用于产生细胞的方法技术

本发明专利技术的目的是提供一种更好的用于产生窦内皮细胞的方法

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于产生细胞的方法


[0001]本专利技术涉及一种用于从窦内皮祖细胞产生窦内皮细胞的方法以及包含窦内皮细胞的细胞群
。

技术介绍

[0002]毛细血管，称为“血窦”，其在细胞内和细胞间具有各种大小的孔并且具有仅由不连续层构成的基膜，遍布肝或骨髓
。
构成血窦的窦内皮细胞
(sinusoidal endothelial cell)
对于维持肝或骨髓实质细胞的功能很重要
。
例如，为了实现针对各种器官
(
例如肝
)
疾病的药物开发或再生医学的目标，正在进行用于通过自组装培养细胞来制备再现器官的三维结构或者血管或其他血管通道的复杂结构的细胞结构
(
即类器官
)
的研究和开发
。
如果可以在肝类器官中再现与肝窦血管相对应的结构，则预期使用类器官的价值进一步增强，使得类器官还可以用于移植手术或血浆蛋白
(
例如因子
VIII)
产生
。
[0003]当从活体中收集和分离时，肝等的窦内皮细胞由于细胞状态差而难以维持其作为窦内皮细胞的状态或特性
。
因此，窦内皮细胞通常通过在培养环境中诱导其祖细胞
(
即窦内皮祖细胞
)
分化来产生
。
例如，以下被认为是用于产生窦内皮细胞的方法
。
非专利文献1陈述了诱导人
iPS
细胞分化成肝窦内皮细胞祖细胞/>(LSEC
祖细胞
)
，并且然后在低氧浓度下使用
TGFb1
受体抑制剂
(A83
‑
01)
对肝窦内皮细胞祖细胞进行处理很长一段时间
(14
天
)
，从而诱导分化成
CD32+
肝窦内皮细胞
(LSEC)。
通过该非专利文献1中描述的方法获得的细胞群中肝窦内皮细胞的纯度大约为小于
40
％
。
非专利文献2陈述了诱导人
ES
细胞分化成成血管细胞，然后在低氧浓度或正常氧浓度下使用
AMP、TGFb
抑制剂
、bFGF
等对其进行处理，从而诱导分化成
CD32+
肝窦内皮细胞
。
通过该非专利文献2中描述的方法获得的细胞群中肝窦内皮细胞的纯度在正常氧浓度下为
38.7
％，并且在低氧浓度下为
90.1
％
。
[0004]引用文献清单
[0005]非专利文献
[0006]非专利文献1：
Koui
等人
,Stem Cell Reports,9,490
‑
498,2017
[0007]非专利文献2：
Gage
等人
,Cell Stem Cell,27,254
‑
269,2020

技术实现思路

[0008]技术问题
[0009]用于从窦内皮祖细胞产生窦内皮细胞的方法可被改进，例如，所得细胞群中窦内皮细胞的纯度的进一步改进
。
[0010]本专利技术的目的是提供一种更好的用于产生窦内皮细胞的方法
。
[0011]问题的解决方案
[0012]本专利技术人已经发现，在含有选自白细胞介素
6(IL
‑
6)
家族的至少一种物质
(
细胞因子等
)(
例如白细胞介素
6(IL
‑
6)、
制瘤素
M(OSM)
或白细胞介素
11(IL
‑
11))
的培养基中培养窦内皮祖细胞提高了所得细胞群中窦内皮细胞的纯度，并且即使特别地在正常氧浓度下进
行培养，也可以实现高纯度
(
例如
95
％或更高
)。
[0013]具体地，本专利技术至少包括以下项
。
[0014][1][0015]一种用于从窦内皮祖细胞产生窦内皮细胞的方法，所述方法包括在含有选自白细胞介素
6(IL
‑
6)
家族的一种或更多种物质的培养基中培养所述窦内皮祖细胞的步骤
。
[0016][2][0017]根据
[1]所述的方法，其中选自所述
IL
‑6家族的所述一种或更多种物质至少包括白细胞介素
6(IL
‑
6)、
制瘤素
M(OSM)、
白细胞介素
11(IL
‑
11)、
睫状神经营养因子
(CNTF)、
白血病抑制因子
(LIF)、
心肌营养素
1(CT
‑
1)、
心肌营养素样细胞因子
1(CLC)、
白细胞介素
27(IL
‑
27)、
白细胞介素
35(Il
‑
35)、
白细胞介素
39(IL
‑
39)
或其组合
。
[0018][3][0019]根据
[1]所述的方法，其中选自所述
IL
‑6家族的所述一种或更多种物质至少包括
IL
‑
6、OSM、IL
‑
11
或其组合
。
[0020][3a][0021]根据
[1]所述的方法，其中选自所述
IL
‑6家族的所述一种或更多种物质为
IL
‑
6、OSM、IL
‑
11
或其组合
。
[0022][4][0023]根据
[1]所述的方法，其中选自所述
IL
‑6家族的所述一种或更多种物质至少包括
OSM。
[0024][4a][0025]根据
[1]所述的方法，其中选自所述
IL
‑6家族的所述一种或更多种物质为
OSM。
[0026][5][0027]根据
[1]至
[4]中任一项所述的方法，其中所述窦内皮祖细胞为肝窦内皮祖细胞，并且所述窦内皮细胞为肝窦内皮细胞
。
[0028][5a][0029]根据
[1]至
[4]中任一项所述的方法，其中所述肝窦内皮祖细胞为卵黄静脉造血内皮细胞或心内膜内皮细胞，并且所述窦内皮细胞为肝窦内皮细胞
。
[0030][6][0031]根据
[5]所述的方法，其中所述肝窦内皮祖细胞为卵黄静脉造血内皮细胞
。
[0032][7][0033]根据本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种用于从窦内皮祖细胞产生窦内皮细胞的方法，所述方法包括在含有选自白细胞介素
6(IL
‑
6)
家族的一种或更多种物质的培养基中培养所述窦内皮祖细胞的步骤
。2.
根据权利要求1所述的方法，其中选自所述
IL
‑6家族的所述一种或更多种物质至少包括白细胞介素
6(IL
‑
6)、
制瘤素
M(OSM)、
白细胞介素
11(IL
‑
11)、
睫状神经营养因子
(CNTF)、
白血病抑制因子
(LIF)、
心肌营养素
1(CT
‑
1)、
心肌营养素样细胞因子
1(CLC)、
白细胞介素
27(IL
‑
27)、
白细胞介素
35(IL
‑
35)、
白细胞介素
39(...

【专利技术属性】
技术研发人员：武部贵则，佐伯宪和，
申请(专利权)人：武田药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：