【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，更具体地，涉及一种用于检测肺结节良恶性的试剂、试剂盒及应用。
技术介绍
1、低剂量螺旋ct对中国高危人群早期肺癌筛查发现肺结节阳性率高达22.9％，其中肺结节患者中恶性结节比例达6.34％，而早期肺癌(ⅰa期)手术治疗5年生存率可达到90％以上。因此，肺结节筛查在早期肺癌诊断中具有重要意义。
2、近年来，随着影像学技术的进步和设备的发展，尤其是ct检查的普及，肺结节的检出率明显上升，肺结节的临床处理与决策逐渐成为困扰临床医生的重要问题。
3、因此，研究精确且较无创的诊断方法，精准识别良恶性肺结节，减少患者的漏检率，对肺癌的早筛、早诊、早治工作极为关键。
技术实现思路
1、针对现有技术的缺陷，本专利技术的目的在于提供了一种用于检测肺结节良恶性的试剂、试剂盒及应用，以改善现有技术对恶性肺结节的检出率低，对于肺结节良恶性检测易出现假阴性/假阳性结果、准确度低等的技术问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了一种试剂在制备肺结节良恶性诊断产品中的应用，所述试剂是检测样本中基因的目标区域甲基化水平的试剂；
3、以grch38.p14为参考基因组，所述目标区域包括chr10:117140125-117140525正链的全长区域或部分区域，和/或chr4:173509216-173509616负链的全长区域或部分区域，和/或chr15:89409068-89409468正链的全长区域或部分区域。
4、优选地，所
5、优选地，所述肺结节良恶性诊断产品包括试剂盒、芯片、膜条、蛋白阵列中的至少一种。
6、本专利技术还提供了一种用于检测肺结节良恶性的试剂，其为用于检测样本中基因的目标区域甲基化水平的试剂，以grch38.p14为参考基因组，所述目标区域包括chr10:117140125-117140525正链的全长区域或部分区域，和/或chr4:173509216-173509616负链的全长区域或部分区域，和/或chr15:89409068-89409468正链的全长区域或部分区域。
7、优选地，所述chr4:173509216-173509616负链的部分区域包括chr4:173509393-173509480负链。
8、优选地，所述试剂包括用于检测所述目标区域甲基化水平的甲基化引物对和非甲基化引物对；
9、其中，所述试剂包括用于检测chr10:117140125-117140525正链的甲基化水平的第一甲基化引物对和第一非甲基化引物对；和/或，
10、用于检测chr4:173509393-173509480负链的甲基化水平的第二甲基化引物对和第二非甲基化引物对；和/或，
11、用于检测chr15:89409068-89409468正链的甲基化水平的第三甲基化引物对和第三非甲基化引物对。
12、优选地，所述第一甲基化引物对的核苷酸序列如seq id no.10～11所示；所述第一非甲基化引物对的核苷酸序列如seq id no.12～13所示；所述第二甲基化引物对的核苷酸序列如seq id no.18～19所示；所述第二非甲基化引物对的核苷酸序列如seq id no.20～21所示；所述第三甲基化引物对的核苷酸序列如seq id no.22～23所示；所述第三非甲基化引物对的核苷酸序列如seq id no.24～25所示。
13、优选地，所述试剂包括用于检测所述目标区域甲基化水平的甲基化引物对和探针；
14、其中，所述试剂包括用于检测chr10:117140125-117140525正链的甲基化水平的第一甲基化引物对和第一探针；和/或，
15、用于检测chr4:173509393-173509480负链的甲基化水平的第二甲基化引物对和第二探针；和/或，
16、用于检测chr15:89409068-89409468正链的甲基化水平的第三甲基化引物对和第三探针。
17、进一步优选地，所述试剂包括如下组合中的至少一组：
18、seq id no.10～11所示的第一甲基化引物对和seq id no.28所示的第一探针；
19、seq id no.18～19所示的第二甲基化引物对和seq id no.29所示的第二探针；
20、seq id no.22～23所示的第三甲基化引物对和seq id no.30所示的第三探针。
21、本专利技术还提供了一种用于检测肺结节良恶性的试剂盒，其包括所述试剂。
22、优选地，所述试剂盒还包括内参基因的上下游引物对及探针、dna提取试剂、dna纯化试剂、甲基化转化试剂、扩增试剂、阳性对照品和阴性对照品中的一种或多种。
23、总体而言，通过本专利技术所构思的以上技术方案与现有技术相比，具有以下有益效果：
24、本专利技术提供的一种用于检测肺结节良恶性的试剂、试剂盒，通过检测样本中基因的目标区域甲基化水平能够有效区分恶性肺结节受试者和良性肺结节受试者，实现低侵袭性、低成本、高灵敏性、高特异性的检测肺结节良恶性。具体地，上述试剂盒检测恶性肺结节血浆样本的总灵敏性可达88.7％，其中，检测实性结节的灵敏度可达85.7％，检测亚实性结节的灵敏度可达90.6％。此外，上述试剂盒检测良性肺结节血浆样本的特异性可达93.7％，检测准确度高，可有效提高恶性肺结节的检出率，降低假阴性结果的检出，避免良性肺结节的过度诊疗。
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1.一种试剂在制备肺结节良恶性诊断产品中的应用，其特征在于，所述试剂是检测样本中基因的目标区域甲基化水平的试剂；
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述诊断包括恶性肺结节的鉴别诊断、微小病灶残留评估及动态监测、恶性肺结节复发及预后的辅助判断、药物疗效评估及耐药监测中的一种或多种；
3.一种用于检测肺结节良恶性的试剂，其特征在于，其为用于检测样本中基因的目标区域甲基化水平的试剂，以GRCh38.p14为参考基因组，所述目标区域包括Chr10:117140125-117140525正链的全长区域或部分区域，和/或Chr4:173509216-173509616负链的全长区域或部分区域，和/或Chr15:89409068-89409468正链的全长区域或部分区域。
4.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于，所述Chr4:173509216-173509616负链的部分区域包括Chr4:173509393-173509480负链。
5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于，其包括用于检测所述目标区域甲基化水平的甲基化引物对和非甲基化
6.根据权利要求5所述的试剂，其特征在于，所述第一甲基化引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.10～11所示；所述第一非甲基化引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.12～13所示；所述第二甲基化引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.18～19所示；所述第二非甲基化引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.20～21所示；所述第三甲基化引物对的核苷酸序列如SEQID NO.22～23所示；所述第三非甲基化引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.24～25所示。
7.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于，其包括用于检测所述目标区域甲基化水平的甲基化引物对和探针；
8.根据权利要求7所述的试剂，其特征在于，其包括如下组合中的至少一组：
9.一种用于检测肺结节良恶性的试剂盒，其特征在于，其包括权利要求3至8任一项所述的试剂。
10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，其还包括内参基因的上下游引物对及探针、DNA提取试剂、DNA纯化试剂、甲基化转化试剂、扩增试剂、阳性对照品和阴性对照品中的一种或多种。
...【技术特征摘要】
1.一种试剂在制备肺结节良恶性诊断产品中的应用，其特征在于，所述试剂是检测样本中基因的目标区域甲基化水平的试剂；
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述诊断包括恶性肺结节的鉴别诊断、微小病灶残留评估及动态监测、恶性肺结节复发及预后的辅助判断、药物疗效评估及耐药监测中的一种或多种；
3.一种用于检测肺结节良恶性的试剂，其特征在于，其为用于检测样本中基因的目标区域甲基化水平的试剂，以grch38.p14为参考基因组，所述目标区域包括chr10:117140125-117140525正链的全长区域或部分区域，和/或chr4:173509216-173509616负链的全长区域或部分区域，和/或chr15:89409068-89409468正链的全长区域或部分区域。
4.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于，所述chr4:173509216-173509616负链的部分区域包括chr4:173509393-173509480负链。
5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于，其包括用于检测所述目标区域甲基化水平的甲基化引物对和非...
【专利技术属性】
技术研发人员：李书杨，袁雨文，万慧，阮彦添，梁嘉琳，
申请(专利权)人：武汉艾米森生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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