低结合表面涂层用于分析酪氨酸激酶抑制剂的用途制造技术

本公开讨论了一种分离酪氨酸激酶抑制剂或酪氨酸激酶抑制剂的代谢物的样品的方法，该方法包括将该样品注入沿流动路径具有一个或多个低结合涂覆表面的色谱系统中；使该样品流过该色谱系统；分离该样品；以及分析所分离的样品

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】低结合表面涂层用于分析酪氨酸激酶抑制剂的用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求
2021
年4月
27
日提交的名称为
″
Use of Low
‑
Bind Surface Coatings for Analysis of Tyrosine Kinase Inhibitors
＂的美国临时申请号
63/180,364
的优先权和权益
。
前述申请全文以引用方式并入本文
。


[0003]本公开涉及使用涂覆的流动路径来改善酪氨酸激酶抑制剂的色谱和样品分析
。
更具体地，本技术涉及使用具有涂覆的流动路径的色谱装置来分离样品中的分析物
、
使用包括涂覆的流动路径的流体系统来分离样品中的分析物
(
例如，血浆或血清样品中的酪氨酸激酶抑制剂
)
的方法，以及定制用于分离和分析酪氨酸激酶抑制剂的流体流动路径的方法
。

技术介绍

[0004]与金属相互作用的分析物通常被证明分离极具挑战性
。
期望具有分散程度最低的高效色谱系统，这要求流动路径的直径减小并且能够承受越来越快的流速下的越来越高的压力
。
因此，色谱流动路径选择的材料本质上通常是金属的
。
尽管存在以下事实：已知某些分析物
(
例如，小分子药剂
、
蛋白质
、/>聚糖
、
肽
、
寡核苷酸
、
杀虫剂
、
双膦酸
、
阴离子代谢物和两性离子比如氨基酸和神经递质
)
的特性与金属表面具有不利的相互作用，所谓的色谱次级相互作用
。
[0005]所提出的用于金属特异性结合相互作用的机制需要理解路易斯酸碱化学理论
。
纯金属和金属合金
(
连同它们的对应氧化物层
)
具有末端金属原子，该末端金属原子具有路易斯酸特性
。
更简单地，这些金属原子示出接受供体电子的倾向
。
对于带有正电荷的任何表面金属离子而言，这种倾向甚至更为明显
。
具有足够的路易斯碱特性的分析物
(
可提供非成键电子的任何物质
)
可潜在地吸附到这些位点，从而形成有问题的非共价络合物
。
正是这些物质被定义为与金属相互作用的分析物
。
[0006]许多小分子药物活性剂固有地含有充当路易斯碱的含氧和含氮残基
。
这些基团具有通过非键合电子相互作用与流动路径中的金属相互作用的能力
。
这限制了生物分子诸如肽的总体有效分离
。
大多数
(
如果不是全部
)
酪氨酸激酶抑制剂由一个或多个包含此类氧
、
氮或硫原子的芳香族和
/
或脂肪族杂环构成
。
[0007]使用金属流动路径的替代方案是使用由聚合物材料诸如聚醚醚酮
(PEEK)
构成的流动路径
。PEEK
管材与大多数聚合物材料一样，通过挤出方法形成
。
利用聚合物树脂，该制造方法可导致高度可变的内径
。
因此，
PEEK
柱硬件在保留时间中产生了不利的差异，如可从一根柱和下一根柱之间的切换所观察到的
。
通常，这种变化可以比金属构造的柱高三倍
。
[0008]因此，需要进行持续的努力，以减少分析物与金属色谱表面的螯合和次级色谱相互作用，从而有利于具有较高分辨率的色谱分离
。
另外，化合物分离和检测的可变性可以由许多因素引起
。
其中一个因素是化合物与分析柱的分析物
/
表面相互作用
。
此类相互作用可能是有问题的，尤其是在非常低的分析物浓度下
。
已经发现这对于酪氨酸激酶抑制剂尤其
如此
。

技术实现思路

[0009]在基于液相色谱的分离中，金属敏感分析物与分散在整个金属表面的活性位点的次级相互作用或吸附通常给分离带来挑战
。
为了解决金属流体系统中的分离遇到的问题，已经开发了使用涂层的柱硬件来限定低结合表面涂层
。
具有低结合表面涂层的柱硬件可以在谱带展宽
、
峰拖尾和
/
或回收率方面对色谱性能产生积极影响，这又可以提高基于液相色谱的测定
、
具体地基于液相色谱的肽图分析测定的分辨率
、
峰容量和
/
或定量准确度
。
[0010]TKI
的治疗活性可以通过建立个体化剂量方案来优化
。
最佳剂量方案可以通过测量接受
TKI
作为癌症化疗的一部分的受试者的血液中的药物浓度或在施用药物后产生的代谢物来确定
。
已经发现高压液相色谱
(HPLC)
是用于监测
TKI
和
TKI
代谢物的血液浓度的有效技术
。
然而，已经发现许多
TKI
和
TKI
代谢物可以与不锈钢流动路径管材相互作用，从而产生较差的峰强度
、
强烈的拖尾和大量的残留
。
这是在期望常规测定获得一致和准确结果的行业中关注的问题
。
最近的观察表明，柱和
LC
硬件也应认真考虑，以提高测定重现性和灵敏度
。
具体地，已观察到液相色谱
(LC)
中金属离子介导的吸附是导致峰形不佳
、
拖尾和敏感分析物回收率降低的因素
。
通过利用沿着流体途径的至少一些部分具有低结合表面涂层的色谱系统部件，可以在测定灵敏度
、
回收率和再现性方面实现改善
。
[0011]另外，对于酪氨酸激酶抑制剂分析，可以通过使用本公开的技术来增加样品吞吐量
。
可以通过减少峰拖尾和增加的分辨率来增加样品吞吐量
。
例如，如果杂质与天然峰紧密洗脱并且天然峰表现出一定程度的拖尾，则用户
(
例如，分析员
)
可以尝试延长梯度或运行时间，以将杂质分辨到有利于准确量化的峰之间可接受的分辨率
。
在不存在拖尾时，用户可以通过在梯度中使用更陡的斜率来缩短运行时间
。
这可以有效地更快
、
更紧密地一起洗脱所有物质
。
峰之间的分辨率虽然减小，但是对于测定仍然可能是足够的，因为不存在拖尾来干扰积分或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种分离和分析酪氨酸激酶抑制剂的方法，所述方法包括：将包含一种或多种酪氨酸激酶抑制剂的样品注入色谱系统中，其中所述样品由从受试者获得的血浆或血清制备，并且其中所述色谱系统包括金属流动路径，其中所述金属流动路径的至少一部分涂覆有低结合表面涂层；使所述样品流过所述色谱系统；将所述一种或多种酪氨酸激酶抑制剂与所述血浆或血清中的其他组分分离；以及将所分离的酪氨酸激酶抑制剂传送到检测器
。2.
根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括分析所分离的酪氨酸激酶抑制剂以确定存在于所述血浆或血清中的酪氨酸激酶抑制剂的身份和
/
或量
。3.
根据权利要求1所述的方法，其中所述样品包含两种或更多种酪氨酸激酶抑制剂，并且其中所述方法还包括将所述两种或更多种酪氨酸激酶抑制剂彼此分离并确定每种所分离的酪氨酸激酶抑制剂的身份和
/
或量
。4.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制剂包括伊马替尼
、
诺马替尼
(N
‑
去甲基伊马替尼
)、
达沙替尼和尼罗替尼中的至少一种
。5.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述色谱系统包括：包括样品针的样品注入器
、
联接到所述样品注入器的柱前加热器以及联接到所述柱前加热器的色谱柱，其中注入所述样品包括通过所述样品针将所述样品抽吸到所述色谱系统中并在所述样品进入所述色谱柱之前使所述样品通过所述柱前加热器
。6.
根据权利要求5所述的方法，其中所述样品针...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：英国质谱公司，
类型：发明
国别省市：