一种胶原蛋白的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种胶原蛋白的纯化方法，将粗品通过过滤

【技术实现步骤摘要】
一种胶原蛋白的纯化方法


[0001]本专利技术属于蛋白纯化领域，具体涉及一种胶原蛋白的纯化方法
。

技术介绍

[0002]胶原蛋白是一种细胞外蛋白质，它是由3条肽链拧成螺旋形的纤维状蛋白质，富含除色氨酸和半胱氨酸外的
18
种氨基酸，其中维持人体生长所必需的氨基酸共有7种
。
胶原蛋白的组成中甘氨酸占比约
30
％，脯氨酸和羟脯氨酸共占约
25
％，是各种蛋白质中含量最高的，丙氨酸
、
谷氨酸的含量也比较高，同时还含有在一般蛋白中少见的羟脯氨酸和焦谷氨酸和在其他蛋白质几乎不存在的羟基赖氨酸，故而胶原蛋白的营养十分丰富
。
胶原蛋白同时也是人体内含量最丰富的蛋白质，占全身总蛋白质的
30
％以上，是细胞外基质中最重要的组成成分
。
胶原蛋白独特的三螺旋结构使其拥有了良好的结构稳定性和生物相容性以及较低的免疫原性，这些独特的特性使其在食品
、
医药
、
组织工程及化妆品制造等领域有着本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种胶原蛋白的纯化方法，其特征在于，包含如下步骤：
1)
粗品过滤：将胶原蛋白粗品经过微孔滤膜过滤，得到过滤液1；
2)Ni
亲和层析：填料为以亲水性聚甲基丙烯酸酯为基质，镍离子螯合基团作为配基，上样过滤液1，经过由流动相
A1
和
B
组成的洗脱液进行洗杂和洗脱，得到洗脱液1，所述流动相
A1
为磷酸盐缓冲液，所述流动相
B
为磷酸盐缓冲液
+
咪唑；
3)
二次过滤：使用纯水和稀醋酸稀释洗脱液1，然后采用所述微孔滤膜过滤，得到过滤液2；
4)
阳离子层析：填料为亲水性聚甲基丙烯酸酯为基质，表面键合
‑
SO3H
官能团，上样过滤液2，经过由流动相
C
和
D
组成的洗脱液进行洗杂和洗脱，得到高纯度胶原蛋白，所述流动相
C
为醋酸钠
‑
醋酸缓冲溶液，所述流动相
D
为醋酸钠
‑
醋酸缓冲溶液
+NaCl。2.
根据权利要求1所述的胶原蛋白的纯化方法，其特征在于，所述微孔滤膜为
0.22
μ
m
的混纤
‑
水系滤膜
。3.
根据权利要求1所述的胶原蛋白的纯化方法，其特征在于，
Ni
亲和层析填料为
Monomix MC60
‑
NTA Ni
；阳离子层析填料为
Monomix Mab60
‑
SP
，粒径为
60
μ
m
，孔径为，孔径为
4.
根据权利要求1所述的胶原蛋白的纯化方法，其特征在于，步骤
2)
的
Ni
亲和层析方法包括平衡
、
上样
、
后平衡
、
淋洗
、
洗杂和洗脱，平衡和后平衡阶段使用流动相
A2
，所述流动相
A2
为磷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：李海宾，
申请(专利权)人：苏州赛分科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：