需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫检测，具体涉及一种用蛋白模拟抗原-纳米抗体检测黄曲霉毒素b1的方法。

技术介绍

1、酶联免疫分析技术(elisa)是一种常用于分子检测的方法，其原理是利用抗原和抗体的特异性结合识别待测分子，通过进一步的酶促反应产生的信号来定量检测溶液中特定物质。这种方法具有很强的特异性，和较高的敏感度高。酶联免疫分析技术可以用于检测大分子和小分子，包括蛋白质、抗体、激素和药物等。根据种类和变化可分为夹心法、间接法、竞争法等。

2、酶联免疫分析技术是目前黄曲霉毒素b1(afb1)大规模筛查的常用手段。传统的酶联免疫分析技术检测afb1的原理是，首先，在酶标板上包被一层特afb1和牛血清白蛋白bsa等蛋白偶联得到的抗原(afb1-bsa)，将待测样品或标准品加入到孔板中，允许样品或标准品中的afb1与固定在孔板上的抗原与特异性识别afb1的单克隆抗体竞争结合，通过洗涤，将未结合的抗体去除，加入酶标二抗识别单克隆抗体，洗涤并通过酶促反应进行检测，最后根据标准曲线和待测样品的检测数值计算样品中的afb1含量。这一传统的方法步骤繁琐，需要使用多种商业化本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.绿色荧光蛋白在检测黄曲霉毒素B1中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述绿色荧光蛋白为sfGFP或eGFP，所述sfGFP的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述eGFP的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种检测黄曲霉毒素B1的方法，其特征在于，以绿色荧光蛋白作为模拟抗原用于黄曲霉毒素B1的检测。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，以绿色荧光蛋白作为模拟抗原，与纳米荧光素酶-纳米抗体组合用于黄曲霉毒素B1的检测。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述绿色荧光蛋白与纳米荧光素酶-纳米...

【技术特征摘要】

1.绿色荧光蛋白在检测黄曲霉毒素b1中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述绿色荧光蛋白为sfgfp或egfp，所述sfgfp的氨基酸序列如seq id no.1所示，所述egfp的氨基酸序列如seq id no.2所示。

3.一种检测黄曲霉毒素b1的方法，其特征在于，以绿色荧光蛋白作为模拟抗原用于黄曲霉毒素b1的检测。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，以绿色荧光蛋白作为模拟抗原，与纳米荧光素酶-纳米抗体组合用于黄曲霉毒素b1的检测。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述绿色荧光蛋白与纳米荧光素酶-纳米抗体特异性结合。

6.根据权利要求3-5任一所述的方法，其特征在于，所述绿色荧光蛋白为sfgfp或egfp，所述sfgfp的氨基酸序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：晏石娟，吴绍文，陈文星，李文燕，陈园园，
申请(专利权)人：广东省农业科学院农业生物基因研究中心，
类型：发明
国别省市：