一种验证神经退行性疾病中铁死亡的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种验证神经退行性疾病中铁死亡的方法及其应用，包括至少2个实验方案；所述实验方案为内源性活性氧自由基含量实验、铁含量实验、内源性脂质过氧化物的含量实验和氧化应激实验；其利用不同的荧光染色剂对秀丽隐杆线虫细胞中的特异性蛋白质进行染色处理，能够通过荧光强度的检测快速、准确的得到秀丽隐杆线虫细胞中内源性活性氧自由基含量、铁含量、内源性脂质过氧化物含量以及SOD‑3:GFP、GST‑4:GFP基因表达量，从而能够准确、快速的评估秀丽隐杆线虫的铁死亡情况；该方法成本低廉，周期短，可重复性好，能够大规模应用于验证神经退行性疾病中铁死亡的研究实验，对缩短药物开发时间、降低开发成本和准确判断药物治疗机理及疗效具有积极作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，具体涉及一种验证神经退行性疾病中铁死亡的方法及其应用。

技术介绍

1、神经退行性疾病(neurodegenerativedisease)是人类健康的主要威胁。这类疾病主要包括阿尔茨海默氏病(ad)，帕金森氏病(pd)，亨廷顿病(hd)等，这些疾病在病理生理学上表现是多种多样的，一些会导致记忆和认知障碍，另一些则会影响一个人的运动、说话甚至呼吸的能力。铁死亡(ferroptosis)是一种由谷胱甘肽(gsh)过氧化物酶4(gpx4)控制的细胞内微环境的氧化还原状态失调引起的一种调节性细胞死亡(rcd)，主要表现为较强的氧化应激、膜脂质过氧化以及明显的细胞形态变化。铁和脂质过氧化物为铁死亡过程的主要参与者。大脑由于其高代谢率和相对较低的抗氧化防御能力，易受活性氧(reactiveoxygen species,ros)的影响；且由于脑部富含的膜结构中存在高浓度的多不饱和脂肪酸，使得大脑中的氧化损伤主要表现为脂质过氧化；因此，脑内铁蓄积易导致大量氧化自由基、过氧化物等的产生,从而引起脂质过氧化反应与蛋白质功能上的紊乱,并最终导致神经元的变性本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，包括至少2个实验方案；所述实验方案为内源性活性氧自由基含量实验、铁含量实验、内源性脂质过氧化物的含量实验和氧化应激实验；

2.根据权利要求1所述的验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，所述实验方案中，固定时采用的化学药剂为叠氮化钠或无水硝酸钠。

3.根据权利要求1所述的验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，所述实验方案中，每组至少分析20只线虫，并重复至少3组实验。

4.根据权利要求1所述的验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，内源性活性氧自由基含量实验中，DHE的用量为每1...

【技术特征摘要】

1.一种验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，包括至少2个实验方案；所述实验方案为内源性活性氧自由基含量实验、铁含量实验、内源性脂质过氧化物的含量实验和氧化应激实验；

2.根据权利要求1所述的验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，所述实验方案中，固定时采用的化学药剂为叠氮化钠或无水硝酸钠。

3.根据权利要求1所述的验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，所述实验方案中，每组至少分析20只线虫，并重复至少3组实验。

4.根据权利要求1所述的验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，内源性活性氧自由基含量实验中，dhe的用量为每100μl缓冲液中dhe的含量为1-3μl。

5.根据权利要求1所述的验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，铁含量实验中，细胞活性染料的用量为每100μl缓冲液中的含量为2-4μl。

6.根据权利要求1所述的验证神经退行性疾病中铁死亡的方法，其特征在于，内源性脂质过氧化物的含量实验中，脂质过氧化物探针染料的用量为每100μl缓冲液中的含量为1-3μl。

7.一种权利要求1-6任一项所述验...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴安国，周晓钢，雍媛媛，秦大莲，吴建明，余崇林，余录，
申请(专利权)人：西南医科大学，
类型：发明
国别省市：