HIV-感染个体的治疗性免疫制造技术

本发明专利技术提供了用于在感染了人免疫缺陷病毒（“ＨＩＶ”）的个体中诱导治疗性免疫应答的改善的方法。所述方法包括给具有受控制的病毒血症的个体施用表达ＨＩＶ抗原的腺病毒疫苗组合物。以这种方式对感染个体进行免疫，能够诱导针对所述病毒的细胞介导的免疫应答，它在应答的水平和应答的广度方面都是显著的。随后发生的治疗性免疫应答能够有效地保持病毒的低滴度，因此，提供了减弱个体对抗病毒治疗依赖性的前景。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】 对相关申请的交叉引用本申请要求2003年9月18日提交的美国临时申请流水号60/504,522的权益。有关联邦资助的开发的声明不适用对缩微胶片附录的参考不适用专利
本专利技术披露了用于在具有受控制的病毒血症的HIV-感染个体中包含病毒复制的有效方法。该方法包括用含有编码HIV抗原的外源核酸的重组的复制缺陷型腺病毒对所述个体进行免疫。专利技术背景人免疫缺陷病毒(HIV)是获得性人免疫缺陷综合征(AIDS)和相关疾病的病原体。HIV是逆转录病毒科的RNA病毒，并且表现出所有逆转录病毒所具有的5′LTR-gag-pol-env-LTR 3′组构。被称作原病毒的HIV的完整形式的长度为大约9.8Kb。病毒基因组的每一个末端包括被称作长末端重复(LTRs)的侧翼序列。HIV基因编码至少九种蛋白，并且被划分成三种类型主要结构蛋白(Gag，Pol，和Env)，调节蛋白(Tat和Rev)；和附属蛋白(Vpu，Vpr，Vif和Nef)。gag基因编码55-千道尔顿(kDa)的前体蛋白(p55)，p55是由未剪接的病毒mRNA表达的，并且由作为pol基因的产物的HIV蛋白酶进行蛋白水解加工。成熟的p55蛋白产物是p17(基质)，p24(衣壳)，p9(核壳体)和p6。所述pol基因编码病毒复制所必需的蛋白——逆转录酶，蛋白酶，整合酶和RNAse H。所述病毒蛋白是以Gag-Pol融合蛋白形式表达的，它是通过核糖体移码产生的160kDa的前体蛋白。病毒编码的蛋白酶能够通过蛋白水解将Pol多肽从Gag-Pol融合体上切割下来，并且将Pol多肽进一步切割成成熟蛋白，该成熟蛋白提供了蛋白酶(Pro，P10)，逆转录酶(RT，P50)，整合酶(IN，p31)和RNAse H(RNAse，p15)活性。nef基因编码早期辅助HIV蛋白(Nef)，业已证实它具有若干种活性，如下调CD4表达，干扰T-细胞激活，和刺激HIV传染性。env基因编码病毒包膜糖蛋白，该糖蛋白是作为160-千道尔顿(kDa)的前体(gp160)翻译的，然后被细胞蛋白酶切割，以便产生外部120-kDa包膜糖蛋白(gp120)和跨膜41-kDa包膜糖蛋白(gp41)。Gp120和gp41保持缔合，并且展示在病毒颗粒和HIV-感染细胞的表面上。tat基因编码长的形式和短的形式的Tat蛋白，它是一种RNA结合蛋白，是HIV复制所必需的转录反式激活剂。rev基因编码13kDa的Rev蛋白，它是一种RNA结合蛋白。Rev蛋白与病毒RNA的被称作Rev反应元件(RRE)的区域结合。Rev蛋白能促进未剪接的病毒RNA从细胞核转移到细胞质中。Rev蛋白是HIV晚期基因表达所需要的，因此是HIV复制所需要的。病毒表达的蛋白能够使得所述病毒进入靶细胞，并且指导病毒RNA复制，以便最终产生其他传染性病毒。除了其他共同受体分子之外，Gp120能结合位于辅助T-淋巴细胞，巨噬细胞和其他靶细胞表面上的CD4/趋化因子受体。X4(巨噬细胞亲嗜性)病毒表现出对CD4/CXCR4复合体的嗜好，而R5(T-细胞系亲嗜性)病毒与CD4/CCR5受体复合物相互作用。在gp120与CD4结合之后，gp41能介导决定病毒进入的融合事件。所述病毒然后与所述靶细胞融合并且进入靶细胞，此后发生的是通过RNA依赖性DNA聚合酶的作用，它的单链RNA基因组逆转录形成双链DNA。被称作原病毒的病毒DNA随后进入细胞核，在这里，病毒DNA指导新病毒RNA在细胞核内的产生，早期和晚期HIV病毒蛋白的表达，以及随后新的病毒颗粒的产生和细胞释放。在检测宿主中病毒负荷的能力方面的最新进展，证实了原发感染导致了所述病毒的大量产生和组织分布，随后是稳态水平的病毒(尽管在此期间经过了连续的病毒生产和更新)，最终导致病毒负荷的另一次爆发，由此导致临床AIDS的发作。生产性的受感染的细胞具有若干天时间的半衰期，而慢性或潜伏感染的细胞具有3周时间的半衰期，随后是非生产性的受感染的细胞，它具有长的半衰期(超过100天)，但是不会明显造成在疾病过程中出现的逐日的病毒负荷。CD4辅助T淋巴细胞的破坏，对于免疫防御来说是重要的，它是进展的免疫失调的主要原因，这是HIV感染的特征。CD4T-细胞的丧失，严重削弱了身体抵御大部分入侵者的能力，不过，它对病毒，真菌，寄生虫和某些细菌，包括分枝杆菌的防御具有特别严重的影响。对HIV感染个体的有效治疗方案已经可行，并且用于治疗感染了HIV个体的仪器也可以获得。业已证实能作为HIV复制的抑制剂的抗病毒剂(包括，但不局限于抗逆转录病毒治疗(″ART″))能非常成功地治疗AIDS和类似疾病；业已报导了用抗病毒药物有效治疗能在8周内将病毒负荷水平降低90％或更多，实现病毒负荷的连续降低，并最终在6个月内达到检测不到的水平。现有若干种类型的抗病毒化合物包括，但不局限于逆转录酶抑制剂(例如，叠氮胸苷(AZT)和依夫维瑞)；蛋白酶(例如，因地那韦和那非那韦)；和整合酶。不幸的是，这些药物对世界上很多地方的所述疾病没有显著作用。另外，在可以进行所述治疗选择的个体中，治疗将需要长期抗逆转录病毒治疗，以便保持低水平的病毒，并最终防止病毒反弹。为此，最近的努力集中在促进HIV-感染个体的免疫应答方面，业已通过给感染个体施用免疫球蛋白使所述个体接受了抗逆转录病毒治疗。所提到的文献采用HIV抗原作为免疫原，并且通过施用DNA、施用完整的灭活的(gp120-去除的)HIV-1疫苗或通过痘病毒载体(例如，ALVAC，NYVAC)施用而送递所述免疫原；例如，参见，Hoff和McNamara，1999The Lancet 3531723-1724；以及以下专利文献WO 98/08539；WO01/08702；WO 01/54701；和WO 02/095005。据申请人所知，以前感染了HIV的表现出受控制的病毒血症个体没有用包括编码HIV抗原的外源核酸的重组的，复制缺陷型腺病毒进行免疫。正如本文所披露的，该方法能诱导很高水平的性质上非常广的病毒特异性CD8+和CD4+T细胞应答。所述治疗性免疫应答能够确保具有有效维持低滴度病毒的能力，因此，提供了减弱个体对抗病毒治疗的依赖性的前景。在抵抗AIDS中重要的是产生用于HIV-感染个体的疫苗方案，这有助于在感染个体中恢复强的HIV-特异性细胞介导的免疫应答。专利技术概述本专利技术提供了用于在感染了人免疫缺陷病毒(″HIV″)的个体中诱导治疗性免疫应答的方法。该方法包括对表现出病毒血症的主动控制的感染个体进行免疫(通过主动免疫应答或通过用抗病毒剂治疗)，包括施用含有编码至少一种HIV抗原的外源核酸的重组的，复制缺陷型腺病毒。用这种方式免疫，能诱导多种性质的病毒特异性CD8+和CD4+T细胞应答的显著增强。随后发生的治疗性免疫应答，具有有效保持低滴度病毒的能力，因此，提供了减弱个体对抗病毒治疗依赖性的前景。细胞毒性T淋巴细胞(″CTL″)构成了免疫系统细胞应答的重要部分。为了诱导CTL免疫应答，抗原必须在细胞内合成或者导入细胞，然后通过蛋白酶体复合物加工成小的肽，并且转运到内质网/高尔基复合物分泌途径，以便最终与主要组织相容性复合体(MHC)I类蛋白缔合。CD8+T淋巴细胞通过T细胞受体(TCR)和CD本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于在感染了ＨＩＶ的个体中诱导针对人免疫缺陷病毒（“ＨＩＶ”）的细胞介导的免疫应答的方法，该方法包括：给ＨＩＶ－感染的个体施用重组的，复制缺陷型腺病毒，该病毒包括编码ＨＩＶ－１抗原的核酸；其中，在施用之前所述个体经历了Ｈ ＩＶ病毒拷贝数量的减少。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2003-9-18 60/504,5221.一种用于在感染了HIV的个体中诱导针对人免疫缺陷病毒(″HIV″)的细胞介导的免疫应答的方法，该方法包括给HIV-感染的个体施用重组的，复制缺陷型腺病毒，该病毒包括编码HIV-1抗原的核酸；其中，在施用之前所述个体经历了HIV病毒拷贝数量的减少。2.如权利要求1的方法，其中，所述HIV病毒拷贝数量的减少是至少部分是由于用抗病毒剂进行的治疗。3.如权利要求2的方法，其中，所述抗病毒剂包括下列成分中的一种或多种蛋白酶抑制剂，逆转录酶抑制剂，和整合酶抑制剂。4.如权利要求2的方法，其中，所述抗病...

【专利技术属性】
技术研发人员：EA埃米尼，JW希弗，DR卡西米洛，D哈祖达，WA施莱夫，
申请(专利权)人：默克公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]