一种水痘带状疱疹病毒疫苗及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种水痘带状疱疹病毒疫苗及其应用

【技术实现步骤摘要】
一种水痘带状疱疹病毒疫苗及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种水痘带状疱疹病毒疫苗及其应用，特别涉及一种基于黑猩猩腺病毒载体
AdC68XY3
的新型水痘带状疱疹病毒疫苗及其应用
。

技术介绍

[0002]水痘带状疱疹病毒
(Varicella Zoster Virus
，
VZV)
是导致水痘
(Varicella or Chickenpox) 和带状疱疹
(Zoster or Shingles)
的病原体
。VZV
是一种普遍存在且特异性感染人类的
α
型疱疹病毒，在其他动物体中不会发生感染或受高度限制，这也使得
VZV
感染的病理机制研究极具挑战
。
流行病学证据表明，
VZV
主要感染人体的
T
淋巴细胞
、
上皮细胞和神经元细胞，且主要在细胞间传播，
CD4
和
CD8 T
淋巴细胞对宿主的抗病毒防御比特异性抗体更为重要
。
首次感染
VZV
会引发水痘，特别是在婴幼儿或免疫力缺陷的个体中会诱发局部或全身性的严重水痘疱疹
。
初次感染
VZV
时，
VZV
颗粒会通过
T
细胞病毒血症或皮肤复制部位，沿逆向轴突运输到不同部位神经节神经元中，建立潜伏感染直至个体康复也不会被彻底清除
。
伴随个体年龄的增长，或者免疫力缺陷个体的免疫功能下降，其针对
VZV
的细胞免疫 (Cell
‑
Mediated Immunity
，
CMI)
减弱，潜伏在神经元中的
VZV
被重新激活而发展为带状疱疹
。
成人水痘病人的抗病毒
CMI
研究表明，疾病严重程度与病毒载量呈正相关，与
T
淋巴细胞的抗病毒特异性细胞反应呈负相关
。
[0003]VZV
极具传染性，可通过空气途径传播
。
水痘病人和带状疱疹病人的皮肤疱疹囊泡中含有高度传染性的病毒，染毒皮肤细胞和
VZV(Cell
‑
free)
会经常脱落，被认为是空气传播病毒的主要来源
。
水痘每年都会在全世界范围内流行，特别是孩童但不排除成人，其感染发病一般在冬季和春季，发病率约为
13
‑
16
‰
。
由于针对
VZV
的
CMI
随年龄的增长而下降，带状疱疹发病率和严重性均有所增加
。
带状疱疹会导致一系列并发症，包括有慢性带状疱疹后神经痛
(Postherpetic Neuralgia
，
PHN)、
脑膜炎
、
脊髓炎
、
颅神经麻痹
、
血管病
、
角膜炎和视网膜病等其他严重的神经和眼部疾病，以及溃疡
、
肝炎和胰腺炎等多种内脏或胃肠道疾病
。 PHN
是带状疱疹最严重的并发症，约
15
％的带状疱疹病人长时间饱受病痛折磨
。
年龄也是 PHN
的重要风险因子，特别是超过
50
岁的人群
。
在带状疱疹疫苗上市之前，约
1/3
的成年人易发带状疱疹
。
[0004]预防性水痘疫苗的研发可追溯至
1970
年代，由日本科学家高桥理明
(Michiaki Takahashi) 成功研制减毒活疫苗株
(vOka)
，现在使用的冻干水痘减毒活疫苗是在其基础上形成
。
今天水痘疫苗极大改善了人们的生活质量，孩子们不会因为感染水痘生病缺课或者感染导致的严重病发症住院
。
对水痘易感的成人也可通过接种水痘疫苗获益
。
在最近一项随机对照的研究中发现水痘疫苗的有效率是
65.4
％
(
一剂
)
和
94.9
％
(
两剂
)。
[0005]早期带状疱疹疫苗的研发在水痘疫苗的基础上展开，默沙东公司于
2006
年在美国获批的 Zostavax
同样为减毒活疫苗，其
PFU(
空斑形成单位
)
是水痘疫苗的至少
12
倍
。
该疫苗有效率在
50
‑
59
岁人群中为
69.8
％，在
60
‑
69
岁人群中为
64
％；预防
PHN
的效力在
60
岁以上人群中为
66.5
％，在
70
岁以上人群中为
37
％
。
但由于该疫苗为减毒活病毒，接种后有一定增
加患病的风险，特别是免疫缺陷或免疫力低的人群，所以
Zostavax
暂未在中国获批
。
此外，葛兰素史克公司研制并于
2017
年上市的
Shingrix
为
VZVgE
重组蛋白疫苗
(AS01B
佐剂
)
，其有效率高于减毒疫苗，在
50
‑
59
岁人群中为
96.6
％，在
60
‑
69
岁人群中为
97.4
％，在
70
‑
79
岁人群中为
90
％，在
80
岁以上人群中为
89.2
％
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种基于黑猩猩腺病毒载体
AdC68XY3
的新型水痘带状疱疹病毒疫苗及其应用
。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术首先提供了一种重组病毒，所述重组病毒为如下
A1)
‑
A8) 中任一种：
[0008]A1)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因的
DNA
分子插入
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
得到的，表达水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白的重组腺病毒；
[0009]A2)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种重组病毒，为如下
A1)
‑
A8)
中任一种：
A1)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因的
DNA
分子插入
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
得到的，表达水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白的重组腺病毒；
A2)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和
CPG
序列的
DNA
分子插入
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
得到的，表达水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白的重组腺病毒；
A3)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和细胞因子
IL21
编码基因的
DNA
分子插入
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
得到的，表达水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白和细胞因子
IL21
的重组腺病毒；
A4)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和
T
细胞共刺激分子
CD40L
编码基因的
DNA
分子插入
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
得到的，表达水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白和
T
细胞共刺激分子
CD40L
的重组腺病毒；
A5)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因的
DNA
分子和含有三聚体孔蛋白
ProB
编码基因的
DNA
分子插入
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
得到的，表达水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白和三聚体孔蛋白
ProB
的重组腺病毒；
A6)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
水痘带状疱疹病毒
Orf9
蛋白编码基因和水痘带状疱疹病毒
Orf63
蛋白编码基因的
DNA
分子插入
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
得到的，表达水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白
、
水痘带状疱疹病毒
Orf9
蛋白和水痘带状疱疹病毒
Orf63
蛋白的重组腺病毒；
A7)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和水痘带状疱疹病毒
gH
蛋白编码基因的
DNA
分子插入
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
得到的，表达水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白和水痘带状疱疹病毒
gH
蛋白的重组腺病毒；
A8)
将含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和水痘带状疱疹病毒
gB
蛋白编码基因的
DNA
分子插入
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
得到的，表达水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白和水痘带状疱疹病毒
gB
蛋白的重组腺病毒；所述
AdC68XY3
‑
empty
空载病毒的基因组
DNA
的核苷酸序列如序列1所示
。2.
根据权利要求1所述的重组病毒，其特征在于：所述
CPG
序列如序列6所示
。3.
根据权利要求1或2所述的重组病毒，其特征在于：所述
A1)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因的
DNA
分子依次包括
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和
BGH polyA
信号
a
；所述
A2)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和
CPG
序列的
DNA
分子依次包括
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
含有4个连续重复的
CPG
序列的
DNA
分子和
BGH polyA
信号
a
；所述
A3)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和细胞因子
IL21
编码基因的
DNA
分子依次包括
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
连接子
p2a
序列
、
细胞因子
IL21
编码基因和
BGH polyA
信号
a
；所述
A4)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和
T
细胞共刺激分子
CD40L
编码基因的
DNA
分子依次包括
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
连接子
p2a
序列
、T
细胞共刺激分子
CD40L
编码基因和
BGH polyA
信号
a
；所述
A5)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因的
DNA
分子依次包括
CMV
启动
子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和
BGH polyA
信号
a
；所述含有三聚体孔蛋白
ProB
编码基因的
DNA
分子依次包括
CMV
启动子
b、
三聚体孔蛋白
ProB
编码基因和
BGH polyA
信号
b
；所述
A6)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
水痘带状疱疹病毒
Orf9
蛋白编码基因和水痘带状疱疹病毒
Orf63
蛋白编码基因的
DNA
分子依次包括
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
连接子
p2a
序列
、
水痘带状疱疹病毒
Orf9
蛋白编码基因
、
连接子
f2a
序列
、
水痘带状疱疹病毒
Orf63
蛋白编码基因和
BGH polyA
信号
a
；所述
A7)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和水痘带状疱疹病毒
gH
蛋白编码基因的
DNA
分子依次包括
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
连接子
p2a
序列
、
水痘带状疱疹病毒
gH
蛋白编码基因和
BGH polyA
信号
a
；所述
A8)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和水痘带状疱疹病毒
gB
蛋白编码基因的
DNA
分子依次包括
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
连接子
p2a
序列
、
水痘带状疱疹病毒
gB
蛋白编码基因和
BGH polyA
信号
a
；所述
CMV
启动子
a
的核苷酸序列如序列2所示；所述
BGH polyA
信号
a
的核苷酸序列如序列5所示；所述含有4个连续重复的
CPG
序列的
DNA
分子的核苷酸序列如序列7所示；所述连接子
p2a
序列如序列8所示；所述连接子
f2a
序列如序列
19
所示；所述
CMV
启动子
b
的核苷酸序列如序列
13
所示；所述
BGH polyA
信号
b
的核苷酸序列如序列
16
所示
。4.
根据权利要求1‑3任一所述的重组病毒，其特征在于：所述
A1)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因的
DNA
分子依次由
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和
BGH polyA
信号
a
组成；所述
A2)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和
CPG
序列的
DNA
分子依次由
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
含有4个连续重复的
CPG
序列的
DNA
分子和
BGH polyA
信号
a
组成；所述
A3)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和细胞因子
IL21
编码基因的
DNA
分子依次由
CMV
启动子
a、
水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因
、
连接子
p2a
序列
、
细胞因子
IL21
编码基因和
BGH polyA
信号
a
组成；所述
A4)
中，所述含有水痘带状疱疹病毒
gE
蛋白编码基因和
T
细胞共刺激分子
CD40L
编码基因的
DNA
分子依次由

【专利技术属性】
技术研发人员：周东明，杨茜，邢嫚，
申请(专利权)人：苏州相奕生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：