【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，具体涉及一种胶膜菌属真菌在促进白及中白及苷的合成中的应用。
技术介绍
1、白及(bletilla striata(thunb.)reiehb.f.)亦称白芨、白及子，为多年生兰科白及属地生草本植物，主要分布于我国湖北、湖南、贵州、云南及沿海等地区。白及作为一种中药材，以干燥块茎入药，并具有收敛止血、消肿生肌等功效，多用于治疗外伤出血、吐血、皮肤皲裂、肿胀和溃疡等病症。白及块茎中的化合物组成超过150种，其中白及多糖是其干块茎中组成最丰富的一类物质，含量最高可达60％，白及多糖也是公认的指标性成分。然而，《中国药典》(2020年版)对白及的指标性成分由原来的多糖类物质更换为1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(c34h46o17，别名为白及苷，即militarine，后文均以此为名)，militarine也渐渐成为广大研究者所重视研究的对象。现代研究表明，白及中的militarine具有益智和延缓衰老，防治老年痴呆的功能，在白及主要成分中含量相对较高。因此，如何提升白及块茎中白及苷(militarine)药效成分的含量备受研究者和业界青睐和关注。
2、菌根真菌与宿主植物之间存在互利共生的关系，菌根真菌不仅能够维持植物的生长健康，还能通过与植物共生促进寄主植物次生代谢产物的累积。研究发现，菌根真菌接种虎杖后，能调节虎杖的糖分积累，使其次生代谢产物发生变化。也有报道(li q，ding g，lib，et al.transcriptome analysis of genes invol
技术实现思路
1、申请人通过真菌分离纯化技术从兰科白及属植物白及(bletilla striata.)根系中分离获得的菌根真菌，经鉴定为一株胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌，命名为bj1，并发现该菌株能促进种子萌发生长，但未见其促进白及次生代谢产物累积的相关研究报道。militarine是中药白及质控指标成分，也是功效成分，大多研究主要集中于对其药理药效及不同产地白及样品中相关含量测定评价，未见文献开展对胶膜菌属真菌调控militarine累积的研究。为此，本专利采用代谢组学(uplc-ms)方法，公开了一种bj1菌株促进白及militarine合成累积的用途，为高品质中药白及培育奠定基础。
2、一方面，本专利技术提供了一种胶膜菌属真菌在促进白及中白及苷的合成中的应用，所述胶膜菌属真菌为胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌bj1，保藏号为cgmcc no.40773。
3、本专利技术通过胶膜菌属(tulasnella sp.)bj1与白及幼苗进行田间共培养，发现该菌株能显著促进白及中militarine的合成。通过uplc-ms技术测定发现，bj1能显著提高白及中militarine代谢物的响应值，从而提高militarine相对含量。
4、另一方面，本专利技术还提供了一种胶膜菌属真菌在制备促进白及中白及苷的合成的制剂中的应用，所述胶膜菌属真菌为胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌bj1，保藏号为cgmccno.40773。
5、另一方面，本专利技术还提供了一种用于促进白及中白及苷的合成的制剂，活性成分包含胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌bj1，保藏号为cgmccno.40773。
6、具体的，将所述胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌bj1接种到发酵培养基中培养后，得到的发酵液即为所述用于促进白及中白及苷的合成的制剂。
7、培养温度为25℃，培养时间为5-7天。
8、另一方面，本专利技术还提供了一种促进白及中白及苷的合成的方法，使用胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌bj1和白及幼苗进行共培养，或者将所述的制剂施用于白及幼苗的根部，
9、所述胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌bj1，保藏号为cgmcc no.40773。
10、所述施用的方式为喷洒。所述喷洒的量为165ml/袋。
11、通过将白及幼苗(挑选长势相近(株高20-22cm)，块茎大小均等(老球茎长2.1-2.8cm，茎粗0.5-0.6cm，茎杆长5-6cm，球茎直径0.7-0.9cm，鲜重8-10g，老球茎重量1-2g)，植株活力充沛的白及苗为实验对象)与胶膜菌属真菌菌株共培养于田间育苗土壤中(基质配比椰糠∶珍珠粉∶泥炭＝1∶1∶1)，大棚采用自然光照，光照过强时加1～2层70％遮阳网，控制光照强度低于15000lx，浇水次数一周2-3次。共设计2组，包括空白组和bj1组，之后约每个月采样1次，合计采样4次。按每月30天计算，最后将样品处理得到白及块茎放于-80℃条件下保存备用。
12、本专利技术通过液相色谱-质谱联用(uplc-ms)的方法，比较不同月份中各自的代谢产物，以确定其中militarine的含量变化，并进行定性、定量分析，揭示胶膜菌属(tulasnellasp.)bj1与1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯合成之间的相互关系。
13、1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯，别名：白及苷，英文名：militarine，英文副名：militarin，分子式：c34h46o17，cas：58139-23-4，化学结构式如下：
14、
15、本专利技术所述的胶膜菌属(tulasnella sp.)bj1能够显著促进白及militarine成分的合成与积累，是白及栽培专用菌肥的备选菌株，具有较好的应用前景。
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1.一种胶膜菌属真菌在促进白及中白及苷的合成中的应用，所述胶膜菌属真菌为胶膜菌属(Tulasnella sp.)真菌BJ1，保藏号为CGMCC No.40773。
2.一种胶膜菌属真菌在制备促进白及中白及苷的合成的制剂中的应用，所述胶膜菌属真菌为胶膜菌属(Tulasnella sp.)真菌BJ1，保藏号为CGMCC No.40773。
3.一种用于促进白及中白及苷的合成的制剂，其特征在于，活性成分包含胶膜菌属(Tulasnella sp.)真菌BJ1，保藏号为CGMCC No.40773。
4.如权利要求3所述用于促进白及中白及苷的合成的制剂的制备方法，其特征在于，将所述胶膜菌属(Tulasnella sp.)真菌BJ1接种到发酵培养基中培养后，得到的发酵液即为所述用于促进白及中白及苷的合成的制剂。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，培养温度为25℃，培养时间为5-7天。
6.一种促进白及中白及苷的合成的方法，其特征在于，使用胶膜菌属(Tulasnellasp.)真菌BJ1和白及幼苗进行共培养，或者将权利要求3
7.如权利要求6所述促进白及中白及苷的合成的方法，其特征在于，所述施用的方式为喷洒。
8.如权利要求6所述促进白及中白及苷的合成的方法，其特征在于，所述共培养的光照强度低于15000lx。
...【技术特征摘要】
1.一种胶膜菌属真菌在促进白及中白及苷的合成中的应用，所述胶膜菌属真菌为胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌bj1，保藏号为cgmcc no.40773。
2.一种胶膜菌属真菌在制备促进白及中白及苷的合成的制剂中的应用，所述胶膜菌属真菌为胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌bj1，保藏号为cgmcc no.40773。
3.一种用于促进白及中白及苷的合成的制剂，其特征在于，活性成分包含胶膜菌属(tulasnella sp.)真菌bj1，保藏号为cgmcc no.40773。
4.如权利要求3所述用于促进白及中白及苷的合成的制剂的制备方法，其特征在于，将所述胶膜菌属(...
【专利技术属性】
技术研发人员：张春椿，叶岳宇，李石清，蒋福升，黎晓梅，陈曼，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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