用于制造成熟树突细胞的方法技术

本申请是关于一种用于从周边血单核细胞细胞(PBMC)制作成熟树突细胞的方法。此方法包含以下步骤：将所述PBMC以培养基处理，该培养基补充有白介素4(IL‑4)及粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子(GM‑CSF)，以制作未成熟树突细胞；以及将未成熟树突细胞以该培养基处理，其补充有IL‑4、GM‑CSF、肿瘤坏死因子α(TNF‑α)以及前列腺素E2(PGE2)以制作成熟树突细胞。根据本申请的实施方式，本发明专利技术方法所使用的PBMC是从白血球浓缩液或经冻存的周边血干细胞(PBSC)存品分离得来。

【技术实现步骤摘要】

本申请关于一种用于制造成熟树突细胞的方法。特别是关于从周边血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells，pbmcs)制造成熟树突细胞的方法。

技术介绍

1、树突细胞(dendritic cell，dc)可见于各种组织，其中树突细胞侦测恒定平衡并将抗原呈现给t细胞，从而在先天免疫反应与后天免疫反应之间建立联结。dc有两种功能性阶段，“成熟”与“未成熟”，分别可由不同特征区分之；而在次级淋巴器官中活化抗原特异性初始t细胞的能力是成熟dc的标志。因此，成熟dc通过作为潜在的抗原呈现细胞，在免疫系统的活化过程扮演重要角色，而且此关键位置，伴随其从单核球细胞产生树突细胞及摄取抗原的能力，使得dc可作为多种适应症的免疫治疗载体。

2、这几年来已经发展各种用来生产临床用成熟dc的方法逐渐发展；在这些方法中，从单核球细胞来衍生dc是最常见的方法。为此，从人类供体收集单核球细胞并在有细胞因子(例如，白介素(interleukin(il)-4)及生长因子(例如，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macroph本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种从周边血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)制造成熟树突细胞的方法，包含：

2.如权利要求1所述的方法，其中所述白血球浓缩液是从个体新鲜收集。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述冻存周边血干细胞存品是通过(i)将新鲜分离的所述周边血干细胞以及抗冻剂混合以制作周边血干细胞存品；以及(ii)使步骤(i)制作好的所述周边血干细胞存品在一室中接受冷冻处理，在所述冷冻处理中，所述室的环境温度是在约55至70分钟之内从约4℃降至约-95℃。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述室的环境温度是逐步地(i)...

【技术特征摘要】

1.一种从周边血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell，pbmc)制造成熟树突细胞的方法，包含：

2.如权利要求1所述的方法，其中所述白血球浓缩液是从个体新鲜收集。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述冻存周边血干细胞存品是通过(i)将新鲜分离的所述周边血干细胞以及抗冻剂混合以制作周边血干细胞存品；以及(ii)使步骤(i)制作好的所述周边血干细胞存品在一室中接受冷冻处理，在所述冷冻处理中，所述室的环境温度是在约55至70分钟之内从约4℃降至约-95℃。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述室的环境温度是逐步地(i)在21至25分钟之内从约4℃降至-7℃，(ii)在5至6分钟之内从约-7℃降至-25℃，(iii)在25至30分钟之内从-25℃降至-45℃，以及(iv)在4至9分钟之内从约-45℃降至-95℃。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述冻存周边血干细胞存品是存放于液态氮中。

6.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱宗杰，刘峻宇，黄子瀚，程谊珮，
申请(专利权)人：丽宝生医股份有限公司，
类型：发明
国别省市：