【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
专利
本公开涉及对于牛痘病毒加帽酶的产生有用的核酸、细胞和方法。
技术介绍
0、背景
1、7-甲基鸟苷酸帽结构(m7g-cap 0)在蛋白质合成的帽依赖性起始中具有重要作用，并且涉及真核信使rna(mrna)的稳定、转运和翻译。牛痘病毒加帽酶(vce)是一种来自牛痘病毒的酶，对于将m7g cap 0添加到rna的5'端有效，从而提高rna稳定性和翻译能力。vce对于mrna的产生可以是有用的。然而，以前已经报道了大规模表达和生产vce的困难。
技术实现思路
0、概述
1、vce的增加的产生将对于满足对该酶日益增长的需求是有用的。vce的增加的产生在mrna疫苗的产生中可能是特别有用的。本公开的各方面提供对于vce的产生有用的非天然存在的核酸、细胞和方法。
2、本公开的方面涉及非天然存在的核酸，非天然存在的核酸包括：(a)启动子，其中启动子包括与seq id no:8或seq id no:9至少90％一致的序列；以及(b)编码与seq idno:6或seq id no:29至少90％一致的氨基酸序列的核酸、和/或编码与seq id no:7或seqid no:31至少90％一致的氨基酸序列的核酸，其中(a)和(b)可操作地连接，并且其中非天然存在的核酸还包括核糖体结合位点(rbs)。
3、在一些实施方案中，启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
4、在一些实施方案中，非天然存在的核酸还包括终止子。在一些实施方案中，rbs包
5、在一些实施方案中，编码与seq id no:6或seq id no:29至少90％一致的氨基酸序列的核酸包括与seq id no:2、seq id no:3、seq id no:33或seq id no:34至少90％一致的核酸序列；和/或编码与seq id no:7或seq id no:31至少90％一致的氨基酸序列的核酸包括与seq id no:4、seq id no:5、seq id no:35或seq id no:36至少90％一致的核酸序列。
6、在一些实施方案中，启动子、rbs和终止子可操作地连接至编码与seq id no:6或seq id no:29至少90％一致的氨基酸序列的核酸，和/或编码与seq id no:7或seq id no:31至少90％一致的氨基酸序列的核酸。在一些实施方案中，编码与seq id no:6或seq idno:29至少90％一致的氨基酸序列的核酸编码seq id no:6或seq id no:29的氨基酸序列。在一些实施方案中，编码与seq id no:7或seq id no:31至少90％一致的氨基酸序列的核酸编码seq id no:7或seq id no:31的氨基酸序列。在一些实施方案中，编码与seq id no:6或seq id no:29至少90％一致的氨基酸序列的核酸和/或编码与seq id no:7或seq idno:31至少90％一致的氨基酸序列的核酸编码seq id no:6或seq id no:29的氨基酸序列并且也编码seq id no:7或seq id no:31的氨基酸序列。
7、本公开的另外的方面涉及非天然存在的核酸，非天然存在的核酸包括：(a)第一启动子，其中第一启动子包括与seq id no:8或seq id no:9至少90％一致的序列；(b)第一核酸，其中第一核酸编码与seq id no:6或seq id no:29至少90％一致的氨基酸序列；(c)第二启动子，其中第二启动子包括与seq id no:8或seq id no:9至少90％一致的序列；以及(d)第二核酸，其中第二核酸编码与seq id no:7或seq id no:31至少90％一致的氨基酸序列，其中(a)和(b)可操作地连接，并且其中(c)和(d)可操作地连接，并且其中非天然存在的核酸还包括至少一个核糖体结合位点(rbs)。
8、在一些实施方案中，第一启动子和/或第二启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
9、在一些实施方案中，非天然存在的核酸还包括至少一个终止子。在一些实施方案中，rbs包括与seq id no:10、seq id no:11、seq id no:12、seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15、seq id no:16、seq id no:17、seq id no:37、seq id no:38或seq id no:45至少90％一致的序列，和/或终止子包括与seq id no:18、seq id no:19或seq id no:20至少90％一致的序列。在一些实施方案中，第一核酸包括与seq id no:2、seq id no:3、seqid no:33或seq id no:34至少90％一致的序列；和/或第二核酸包括与seq id no:4、seqid no:5、seq id no:35或seq id no:36至少90％一致的序列。在一些实施方案中，非天然存在的核酸包括与seq id no:21-28或seq id no:49-54中的任意一者至少90％一致的序列。
10、本公开的另外的方面涉及非天然存在的核酸，非天然存在的核酸包括与seq idno:21-28或seq id no:49-54中的任意一者至少90％一致的序列。在一些实施方案中，非天然存在的核酸不编码融合蛋白。
11、本公开的另外的方面涉及宿主细胞，宿主细胞包括与本公开相关联的任意非天然存在的核酸。在一些实施方案中，非天然存在的核酸被整体或部分整合到宿主细胞的基因组中。在一些实施方案中，非天然存在的核酸在质粒上表达。
12、本公开的另外的方面涉及宿主细胞，宿主细胞包括一种或更多种非天然存在的核酸，非天然存在的核酸包括：启动子，其中启动子包括与seq id no:8或seq id no:9至少90％一致的序列，以及编码与seq id no:6或seq id no:29至少90％一致的氨基酸序列的核酸和/或编码与seq id no:7或seq id no:31至少90％一致的氨基酸序列的核酸，其中一种或更多种非天然存在的核酸还包括核糖体结合位点(rbs)。
13、在一些实施方案中，启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
14、在一些实施方案中，rbs包括与seq id no:10-17、seq id no:37、seq id no:38或se本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种非天然存在的核酸，所述非天然存在的核酸包括：
2.如权利要求1所述的非天然存在的核酸，其中所述启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
3.如权利要求1或2所述的非天然存在的核酸，其中所述非天然存在的核酸还包括终止子。
4.如权利要求1-3中任一项所述的非天然存在的核酸，其中：
5.如权利要求1-4中任一项所述的非天然存在的核酸，其中：
6.如权利要求3-5中任一项所述的非天然存在的核酸，其中所述启动子、所述RBS和所述终止子可操作地连接至权利要求1(b)的所述核酸。
7.如权利要求1-6中任一项所述的非天然存在的核酸，其中权利要求1(b)中的所述核酸编码SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:29的氨基酸序列。
8.如权利要求1-6中任一项所述的非天然存在的核酸，其中权利要求1(b)中的所述核酸编码SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:31的氨基酸序列。
9.如权利要求1-6中任一项所述的非天然存在的核酸，其中权利要求1(b)中的所述核酸编码SEQ ID NO:6或SEQ
10.一种非天然存在的核酸，所述非天然存在的核酸包括：
11.如权利要求10所述的非天然存在的核酸，其中所述第一启动子和/或所述第二启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
12.如权利要求10或11所述的非天然存在的核酸，其中所述非天然存在的核酸还包括至少一个终止子。
13.如权利要求10-12中任一项所述的非天然存在的核酸，其中：
14.如权利要求10-13中任一项所述的非天然存在的核酸，其中：
15.如权利要求10-14中任一项所述的非天然存在的核酸，其中所述非天然存在的核酸包括与SEQ ID NO:21-28或SEQ ID NO:49-54中的任意一者至少90％一致的序列。
16.一种非天然存在的核酸，所述非天然存在的核酸包括与SEQ ID NO:21-28或SEQ IDNO:49-54中的任意一者至少90％一致的序列。
17.如权利要求1-16中任一项所述的非天然存在的核酸，其中所述非天然存在的核酸不编码融合蛋白。
18.一种宿主细胞，所述宿主细胞包括权利要求1-17中任一项所述的非天然存在的核酸。
19.如权利要求18所述的宿主细胞，其中所述非天然存在的核酸被整体或部分整合到所述宿主细胞的基因组中。
20.一种宿主细胞，所述宿主细胞包括一种或更多种非天然存在的核酸，所述非天然存在的核酸包括：
21.如权利要求20所述的宿主细胞，其中所述启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
22.如权利要求21所述的宿主细胞，其中所述RBS包括与SEQ ID NO:10-17、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:38或SEQ ID NO:45中的一者至少90％一致的序列。
23.如权利要求19-22中任一项所述的宿主细胞，其中一种或更多种所述非天然存在的核酸还包括终止子。
24.如权利要求19-23中任一项所述的宿主细胞，其中一种或更多种所述非天然存在的核酸被整合到所述宿主细胞的基因组中。
25.如权利要求19-23中任一项所述的宿主细胞，其中一种或更多种所述非天然存在的核酸在质粒上表达。
26.如权利要求19-25中任一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是细菌细胞。
27.如权利要求26所述的宿主细胞，其中所述细菌细胞是E.coli细胞。
28.如权利要求19-27中任一项所述的宿主细胞，其中一种或更多种所述核酸序列编码SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:29的氨基酸序列。
29.如权利要求19-27中任一项所述的宿主细胞，其中一种或更多种所述核酸序列编码SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:31的氨基酸序列。
30.如权利要求19-27中任一项所述的宿主细胞，其中一种或更多种所述核酸编码SEQID NO:6或SEQ ID NO:29的氨基酸序列并且还编码SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:31的氨基酸序列。
31.一种宿主细胞，所述宿主细胞包括一种或更多种非天然存在的核酸，所述非天然存在的核酸包括：
32.如权利要求31所述的宿主细胞，其中所述启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
33.如权利要求31或32所述的宿主细胞，其中一种或更多种所述...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种非天然存在的核酸，所述非天然存在的核酸包括：
2.如权利要求1所述的非天然存在的核酸，其中所述启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
3.如权利要求1或2所述的非天然存在的核酸，其中所述非天然存在的核酸还包括终止子。
4.如权利要求1-3中任一项所述的非天然存在的核酸，其中：
5.如权利要求1-4中任一项所述的非天然存在的核酸，其中：
6.如权利要求3-5中任一项所述的非天然存在的核酸，其中所述启动子、所述rbs和所述终止子可操作地连接至权利要求1(b)的所述核酸。
7.如权利要求1-6中任一项所述的非天然存在的核酸，其中权利要求1(b)中的所述核酸编码seq id no:6或seq id no:29的氨基酸序列。
8.如权利要求1-6中任一项所述的非天然存在的核酸，其中权利要求1(b)中的所述核酸编码seq id no:7或seq id no:31的氨基酸序列。
9.如权利要求1-6中任一项所述的非天然存在的核酸，其中权利要求1(b)中的所述核酸编码seq id no:6或seq id no:29的氨基酸序列并且也编码seq id no:7或seq id no:31的氨基酸序列。
10.一种非天然存在的核酸，所述非天然存在的核酸包括：
11.如权利要求10所述的非天然存在的核酸，其中所述第一启动子和/或所述第二启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
12.如权利要求10或11所述的非天然存在的核酸，其中所述非天然存在的核酸还包括至少一个终止子。
13.如权利要求10-12中任一项所述的非天然存在的核酸，其中：
14.如权利要求10-13中任一项所述的非天然存在的核酸，其中：
15.如权利要求10-14中任一项所述的非天然存在的核酸，其中所述非天然存在的核酸包括与seq id no:21-28或seq id no:49-54中的任意一者至少90％一致的序列。
16.一种非天然存在的核酸，所述非天然存在的核酸包括与seq id no:21-28或seq idno:49-54中的任意一者至少90％一致的序列。
17.如权利要求1-16中任一项所述的非天然存在的核酸，其中所述非天然存在的核酸不编码融合蛋白。
18.一种宿主细胞，所述宿主细胞包括权利要求1-17中任一项所述的非天然存在的核酸。
19.如权利要求18所述的宿主细胞，其中所述非天然存在的核酸被整体或部分整合到所述宿主细胞的基因组中。
20.一种宿主细胞，所述宿主细胞包括一种或更多种非天然存在的核酸，所述非天然存在的核酸包括：
21.如权利要求20所述的宿主细胞，其中所述启动子可通过乳糖和/或半乳糖诱导。
22.如权利要求21所述的宿主细胞，其中所述rbs包括与seq id no:10-17、seq id no:37、seq id no:38或seq id no:45中的一者至少90％一致的序列。
23.如权利要求19-22中任一项所...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·博贝尔，J·I·布切尔，J·M·加尔丁，J·金，S·马尔，M·麦克曼，K·S·帕特尔，A·瓦尔德曼，
申请(专利权)人：银杏生物制品公司，
类型：发明
国别省市：
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