【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因测序,涉及一种单细胞快速测序分析方法。
技术介绍
1、细胞是生物结构与功能的基本单位,形态类型千差万别。通过细胞基因组学,可以描述细胞特性及功能,但易用性和规模的限制阻碍了其广泛应用。
2、单细胞(single-cell)高通量液滴测序(drop-seq)技术,是该技术将细胞隔离在微小的液滴中,装上用于扩增的条码引物,由此检测数以千计的细胞。drop-seq能够帮助生物学家进一步发现和分类人体细胞,绘制大脑等复杂组织的细胞多样性图谱,更好地了解干细胞分化,获得更多疾病的遗传学信息。但该技术中的油相不能很好地包裹水相,导致细胞被裂解前液滴已经破损,从而导致poly(dt)不能高效富集mrna,影响后续的测序结果。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种单细胞快速测序分析方法,具有良好的微滴稳定性及poly(dt)富集mrna效率高的特点。
2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现:
3、一种单细胞快速测序分析方法,包含以下步骤
...【技术保护点】
1.一种单细胞快速测序分析方法,其特征在于,包含以下步骤:先将细胞悬浮液、带有分子条形码的微珠悬浮液及细胞裂解液泵至微流体装置,汇聚形成层流,再与液滴生成油汇聚,形成单分散的微滴,随后裂解微滴,最后进行PCR扩增,并进行测序分析。
2.根据权利要求1所述的一种单细胞快速测序分析方法,其特征在于,所述的微流体装置包含:核心为一块玻璃微流控芯片,其联通四个输入管道及一个输出管道。
3.根据权利要求1所述的一种单细胞快速测序分析方法,其特征在于,所述的带有分子条形码的微珠由引物及磁珠组成,其引物的序列包含四个部分:PCR primer、12bp的Ce
...【技术特征摘要】
1.一种单细胞快速测序分析方法,其特征在于,包含以下步骤:先将细胞悬浮液、带有分子条形码的微珠悬浮液及细胞裂解液泵至微流体装置,汇聚形成层流,再与液滴生成油汇聚,形成单分散的微滴,随后裂解微滴,最后进行pcr扩增,并进行测序分析。
2.根据权利要求1所述的一种单细胞快速测序分析方法,其特征在于,所述的微流体装置包含:核心为一块玻璃微流控芯片,其联通四个输入管道及一个输出管道。
3.根据权利要求1所述的一种单细胞快速测序分析方法,其特征在于,所述的带有分子条形码的微珠由引物及磁珠组成,其引物的序列包含四个部分:pcr primer、12bp的cellbarcode、8bp的umi和30bp的poly(dt)序列。
4.根据权利要求2所述的一种单细胞快速测序分析方法,其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员:张泽龙,卢东培,杨俊,游涛,黄家明,
申请(专利权)人:广州君瑞康生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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