一种检测磷酸奥司他韦干混悬剂有关物质的液相色谱方法技术

本发明专利技术属于药物分析技术领域，提供了一种检测磷酸奥司他韦干混悬剂有关物质的液相色谱方法，该方法可同时分离样品中多种杂质，同时也可有效分离磷酸奥司他韦干混悬剂辅料中苯甲酸钠峰与杂质Ⅲ峰，并提高磷酸奥司他韦与杂质

【技术实现步骤摘要】
一种检测磷酸奥司他韦干混悬剂有关物质的液相色谱方法


[0001]本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种分析测定磷酸奥司他韦干混悬剂有关物质的液相色谱方法
。

技术介绍

[0002]磷酸奥司他韦，是一种治疗和预防成人及小儿（具体年龄因国家而异，有的包括新生儿）甲
、
乙型流感病毒感染的药物，它是口服神经氨酸酶抑制剂类药物，它能通过人体代谢为神经氨酸酶抑制剂
(NI)
，从而抑制新的病毒颗粒形成，减少其在人体内的传播，缓解流感症状
。
磷酸奥司他韦被我国推荐为治疗
H1N1
和
H7N9
流感的首选药物
。
目前已在美国
、
日本
、
欧洲
、
中国等多个国家和地区上市，上市剂型有胶囊
、
干混悬剂及糖浆剂等
。
[0003]磷酸奥司他韦化学名为（
3R
，
4R
，
5S
）
‑4‑
乙酰氨基
‑5‑
氨基
‑3‑
（1‑
乙基丙氧基）
‑1‑
环己烯
‑1‑
羧酸乙酯磷酸盐，结构式如下：
[0004]。
[0005]磷酸奥司他韦干混悬剂除印度药典（
IP
）收载外，未被其他药典收载
。
目前各国药典收载的主要是磷酸奥司他韦原料
、
磷酸奥司他韦胶囊及磷酸奥司他韦小儿口服液，各药典标准中有关物质检测方法均为等度洗脱，流动相组成基本一致，仅比例略有差异
。
[0006]磷酸奥司他韦干混悬剂中可见的杂质包括杂质
I、
杂质
II、
杂质
III、
杂质
IV、
杂质
V、
杂质
VII
，其结构如下所示
。
除此之外，磷酸奥司他韦干混悬剂辅料中还含有苯甲酸钠，在以上药典方法中苯甲酸钠与杂质Ⅲ依次出峰，苯甲酸钠峰与杂质Ⅲ峰无法达到有效的分离，且磷酸奥司他韦干混悬剂原料与辅料山梨醇中的残存的还原糖发生美拉德反应可以产生杂质
V
与杂质
Ⅶ
，其中的杂质
V
与主峰分离差，即现有技术均无法实现磷酸奥司他韦干混悬剂中多种杂质的有效同时分离
。
[0007]。
[0008]因此，目前各国药典方法均不适用于磷酸奥司他韦干混悬剂有关物质的检查，也未检索到其他适用的公开的方法，所以研发一种适用于磷酸奥司他韦干混悬剂的有关物质检查方法非常有必要，以实现对磷酸奥司他韦干混悬剂的质量控制
。

技术实现思路

[0009]为了解决目前技术问题，本专利技术提供了一种可同时分离样品中多种杂质的分析方法，该方法也可同时有效分离磷酸奥司他韦干混悬剂辅料中苯甲酸钠峰与杂质Ⅲ峰，并提高磷酸奥司他韦与杂质
V
分离度的方法，整体操作简便易行，普遍适用性较高，并能达到较高灵敏度，能更好地控制磷酸奥司他韦干混悬剂的产品质量
。
[0010]本专利技术提供了一种检测磷酸奥司他韦干混悬剂中有关物质的液相色谱方法，包括以下步骤：
[0011](1)
系统适用性溶液的配制：取磷酸奥司他韦对照品及杂质Ⅰ对照品
、
杂质Ⅱ对照品
、
杂质Ⅲ对照品
、
杂质Ⅳ对照品
、
杂质
Ⅴ
对照品与杂质
Ⅶ
对照品各适量，加溶剂溶解并稀释制成系统适用性溶液；
[0012](2) 供试品溶液的配制：取磷酸奥司他韦干混悬剂适量，用溶剂溶解并稀释制成供试品溶液；
[0013](3)
空白辅料溶液的配制：取磷酸奥司他韦干混悬剂空白辅料适量，用溶剂溶解并
稀释制成空白辅料溶液；
[0014](4)
色谱试验：取系统适用性溶液
、
供试品溶液和空白辅料溶液各适量，注入液相色谱仪，记录色谱图；
[0015]其中，步骤
(1)~(3)
中所述溶剂为
0.003mol/L
磷酸溶液
‑
甲醇
‑
乙腈（
620∶245∶135
），步骤
(4)
中的色谱条件具体为：
[0016]检测器：紫外检测器；
[0017]色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，
Inertsil C8 4.6mm
×
250mm 5
μ
m
或效能相当的色谱柱；
[0018]流动相：流动相
A
：磷酸二氢钾溶液，其浓度为
0.02~0.07mol/L
，优选
0.05mol/L
，用碱性试剂调节
pH
值至
7.0~7.4
，优选
7.2
，所述碱性试剂为氢氧化钾溶液，浓度为
2mol/L~7mol/L
，优选
5mol/L
；流动相
B
：甲醇：乙腈
=345~145: 35~235
，优选比例
245:135
；梯度洗脱，具体程序为：
[0019]；
[0020]流速：
0.8
～
1.5ml/min
，优选
1.2ml/min
；
[0021]柱温：
40~50℃
，优选
45℃
；
[0022]检测波长：
200
～
220nm
，优选
207nm
；
[0023]进样体积：
75
µ
l。
[0024]本专利技术进一步提供了一种检测磷酸奥司他韦干混悬剂中有关物质的相色谱方法，包括以下步骤：
[0025](1)
系统适用性溶液的配制：取杂质Ⅰ对照品
、
杂质Ⅱ对照品
、
杂质Ⅲ对照品
、
杂质Ⅳ对照品
、
杂质
Ⅴ
对照品
、
杂质
Ⅶ
对照品与磷酸奥司他韦对照品各适量，加溶剂溶解并定量稀释制成每
1ml
中约含各杂质
0.75
μ
g
与奥司他韦
0.15mg
的混合溶液；
[0026](2) 供试品溶液的配制：取磷酸奥司他韦干混悬剂混悬液，精密称取适量（约相当于奥司他韦
15mg
；按测定每毫升重量，用于称样折算），置
100ml
量瓶中，加溶剂适量，超声振摇5分钟使磷酸奥司他韦溶解，放冷本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种检测磷酸奥司他韦干混悬剂中有关物质的液相色谱方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)
系统适用性溶液的配制：取磷酸奥司他韦对照品及杂质Ⅰ对照品
、
杂质Ⅱ对照品
、
杂质Ⅲ对照品
、
杂质Ⅳ对照品
、
杂质
Ⅴ
对照品与杂质
Ⅶ
对照品各适量，加溶剂溶解并稀释制成系统适用性溶液，各杂质结构如下所示：；
(2)
供试品溶液的配制：取磷酸奥司他韦干混悬剂适量，用溶剂溶解并稀释制成供试品溶液；
(3)
空白辅料溶液的配制：取磷酸奥司他韦干混悬剂空白辅料适量，用溶剂溶解并稀释制成空白辅料溶液；
(4)
色谱试验：取系统适用性溶液
、
供试品溶液和空白辅料溶液各适量，注入液相色谱仪，记录色谱图；其中，步骤（4）中的色谱条件为：色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相：流动相
A
：磷酸二氢钾溶液；流动相
B
：甲醇
‑
乙腈；梯度洗脱；梯度洗脱程序为：
。2.
根据权利要求1所述的检测磷酸奥司他韦干混悬剂中有关物质的液相色谱方法，其特征在于，色谱条件还包括：检测器：紫外检测器；流速：
1.2ml/min
；柱温：
40~50℃
；检测波长：
207nm
；进样体积：
75
µ
l。3.
根据权利要求1所述的检测磷酸奥司他韦干混悬剂中有关物...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘风云，明兰玉，马敏，
申请(专利权)人：山东百诺医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：