一种快速制备T细胞的方法技术

本发明专利技术涉及快速制备T细胞的方法，具体提供一种制备表达功能分子的T细胞的方法，包括步骤：1)PBMC复苏缓解1～4小时，2)由PBMC分选并活化CD3+T细胞10～36小时，3)使用含有功能分子的编码序列的逆转录病毒转导CD3+T细胞得到所述表达功能分子的T细胞。本发明专利技术方法大幅缩短表达功能分子的T细胞的总制备时长，制备得到的T细胞具有高活化状态、更高的T细胞干性、更优秀的扩增及肿瘤杀伤能力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物领域，具体涉及免疫细胞治疗领域。

技术介绍

1、嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,car)t细胞是一种细胞治疗产品，利用基因工程改造t细胞，使细胞表面表达识别肿瘤恶性细胞特异性抗原的car分子，引导car-t细胞与恶性细胞结合并启动t细胞杀伤功能。car分子序列结构包含特异性识别抗原的单链抗体序列、影响靶向效率的铰链区、固定car分子于细胞膜上的跨膜区、传递胞内信号的t细胞激活结构域及加强信号传递的胞内共刺激结构域。借由设计靶向不同抗原的单链抗体序列，能够制造出针对表达不同抗原的肿瘤恶性细胞。car基因序列由逆转录病毒载体携带并转导至患者自体或供者异体来源的活化t细胞中，经体外培养扩增后，回输患者体内。在体内，car-t细胞的单链抗体序列与其靶向的肿瘤恶性细胞抗原结合，引起胞内结构域下游信号传递，启动t细胞毒杀功能，达到清除肿瘤恶性细胞的效果。

2、cd19 car-t细胞作为第一个商业化的car-t细胞疗法，在美国已逐渐开始被广泛运用于治疗b-all、lbcl及fl，并有极高的市场收益。然而，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备表达功能分子的T细胞的方法，包括步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)包括：将PBMC在培养基中以适合PBMC生长的条件培养1～4小时，

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤2)包括：

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，

5.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤3)包括：在培养基中以适合逆转录病毒转导CD3+T细胞的条件共培养逆转录病毒和CD3+T细胞12-36小时，

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，

7.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法还包...

【技术特征摘要】

1.一种制备表达功能分子的t细胞的方法，包括步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)包括：将pbmc在培养基中以适合pbmc生长的条件培养1～4小时，

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤2)包括：

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，

5.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤3)包括：在培养基中以适合逆转录病毒转导cd3+t细胞的条件共培养逆转录病毒和cd3+t细胞12-36小时，

6.如权利要求5所述的方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：王海鹰，曹士婷，顾明园，熊青卉，胡红明，
申请(专利权)人：上海恒润达生生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：